冷保存对大鼠部分移植肝再生的影响

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1、冷保存对大鼠部分移植肝再生的影响作者：袁晟光王继见董家鸿【摘要】目的探讨冷保存对大鼠部分肝移植术后肝再生的影响。方法健康SD大鼠分为Ⅰ组(肝切除组)、Ⅱ组(冷保存1h部分肝移植组)和Ⅲ组(冷保存8h部分肝移植组)。观察各实验组生存率，比较各组术后1、6、12、24、48、72、168h肝质量/体质量比率、肝再生率、有丝分裂指数及增殖细胞核抗原表达。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组7d存活率分别为100%、90%、40%；Ⅲ组术后2～3d大鼠肝质量/体质量比率、肝再生率、有丝分裂指数较Ⅰ、Ⅱ组明显偏低(P<0.05)；Ⅲ组术后12h内增殖细胞核抗原表达较其余两组明

2、显偏低(P<0.05)，48h才达高峰，至第7天阳性表达仍处高水平。结论长时间冷保存降低了部分肝移植术后的肝再生能力和大鼠术后生存率。【关键词】部分肝移植；肝再生；冷保存；大鼠　　Effectofcoldpreservationonliverregenerationafterpartiallivertransplantationinrats【Abstract】ObjectiveToevaluatetheeffectofdifferentdurationofcoldpreservationonsurvivalrateandliverregenera

3、tionafterpartiallivertransplantationinrats.MethodsAllSDratsitoticindexandtheexpressionoftheproliferativecellnuclearantigen(PA)ongthreegroupsathour1,6,12,24,48,72and168afteroperation.ResultsThe7daysurvivalrateinGroupsⅠ,ⅡandⅢitoticindexinGroupⅢainedatahighlevelatday7.ConclusionLo

4、ngperiodofcoldpreservationsignificantlyimpairstheregenerativeabilityoftheliverandsurvivalrateofratsafterpartiallivertransplantation.【Keyg/kg氨苄青霉素，自由进食饮水。　　1.2.2部分肝切除：乙醚麻醉，腹部正中线切口入腹，游离肝脏后将左叶及尾状叶结扎切除。术后处理同部分肝移植。　　1.3观察指标及其检验方法　　1.3.1肝质量/体质量比率及肝再生率：肝质量/体质量比率为大鼠处死时肝脏湿质量与大鼠体质量百分比。肝再生

5、率(%)=［C-(A-B)］/(A-B)×100%，其中A为供肝减体积前肝质量或肝切除组大鼠理论肝质量，B为切除肝质量，C为最后取下的再生肝质量。　　1.3.2有丝分裂指数：每10个高倍视野(×400)下核分裂肝细胞数。　　1.3.3肝组织增殖细胞核抗原(proliferativecellnuclearantigen,PA)表达：采用免疫组化方法。HistostainTMPlusKits购自北京中山生物技术有限公司；小鼠抗PA多克隆抗体购自中国博士德公司。高倍(×400)视野下计数1000个肝细胞中PA阳性细胞数。　　1.3.4大鼠生存状况：每组10

6、只大鼠，观察7d生存情况。　　1.4统计学分析所有数据以±s表示。SPSS10.0软件包进行统计分析，多组间比较采用ANOVA检验，方差不齐则采用Kruskaleier法绘制生存曲线，LogRank检验。P<0.05为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1肝质量/体质量比率如表1所示，Ⅲ组大鼠术后第2、3天肝质量/体质量比率较Ⅰ组及Ⅱ组明显偏低，但到第7天Ⅱ、Ⅲ组动物肝质量/体质量比率明显高于Ⅰ组。表1各组大鼠肝质量/体质量比率(略)　　2.2肝脏再生率如图1所示，Ⅰ、Ⅱ组术后肝再生迅速，至术后第7天时分别接近和超过原来肝脏大小，两组再生率比

7、较差异无统计学意义。Ⅲ组术后2～3d大鼠肝再生率较Ⅰ、Ⅱ组明显偏低。　　2.3有丝分裂指数Ⅰ、Ⅱ组术后1d肝细胞出现有丝分裂象，3d达峰值。Ⅲ组术后2d才见有丝分裂象，术后3d分裂指数显著低于其余两组(图2)。　　2.4肝细胞PA表达Ⅰ、Ⅱ组术后即有PA表达增加，12～24h达峰值，以后逐渐下降。Ⅲ组术后12h内PA表达较其余两组明显偏低，48h才达高峰，至第7天阳性表达仍处高水平(图3)。　　2.5生存状况Ⅰ组大鼠无死亡，Ⅱ、Ⅲ组大鼠7d存活率分别为90%和40%。Ⅲ组大鼠存活率较其余两组明显降低(χ2=8.25，5.31，P<0.05)，生存

8、曲线见图4。　　3讨论　　肝脏大块组织切除后，可通过残肝的迅速再生来恢复肝脏体积及功能。肝脏再