植物生物技术

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1、•1植物组织培养的应用：（1）快速繁殖和规模化生产（2）培养无病毒植株（3）用于植物遗传育种：种质资源离题保存、花粉花药培养产生单倍体、胚乳培养产生三倍体、体细胞杂交、克服远缘杂交困难（4）培育转基因植物（5）突变体筛选（6）制成人工种子（7）大规模植物细胞、组织和器官培养生产次生代谢产物（8）用于植物研究：生理学、病理学、胚胎学等。••2灭菌的方法：物理灭菌：高温高压灭菌干热灭菌射线照射灭菌过滤灭菌•化学灭菌：熏蒸灭菌消毒液灭菌•3培养基的种类和特点•目前发展出的培养基有几十种，但常用的有MS、B5、white、N6、SH、KM8P等。•（1）MS培养

2、基：为培养烟草组织时设计的，是目前应用最广泛的一种培养基。•无机盐浓度高，养分平衡，尤其是铵盐和硝酸盐的含量很大•（2）White培养基，无机盐浓度较低适于生根培养•（3）N6培养基，朱至清设计的适于花粉和花药培养。•（4）B5培养基，适合于某些双子叶植物特别是木本植物的生长。•（5）SH培养基，在不少单子叶和双子叶植物上使用，效果很好。•（6）KM8P，主要用于原生质体培养•培养基的成分及配制方法可概括为四大类：1无机物：1大量元素（CHONPKMgSCa），浓度大于0.5mol/L。2微量元素（FeMnCuMoCoZn）。2有机物：碳水化合物（蔗糖、

3、葡萄糖、果糖）、维生素（VB1）、肌醇、氨基酸。3植物激素：生长素，细胞分裂素，赤霉素4其他：（1）凝固剂：琼脂（2）抗生素（3）活性炭4培养基的制备1、母液的配制：配制母液有两个好处:1可减少每次配制称量药品的麻烦2减少极微量药品在每次称量时造成的误差（1）大量元素母液:（2）微量元素母液（3）铁盐母液（4）有机化合物母液（5）激素2、培养基溶液的配制（1）分别按配方逐个加入各种贮备液，包括生长调节物质和其他的特殊补加物。（2）充分混合之后，用1mol/LNa0H和1mol/LHCl调节培养基的pH。一般来说，植物组织培养适合的pH值为5.8，当pH高

4、于6时，培养基将会变硬，低于5时，琼脂就不能很好地凝固。(3)称出规定数量的蔗糖或葡萄糖，加水直到培养基最终容积。（4）加入一定数量的凝固剂（琼脂或非态胶），加热融化（5）把培养基分装到所选用的培养容器中，每个25×150mm的试管约装培养基15m1；每个100ml三角瓶约装50ml。（6）用封口膜封口（7）灭菌（高压灭菌）对于不能用高压灭菌的药品来讲，经过滤灭菌后的药液等到高压灭菌的培养基冷却到大约60℃时，在超净工作台加入到培养基中，摇匀。第二章胚培养的意义1、克服远缘杂交不亲和性和杂种不育性，获得种间或属间杂种2.获得单倍体植株3.克服种子休眠，提

5、早结实4.缩短育种周期，提高育种效率5种子生活力的快速测定6.稀有植物的繁殖(使种子无生活力或胚发育不全的植物获得后代)第三章愈伤组织：是指将植物上的某个部分切下，形成外植体，接种到适宜的培养基上培养，其外植体组织的增生细胞产生的一团不定形的疏松排列的薄壁组织脱分化：使已分化的体细胞，在人工诱导的条件下回复到未分化的原始状态并具有细胞全能性表达潜力的过程再分化：处于脱分化状态的愈伤组织，再度分化成其他类型的细胞、组织、器官，甚至最终再生成完整植株的过程细胞全能性：所谓细胞的全能性，就是植物的每个细胞都具有该植物的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。从理论

6、上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。差异：（1）受精卵的全能性最高（2）受精卵分化后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞的低。体细胞胚胎发生：在离体培养条件下，植物体细胞形成胚性细胞，然后经过一系列形态学及生物化学的变化形成类似合子胚结构的过程。愈伤组织诱导的形成过程（三个时期）植物愈伤组织诱导：使那些已分化的体细胞包括离体的器官、组织和细胞在人工培养基上，经多次细胞分裂而失去原来的分化状态，形成无结构的愈伤组织或细胞团的过程。大致经历起动期，分裂期和形成期3个阶段植株再生的两种途径：器官发生，体细胞胚胎发生体细胞胚胎发生：在离体培养条件下，植物体

7、细胞形成胚性细胞，然后经过一系列形态学及生物化学的变化形成类似合子胚结构的过程。器官发生：是指培养条件下的愈伤组织分化形成不定根、不定芽等器官的过程。★（老师上课说要考）器官发生和体细胞胚胎发生两种形态发生的特点和区别胚状体途径形成的植株1细胞内出现方向相反的两极分化，具有根端和芽端两个分生中心2不定胚维管组织与外植体维管组织不相连3具有典型的胚胎形态发生过程形成的幼苗具有子叶4胚状体发育的苗，根和芽齐全器官途径形成的植株1单向极性，单个分生中心直接分化为器官2不定芽和不定根与愈伤组织的维管相连,无胚胎形态3不定芽的苗无子叶4先长芽后长根，或先长根后长芽

8、第四章第五章原生质体：指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞由于没有细胞壁，原生