冬虫夏草对糖尿病大鼠纤溶系统的影响

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1、冬虫夏草对糖尿病大鼠纤溶系统的影响作者：陈叶傅余芹方华伟韩亚莉杜月娟【摘要】　　目的观察冬虫夏草(CS)对糖尿病肾病(DN)大鼠纤溶系统功能的影响。方法44只大鼠随机分为正常对照组、模型组(给予链脲佐菌素55mg/kg体重腹腔注射)，CS早期干预组及冬虫夏草晚期干预组，12ofdiabeticrats.Methods44ratsodel(n=12,intraperitonealinjectiong/kgSTZ),earlyandlateCStreatedgroups(n=11).1ratademodel,1ratdiedinmodelgroupand1ratdiedinea

2、rlyCStreatedgroup.12glucose,serumcreatinine,24hoururinaryproteinexcretionined.Therenalpathologicalchangesicroscopeandthelocalexpressionsofrenalplasminogenactivatorinhibitor1(PAI1)andtissuetypeplasminogenactivator(tPA)easuredbyimmunohistochenmicaltechnique.ResultsInmodelgroup,renalgluc

3、ose,serumcreatinine,24hoururinaryproteinexcretionandPAIcreatinine,24hoururinaryproteinexcretion,tPAodelgroup(P＜0.05),andtheaboveindexesodelgroupglucoseininearlyandlatetreatedgroupshadnoobviousdifferenceparedodelgroup.TheeffectinearlyCStreatedgroupechanismsofCStreatingdiabeticnephropathy

4、.【Keyinogenactivator;Plasminogenactivatorinhibitor1　　糖尿病肾病(DN)是糖尿病的最常见、最严重的并发症之一，严重威胁人类的健康。关于DN的发病机制，目前认为高糖造成的肾脏血流动力学改变及葡萄糖本身代谢异常所致的一系列后果是造成肾脏病变的基础，其中肾脏细胞外基质(ECM)蓄积引起的肾小球硬化与间质纤维化是DN发展至终末期肾衰竭的主要病理表现。ECM是细胞外大分子构成的网络，主要包括胶原、层黏连蛋白及纤维连接蛋白等，其过度堆积或降解减少均视为病理性重塑，是肾脏病变发生发展的主要原因。生理状态下，ECM受各种因子的调节保持生

5、成和降解的平衡，其中主要为金属蛋白酶、丝氨酸蛋白酶、组织蛋白酶、纤溶酶原等，而纤溶酶原激活后不仅能直接降解细胞外基质，还能激活金属蛋白酶间接降解基质，处于各种调节酶系的上游，发挥更为重要的作用。冬虫夏草(CS)为我国传统名贵中药，具有补肺肾、止咳嗽、益虚损、养精气之功能，但其保护肾脏的具体机制尚未完全明了，本研究观察CS干预对局部纤溶系统紊乱的作用，揭示其可能机制。　　1材料与方法　　1.1实验动物　　清洁级8周龄雄性a公司。兔抗大鼠纤溶酶原激活物(tPA)抗体为博士德产品；兔抗大鼠纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)、兔抗大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)抗体为美国SantaCruz

6、公司产品；兔抗大鼠纤维连接蛋白(FN)为北京中杉金桥生物有限公司产品。　　1.3动物模型的建立与分组　　大鼠适应性喂养1g/kg体重腹腔内注射，STZ粉末用pH4.5的柠檬酸缓冲液溶解，正常对照组给予同等剂量的柠檬酸缓冲液腹腔内注射。72h后给予尾静脉采血测血糖，凡随机血糖在16.7mmol/L者视为糖尿病模型成功(其中有1只未成模型)。CS干预组造模同模型组，早期干预组大鼠于成模后即开始每天给予CS粉末混悬液5.0mg/kg/体重灌胃，晚期干预组于成模后4in；枸橼酸水浴修复，正常山羊血清封闭20min，滴加不同浓度的一抗；4℃过夜，滴加生物素标记的二抗，37℃20min

7、，滴加ABC，37℃20min，滴加显色剂DAB，发现组织已经染色后马上用蒸馏水冲洗中止显色。苏木素复染、常规脱水、透明、封片。采用北京航空航天大学计算机中心提供的医学彩色图像分析软件，分析每只小鼠的肾脏皮质组织化学染色片，100倍显微镜下，视野上、下、左、右、中各任意取2个肾小球(共10个肾小球)进行分析，计数单位面积肾小球内免疫组化阳性组织所占的比例。　　1.6统计学处理　　采用SPSS17.0软件包，各组数据以x±s表示，采用单因素方差分析。　　2结果　　2.1一般情况和生化指标的变化　　注射STZ后大鼠出现