酸枣仁提取物急性毒性实验研究论文

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1、酸枣仁提取物急性毒性实验研究论文【摘要】目的观察酸枣仁醇提取物的急性毒性反应。方法①小鼠尾静脉注射不同剂量的酸枣仁醇提取物，连续观察14d，记录小鼠的急性毒性反应，并计算LD50及LD5095%可信限；②小鼠灌胃给药，测定一次给予酸枣仁醇提取物的安全剂量。结果①静脉注射酸枣仁醇提取物后，部分小鼠出现中毒反应并死亡，测得LD50为27.5g·kg-1，LD5095%可信限为25.1～30.1g·kg-1.freelenZiziphiSpinosae(SZS)inmice.Methods①Alcohol-solubl

2、eextractofSZSitofLD50inistrationinmice,theacutetoxicreactioniceshoititinistration,allmicesurvived,.freelen’sdoseby340times.ConclusionSZSissafeforclinicaladministration.KeyenZiziphiSpinosae(SZS);Acutetoxity;Medianlethaldose(LD50)酸枣仁为鼠李科植物酸枣ZiziphusjujubaMill.v

3、ar.spinosa(Bunge)HuexH.F.chou的干燥成熟种子，为安神药，归肝、胆、心经。酸枣仁中含有大量的脂肪油及多种氨基酸、皂苷和黄酮等。以往的研究显示，酸枣仁提取物具有明显的镇静、催眠和抗惊厥作用，其中枢抑制作用的有效成分为棘苷和酸枣仁皂苷A［1～3］。酸枣仁汤和酸枣仁汤加味治疗难治性室性早搏均取得显著疗效［4，5］。酸枣仁总皂苷对原发性高血压大鼠呈现明显的降压作用［6］。此外，酸枣仁提取物尚能改善心肌缺血和脑缺血，因此，临床具有很好的应用前景。但文献中对酸枣仁毒性方面的研究较少，本实验采用尾静脉

4、注射和灌胃给药两种方式观察并比较了酸枣仁醇提取物对小鼠的急性毒性。1材料1.1药品酸枣仁，产自天津蓟县，2008-03购自天津中药饮片厂。临用前提取并浓缩至17g·ml-1备用。1.2动物昆明健康小鼠，体重（20±2）g，雌雄兼用。购自天津药物研究院动物室，合格证号为津实动准字第02号。2方法2.1酸枣仁醇提取物的制备称取粉碎的酸枣仁粉末500g(过40目筛)，置圆底烧瓶中，加入一定体积的蒸馏水，按提取时间与次数进行水提，抽滤，去除药渣，将所得水提液真空浓缩，再加入一定浓度的乙醇，进行醇沉，静置24h，用循环水式

5、真空泵进行抽滤，抽滤两遍，得到透明液体；用旋转蒸发器经减压蒸发，将提取液浓缩至17g·ml-1备用。2.2改良寇氏法测定静脉注射酸枣仁醇提取物的LD50［7］2.2.1预实验取小鼠12只，雌雄各半，随机分成3组，每组4只。实验前禁食12h，自由饮水。将酸枣仁醇提取物备用液用生理盐水稀释成3个浓度，每鼠按20ml·kg-1进行尾静脉注射。注射后连续观察72h，记录小鼠的中毒及死亡情况。如此反复实验，直到找出0%致死剂量和100%致死剂量为止。经预实验得出，酸枣仁醇提取物0%致死剂量为17g·kg-1，100%致死剂

6、量为40g·kg-1。根据上述结果确定正式实验分5个剂量组，按下式求出剂量比。r=(N-1)Dn/Dm式中,r=相邻两组剂量的比值；Dm=100%死亡的剂量；Dn=0%死亡的剂量；N=正式实验所需组数。计算正式实验r=0.81（符合r=0.65～0.85）。2.2.2正式实验取小鼠72只，随机分为6组，每组12只。1～5组为受试药物组，6组为生理盐水对照组。给药前，小鼠禁食12h，自由饮水。各小鼠尾静脉注射20ml·kg-1，对照组注射等容量的生理盐水。分组情况及其剂量见表1。注射后密切观察，第2天起，每天观察2

7、次，连续观察14d。记录动物的反应及死亡情况。死亡的动物进行尸检，肉眼观察脏器的变化。未死亡的小鼠继续观察，14d后称量体重，比较体重的变化。2.2.3计算LD50应用改良宼氏法计算。LD50＝log-1［Xm-ī(∑p-0.5)］；LD50的95%可信限＝log－1(logLD50±1.96×SlogLD50)；SlogLD50＝i·∑Pi(1-P)/(n-1)；LD50的平均可信限＝LD50±（LD50的95%可信限的高限–低限）/2。2.3小鼠灌胃给药测定酸枣仁醇提取物的安全剂量2.3.1预实验小鼠12只，

8、雌雄各半，随机分为3组，每组4只。禁食12h后将最大浓度药液（17g·ml-1）按20ml·kg-1灌胃，分别为每日1次、2次和3次。给药后密切观察小鼠的反应。第1组（Dm）小鼠仅出现活动减少、呼吸急促，未见其他症状及改变；第2组小鼠有1只死亡，第3组全部死亡。故以17g·ml-1为最大浓度，20ml·kg-1的容量给小鼠灌胃，测定酸枣仁提取物的安全剂量。2.3.2正式实