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《滑膜干细胞向成骨细胞及软骨细胞分化的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、滑膜干细胞向成骨细胞及软骨细胞分化的实验研究#**51015（广州中医药大学第一附属医院三骨科，广州，510405）摘要：目的：探讨滑膜间充质干细胞（SMSCs）向成骨细胞及软骨细胞分化特性。方法：将第四代SMSCs以5×106接种于3块6孔板，其中一块板诱导SMSCs向软骨细胞分化，剩下2块板诱导SMSCs向成骨细胞分化，每板4孔，2孔为空白对照孔，另2孔为观察组，2天后换液，加入诱导液。空白组加入含10%胎牛血清（FBS）的L-DMEM培养基继续培养，成骨诱导组在基础培养基中上加入成骨诱导剂（含β甘油磷酸钠10mmo
2、l/L、地塞米松0.1umol/L、维生素C50mg/L），软骨细胞组为在基础培养基中加入软骨诱导剂（含转化生长因子β110μg/L、地塞米松0.1μmol/L、维生素C50mg/L。在第14天取出1块6孔板做阿尔新蓝染色，1块6孔板做碱性磷酸酶染色；第20天取出剩余6孔板做茜素红染色。结果：SMSCs经软骨诱导液培养后，细胞体积增大，由梭形变为椭圆形状，部分细胞核偏位，呈肾形，培养14后可见细胞周围有基质分泌，阿尔新蓝染色阳性。SMSCs经成骨诱导液培养后细胞从梭形变为类圆形，细胞体积明显增加，14天时细胞集落的表面可见有
3、颗粒状物质分泌，碱性磷酸酶染色为阳性，21天时茜素红染色阳性，表现出成骨细胞的特点。结论：SMSCs广泛存在于滑膜组织内，表现出干细胞特性，在特定条件下可向成骨细胞及软骨细胞分化。关键词：滑膜间充质干细胞；成骨细胞；软骨细胞中图分类号：R-33120ExperimentalstudyonSynovialmesenchymalstemcellsdifferentiationintoosteoblastsandchondrocytesZengJianchun,FanYueguang,ZengYirong,LiJie,LiFeil
4、ong(Thethirddepartmentoforthopaedics,ThefirstaffiliatedhospitalofGuangzhouuniversityof2530354045Chinesemedicine,Guangzhou,510405)Abstract:Objective:Toexplorefeaturesofsynovialmesenchymalstemcells(SMSCs)differentiationintotheosteoblastandchondrocytes.Methods:Thefou
5、rthgenerationofSMSCswereseededin36-wellplatesby5×106,inoneoftheplatesSMSCswereinducedtochondrocytes,intheremainingtwoboardSMSCswereinducedtodifferentiateintoosteoblast,4holedineachplate,twoholeswereblankholes,andtheothertwoholesweretheobservationgroup,twodayslatert
6、heculturemediumwaschangedwithinducingfluid.ThecontrolgroupwasaddedL-DMEMmediumcontaining10%fetalbovineserum(FBS),theinductinggroupwasaddedinducingagentonthebasisoftheL-DMEMmedium(osteogenicgroupcontainingβglycerophosphate10mmol/L,dexamethasone0.1umol/L,vitaminC50mg
7、/L;thechondrogenicgroupcontainintransforminggrowthfactorβ110μg/L,dexamethasone0.1μmol/L,vitaminC50mg/L,insulin6.25mg/L,transferrin6.25ug/ml,bovineserumalbumin1.25mg/ml.Onthe14thdayremoveda6-welldoneAlcianbluestaining,a6-wellplatedonealkalinephosphatasestaining;onth
8、e21stdayremovetheremaining6-wellplatedonealizarinredstaining.Results:VolumeofSMSCsincreasedafterinducedbychondroinductivemedium,thespindlechanged
