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时间:2018-11-19
《藏药十八味诃子利尿丸抗菌性研究 》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、藏药十八味诃子利尿丸抗菌性研究傅永红,李红玉,张春江,员田【关键词】十八味诃子利尿丸;,,抑菌活性;,,最小抑菌浓度 摘要:目的研究藏药十八味诃子利尿丸体外抑菌活性。方法用琼脂扩散法和微量稀释法研究其抑菌圈和最小抑菌浓度(MIC)。结果十八味诃子利尿丸具有抑制金黄色葡萄球菌、耐药表皮葡萄球菌、非耐药表皮葡萄球菌、粪肠球菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单孢杆菌、白色念珠菌的生长繁殖的活性,另外不同溶剂解药品抑菌性有一定差异。结论十八味诃子利尿丸对临床分离的白色念珠球菌和耐药表皮葡萄球菌有较强的抑制作用,具有较高的临床应用价值。 关
2、键词:十八味诃子利尿丸;抑菌活性;最小抑菌浓度 Abstract:ObjectiveToinvestigatetheinhibitoryeffectsofShibaicrobeinvitro.MethodsInhibitionzoneandminimuminhibitoryconcentration(MIC)inedbyusingMHagarplates,PDAagarplatesandminidilution.ResultsItonasaeruginosaATCC2785,Bacillussubtilis,methicillinresistan
3、tStaphylococcusepidermidis,Candidaalbicans,methicillinsensitiveStaphylococcusaureus,Bacilluscereus,Enterococccusfaecalis,besidestheinhibitoryeffectofmicrobeethicillinresistantStaphylococcusepidermidis,thusitispossibletobeappliedtoclinicaltherapy. Keyonasaeruginosa)ATCC2785。临床分
4、离菌株:枯草芽炮杆菌(Bacillussubtilis),蜡状牙孢杆菌(Bacilluscereus),耐药表皮葡萄球菌(methicillinsesistantStaphylococcusepidermidis),白色念珠菌(Candidaalbicans),非耐药表皮葡萄球菌(methicillinsensitiveStaphylococcusaureus),粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)。以上菌株均由甘肃省临床检验中心提供。 1.3培养基MH琼脂培养基、PDA培养基、牛肉膏蛋白胨培养基(购于中国药品生物制品鉴定所)。
5、1.4药液的制备分别用100%DMSO,50%DMSO和无菌水溶解十八味诃子利尿丸并配制药品浓度为100,50,10mg・ml-13个梯度。 1.5菌液制备取实验菌种于1ml无菌始菌悬液中,吹打均匀;菌悬液a:吸取初始菌悬液50μl于950μl生理盐水中混匀,调节菌液浓度为106CFU(colonyformingunit,CFU)/ml,用于抑菌圈测定;菌悬液b:吸取初始菌悬液500μl于10ml牛肉膏蛋白胨中培养基中,调节菌液浓度为106CFU(collonyformingunit,CFU)/ml,用于最小抑菌浓度(MIC)的测定。 1.6抑菌
6、圈测定无菌条件下取菌悬液a200μl滴加于MH琼脂培养基和PDA培养基(用于白色念珠菌)表面,涂布均匀,放置牛津杯,待菌液浸入且牛津杯吸附后加100μl用100%DMSO,50%DMSO和无菌水溶解浓度为100,50,10mg・ml-1的十八味诃子利尿丸药样于牛津杯中,置37℃培养箱培养24h(白色念珠球菌30℃培养48h),测定抑菌直径DD。 1.7最小抑菌浓度(MIC)的测定96孔细胞培养板中每孔加100μl菌悬液b,然后分别用100%DMSO,50%DMSO和无菌水溶解的浓度为100mg・ml-1的药品采用倍比稀释法稀释至50,25,12.5
7、,6.25,3.125,1.56,0.78,0.39,0.195,0.098,0.049,0.0245mg・ml-112个浓度梯度,置37℃培养箱24h(白色念珠球菌30℃培养48h),测定最小抑菌浓度(MIC)。 1.8数据处理实验数据均为3次平行实验结果的平均值。 2结果 2.1十八味诃子利尿丸抑菌圈结果实验以金黄色葡萄球菌、耐药表皮葡萄球菌、非耐药表皮葡萄球菌、粪肠球菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌等代表革兰氏阳性(G+)菌,以大肠埃希菌、铜绿假单孢杆菌代表革兰氏阴性(G-)菌,白色念株菌代表真菌〔7〕对十八味诃子利尿丸进行体外抑菌药理活性
8、的初步研究。结果见表1。对表1中数据分析可得:十八味诃子利尿丸具有抑制金黄色葡萄球菌、耐药表皮葡萄球菌、非耐
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