大鼠全脑照射后脑内一氧化氮含量的变化论文

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1、大鼠全脑照射后脑内一氧化氮含量的变化论文【摘要】［目的］观察大鼠全脑照射后脑组织中一氧化氮（NO）含量的变化，探讨放射性脑损伤中NO所起的作用。［方法］对SD大鼠用4MeV电子线单次全脑5Gy、15Gy和30Gy照射后，于照射后6h、1d、2d和3d检测大鼠大脑皮层中NO的含量。［结果］5Gy、15Gy和30Gy照射后1d、2d，脑内NO随照射剂量递增而增加（P0.05），而在6h和3d各剂量组无差异。各剂量组在1d时脑内NO达峰值，2d时逐渐下降，3d时恢复对照组水平。［结论］大鼠全脑照射后脑组织中NO升高，它在放射性脑损伤的发病机制中可能有重要的作用。

2、【关键词】脑辐射电离一氧化氮大鼠辐射损伤脑损伤ChangesonConcentrationofNitricOxideinBrainFollo.TheconcentrationsofNOinthebraincortextissuesupernatanteasuredatthe6hour,day1,day2andday3postirradiation.［Results］ThelevelsofNOinthebrain1dayand2dayspostirradiationincreasedightplayanimportantroleinthepathogenes

3、isofbrainradiationinjury.Keyl/100g体重）对大鼠进行腹腔麻醉，用PhilipsSL18型加速器产生的能量为4MeV的电子线照射，详细的投照与剂量确认方法见前文报告3。1.2实验方法各组大鼠麻醉后，用含肝素的生理盐水（250ml左右）经主动脉作全身灌注，完整取脑。取大脑皮层100mg左右，按20：1加入0.1molPBS液后充分研磨10min，将匀浆置于Eppendorf管内，在4℃恒温、15000r/min的条件下离心20min（德国Biofuge22离心机），取上清液于-70℃保存。1.3测定指标将上述方法收集的大鼠大脑皮

4、层上清液每组取6份进行测量，依照南京建成生物工程研究所提供的试剂盒的说明进行操作。1.4统计学处理方法计算14个组的脑组织中一氧化氮的含量，以均数±标准差(x±s)表示。采用方差分析，先分析同一时间点不同剂量之间的差别；然后再分析同一剂量下不同时间点之间的差别。2结果6h与3d时各剂量组之间大鼠脑组织中NO含量无差异。1d时5Gy、15Gy和30Gy组大鼠脑皮质NO含量较对照组明显升高（P0.01），随着剂量递增脑内NO含量增加，其中15Gy和30Gy组同5Gy组比较有明显差异（P0.01），15Gy和30Gy组之间比较P0.05。2d时15Gy和30Gy

5、组较对照组明显升高（P0.01），15Gy和30Gy组较5Gy组P0.01，而15Gy和30Gy组之间比较没有差异（P0.05）。而在5Gy照射后脑内NO含量1d时达到高峰，同其它时间点比较差异显著（P0.01）。15Gy及30Gy照射后表现为同样的结果，1d时为峰值，同其它时间点比较差异显著（P0.01），2d时逐渐下降，同1d及3d比较有显著性差异，与6h组比较也有差异（P0.05）。为了了解实验中水合氯醛腹腔麻醉对NO含量的影响，设计了麻醉但未照射的对照组，大鼠脑组织上清液中NO的含量麻醉对照组为（0.87±0.08）μmol/g，与正常对照组（0.

6、86±0.06）μmol/g比较差异无显著性。3讨论目前已知NOS亚型有3大类，即神经元型（nNOS）、内皮细胞型（eNOS）和诱导型（iNOS），nNOS和eNOS在正常生理条件下即有表达，而iNOS的合成需外界刺激的作用，iNOS一旦生成即连续催化产生NO，而过量的NO则引发组织的某些病理生理过程的发生4。亚致死剂量γ射线照射小鼠后，体内一些器官（肝、肠、肺、肾、脑、脾和心脏）NO产生增加。Lestaevel等5报道给予大鼠15Gy全身照射，脑内的NO于照射后即刻升高，1d达到高峰。用iNOS抑制剂（AMT）处理后，NO下降到平均基础水平，说明NO升高

7、可能通过iNOS介导。Clarencon等6通过腹主动脉探测NO电信号实验发现，γ射线15Gy照后12min增高13%，照后130min缓慢增高18%；另外，经胸腔穿刺取血检测NO电信号，15Gy照后90min增高17%，照后24h增高25.6%，照后3d明显降低。本研究应用硝酸还原酶法检测大脑皮层组织上清液中NO的变化，在排除了实验中麻醉对含量的影响后，我们观测到在1d、2d两个时间点，NO水平表现出剂量依赖性升高。而在5、15和30Gy照射后1d时脑内NO达高峰，2d逐渐下降，3d恢复照射前水平。由此看来，在大鼠大脑受到较大剂量照射后，NO在脑内含量升

8、高。结合大鼠在照射后，脑内血液循环和兴奋性氨基酸、炎性细胞因子等变