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时间:2018-11-19
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1、丹参酮ⅡA乳剂对小鼠脑缺血的保护作用论文何晓静,王守涛,周娟,肇丽梅【摘要】目的观察丹参酮ⅡA对小鼠脑缺血、脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用小鼠断头模型、小鼠脑卒中模型、小鼠脑缺血再灌注模型,观察丹参酮ⅡA注射乳剂对小鼠断头后存活时间、喘气次数,小鼠脑卒中后的神经行为,小鼠脑缺血再灌注后脑内SOD活性、MDA含量的影响。结果丹参酮ⅡA能延长小鼠断头后的存活时间、增加断头后的喘气次数,改善脑卒中小鼠的神经行为.freeliceinducedbycerebralischemiaorcerebralischemia-reperf
2、usion.MethodsMiceg/kgi.v.respectively.Themodelsofmicecerebralischemiaandcerebralischemia-reperfusionade.Thesurvivaltime,gaspingtimebydecapitationandbehavioreasured.ResultsTanshinoneⅡAcouldsignificantlyincreasethesurvivaltimeandgaspingtime,improvethebehaviorofmice.Ta
3、nshinoneⅡAcouldalsoenhancethesuperoxidedismutase(SOD)activityandreducethemalonyldialdehyde(MDA)contentinmicebraintissueatthesametime.ConclusionTanshinoneⅡAhasprotectiveeffectagainstbraindamageinducedbycerebralischemiaandcerebralischemia-reperfusioninmice.Keyulsion;c
4、erebralischemia;cerebralischemia-reperfusion;freeradical丹参酮(tanshinone)是丹参的有效活性成分,包括丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB等脂溶性成分和丹酚酸甲、丹酚酸乙、丹参素等水溶性成分,其中丹参酮ⅡA为丹参酮中含量最高的活性成分[1]。为了解决丹参酮ⅡA不溶于水,成盐后注射给药不易透过血脑屏障,将丹参酮ⅡA做成微乳制剂,在不改变其理化性质的基础上,保持其原有的脂溶性和穿过脂双层生物膜、透过血脑屏障的能力。本文利用小鼠脑缺血及脑缺血再灌注模型,观察丹参酮ⅡA对脑
5、缺血的保护作用,探讨其作用机制。1材料1.1药品与试剂受试品:丹参酮ⅡA注射乳剂(0.3mg·mL-1,批号200606,北京中海康科技开发公司提供,临用前用5%葡萄糖注射液稀释至所需浓度),MDA、SOD试剂盒(南京建成生物工程研究所)。1.2仪器CL770全自动生化分析仪,日本岛津公司生产。1.3动物昆明种小鼠,雌雄各半,体质量18~24g,中国医科大学第二临床学院医学试验动物中心提供,实验动物生产许可证号SCXK[辽]2003-0013号。1.4统计方法所有实验数据均以±s表示,采用SPSS11.0统计软件进行方差分析
6、(oneg/kg;阳性对照组尾静脉注射丹参酮ⅡA磺酸钠注射液5.2mg/kg;空白对照组尾静脉注射等容量的5%葡萄糖注射液20mL/kg。给药10min后,迅速从小鼠双耳后颈部断头,观察小鼠断头喘气的时间及喘气次数,实验结果进行LSD检验。2.2小鼠脑卒中模型[3]取体质量22~24g的雄性昆明种小鼠50只,分组、给药同实验“2.1”。给药后10min小鼠用乙醚浅麻醉,分离两侧颈总动脉及迷走神经,左侧颈总动脉连同迷走神经下置一根直径为0.2mm的细钢丝,结扎后将钢丝抽出,右侧颈总动脉及迷走神经完全结扎。术后按下述指标观察缺血
7、1.5h内卒中指数,每0.5小时记录1次,并计算3次分数总和。评分标准:(1)毛蓬乱竖起,动作缓慢或活动减少,触耳反应加强,眼睑下垂,脑卒中指数各1分,总计4分;(2)头翘起,眼球固定,后肢向外向后伸展,转圈,抽搐或痉挛,脑卒中指数各3分,总计15分;(3)昏迷,脑卒中指数为6分。2.3小鼠脑缺血再灌注模型[4]取体质量22~24g的雄性昆明种小鼠60只,随机分6组,每组10只,实验组与阳性对照组分组与给药剂量同实验“2.1”,假模型组及模型组尾静脉注射等容量的5%葡萄糖注射液20mL/kg。给药后10min,各组小鼠用乙醚麻
8、醉,分离两侧颈总动脉并结扎,导致脑缺血,结扎20min后松开,恢复颈总动脉血流,造成缺血再灌,小鼠手术后缝合并继续饲养。连续给药3d,每天1次。假模型组只分离双侧颈总动脉而不结扎。末次给药后30min将各组小鼠处死,取脑,试剂盒测定MDA的含量及SOD酶活性。3结果3.1丹参
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