组织工程骨复合骨形态发生蛋白修复兔颅骨缺损论文

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1、组织工程骨复合骨形态发生蛋白修复兔颅骨缺损论文.freeledicalengineering;polyglycolicacid;os-teoblasts;collagen;bonemorphogeicproteinsAbstract:AIMToexplorethepracticalvalueofrepairingthedefectsofrabbitcalvarialplantedontotheBMPpoundedpolyglycolicacid（PGA）matrixcoatedatrixcoated-ly.InGroupOne，thepositeofosteoblast-likecellsan

2、dPGAmatrixedefectareaontheothersideascontrolsplanted.InGroupTeeacroscopicexamination，histol-ogy，x-rayandmeasurementoftheash-plantsed.RESULTSOsteogenesisofgroupOneo龄，体质量2.0～2.5kg，雌雄不限（第四军医大学西京医院动物实验外科提供）.取864合剂（0.3mLkg-1）im麻醉动物，无菌条件下暴露颅盖顶骨，用骨凿在顶骨两侧各造成约1.5cm×1.0cm的近长方形全层骨缺损模型［1］.随机各取20只兔分为3个实验组，每只颅盖顶骨

3、两侧各造1个全层骨缺损.右侧为实验侧，属于实验组1的为实验侧Ⅰ，属于实验组2的为实验侧Ⅱ，属于实验组3的为实验侧Ⅲ，每实验组另一侧作为对照.1.2方法1.2.1聚羟基乙酸基质材料的包埋将直径15μm聚羟基乙酸（polyglycolicacid，PGA）纤维无纺网（Davis-Geck公司）以0.6mLL-1戊二醛交联后的骨胶原包埋固定，得交联胶原包埋PGA基质材料.材料消毒采用750mLL-1乙醇浸泡及紫外线照射.1.2.2BMP复合基质材料的制备将小牛的BMP（第四军医大学西京医院骨科研究所提供）溶于1mL4molL-1GuHCl/0.05molL-1CaCl2复合液，将20份胶原包埋PGA

4、的基质材料放入溶好的BMP稀释液中，然后用蒸馏水透析48h，冻干，环氧乙烷消毒，真空中清除气体备用.每份材料中含bBMP3mg.1.2.3成骨样细胞的分离将实验组1和实验组2的新西兰兔所取的自体颅骨组织分别机械粉碎至1mm×1mm×1mm的骨片，以PBS缓冲液冲洗2遍.然后加入2倍于骨体积的I型胶原酶（sigma公司，1mgmL-1）在37°C恒温水浴消化90min，经过滤、漂洗，制成细胞悬液，细胞计数浓度为3.35×107个mL-1.1.2.4成骨样细胞移植各取50μL的自体成骨样细胞即刻种植在复合BMP的胶原包埋的聚羟基乙酸（PGA）的基质材料上，并将各复合体移植到实验侧I，将不含BMP的

5、基质材料复合体移植到实验侧Ⅱ的自体骨缺损区，实验侧Ⅲ的骨缺损区仅植入单纯PGA基质材料;对照侧均不作任何植入.创面皮肤逐层缝合.术后肌注20万u青霉素，分笼饲养.1.2.5检测项目①组织学检查:实验组（1，2，3）分别于术后2，6，8及12LL-1甲醛固定24h，脱钙，梯度乙醇脱水，石蜡包埋，组织切片作HE染色.②X线摄片及大体标本检查，实验组（1，2，3）于术后8orphogeicproteiinrepairingrabbitskullaterialsinrabbitskulldefects［J］.ZhonghuaChuangshangZazhi（ChinJTraumatol），1994;1

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