敦煌石室大宝胶囊对亚急性衰老大鼠脑功能的保护效应及作用机制研究论文

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1、敦煌石室大宝胶囊对亚急性衰老大鼠脑功能的保护效应及作用机制研究论文.freelechanismofDunhuangShishiDabaoCapsule(DHDB)onbrainfunctionofsub-acutelyagingrats.MethodsExceptnormalgroup,thesubacutelyagingmodelratsadebyinjectingD-galintoabdominalcavitycontinuallyanddividedinto5groupsrandomly：modelgroup,positivecontrolgrou

2、pandhigh,middle,loodelgroupalgroup(P0.05),Ca2+levelonoamineneurotransmitterlevelsandregulatecalciumhomeostasisinthebraintissueofagingmodelrats,andplayanimportantroleinimprovingtheagingcerebralfunction.Keyonoamineneurotransmitter;calciumhomeostasis;subacutelyagingmodel;DunhuangShi

3、shiDabaoCapsule现代医学证明,衰老是机体细胞、组织、器官和系统结构功能增龄性衰退的过程,其中神经递质含量变化是神经系统衰老的主要指标之一1;同时,衰老钙假说认为,细胞内钙超载或钙稳态失调可能是细胞损伤、衰老、死亡的最后的共同途径2。敦煌石室大宝胶囊由熟地黄、黄芪、当归、茯苓、大黄等药物组成,具有强肾填精、健脾益气、涤痰祛瘀、安和五脏的功效。已有研究结果表明,敦煌石室大宝胶囊能够降低脑组织单胺氧化酶-B(MAO-B)活性,提高谷胱甘肽过氧化物本系酶(GSH-Px)、钠钾ATP酶(Na+-K+-ATPase)活性,具有调节脑细胞能量代谢、保护脑

4、功能的作用3-4。为进一步探讨敦煌石室大宝胶囊对亚急性衰老大鼠脑功能的保护效应及作用机制,本研究观察了该制剂对亚急性衰老模型大鼠脑组织单胺类神经递质表达水平及钙平衡的影响。1材料与方法1.1动物SPF级g2+-ATPase测试盒,批号20071113;钙ATP酶Ca2+-ATPase测试盒,批号20071113;钙离子(Ca2+)测试盒,批号20071113,以上测试盒均购自南京建成生物工程研究所。722型分光光度(06-2-87)计(北京瑞利分析仪器公司);快速混匀器(XK96-A);数显恒温水浴锅(郑州杜甫仪器厂);酶联免疫检测仪(美国BIO-RAD

5、);快速混匀器(XK96-A)。1.3分组、造模与给药用随机数字表法5分为空白对照组、模型组、桂附地黄丸组(阳性对照组),以及DHDB大、中、小剂量组,每组8只,雌雄各半,分笼饲养。参照文献6方法,空白对照组每日皮下注射等量生理盐水,其余各组受试动物颈部皮下注射D-半乳糖0.125g/kg,每日1次,连续40d。空白对照组、模型组给予同体积蒸馏水灌胃;DHDB大、中、小剂量组分别予0.8、0.4、0.16g/(kg?d)敦煌石室大宝胶囊药剂灌胃,等效剂量按人与动物体型系数折算7(相当于成人剂量的10、5、2倍);阳性对照组给予0.4g/(kg?d)桂附地

6、黄丸灌胃(相当于成人剂量的5倍)。各组均以蒸馏水、标准饲料喂养。连续灌胃40d。1.4标本制备各组动物最后1次灌胃,禁食不禁水24h后全部杀检。脑组织匀浆制备：采血后断头处死,低温条件下快速取脑组织,以冰冷的生理盐水冲洗,滤纸吸干,称重后置于匀浆器中用9倍生理盐水匀浆(匀浆器的末端置于放冰块的冷水中),以3500r/min离心10min,取上清液,置4℃冰箱保存待测。1.5指标检测常规组织匀浆后,离心分离上清,NE、DA、5-HT采用放免法测定;Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase、Ca2+采用比色法测定,

7、具体操作按测试盒说明书进行。1.6统计学方法采用SPSS13.0软件统计,实验数据以±s表示,多组间比较用方差分析,组间两两比较用LSD分析,方差不齐时用Dunt’s方法分析。2结果(见表1)表1各组大鼠脑组织Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase活性及Ca2+、NE、DA、5-HT含量比较3讨论中枢单胺能神经系统作为最重要的中枢递质系统,其增龄性退行性改变在衰老和脑老化过程中的重要性日益受到重视。由于增龄性神经元树突、轴突、突触的退变,神经细胞的丢失,必然引起作为介质发挥生物学效应的神经递质的增龄性改变8-

8、9。单胺类神经递质包括DA、NE和5-HT等,具有广泛的生物学效应。研究表明,脑