抵当汤化裁方对荷瘤小鼠抑瘤作用及对t淋巴细胞亚群的影响论文

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1、抵当汤化裁方对荷瘤小鼠抑瘤作用及对T淋巴细胞亚群的影响论文【摘要】目的:探讨抵当汤化裁方对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及对T淋巴细胞亚群的影响。材料与方法:建立小鼠克洛氏(S180)肉瘤动物模型,将荷瘤小鼠分为抵当汤化裁方高、中、低剂量组,连续灌胃10d,同时设阴性对照组和正常组,观察抑瘤率。结果:抵当汤高、中、低剂量组对荷瘤小鼠瘤重的抑瘤率分别为56.25%、36.51%和18.42%,与阴性对照组比较有显著差异,尤以高剂量组为明显;CD+4T淋巴细胞数量、CD+8T淋巴细胞数量及CD+4/CD+8比值与阴性对照组比较均明显升高,尤以高剂量组最

2、为明显。结论:抵当汤化裁方能抑制S180荷瘤小鼠肿瘤的生长,并能缓解和改善S180荷瘤小鼠免疫力低下和免疫紊乱状态,抵当汤化裁方高剂量组疗效最佳。【关键词】抵当汤荷瘤小鼠抑瘤T淋巴细胞亚群近年来中药的防癌作用备受关注.freelL,0.9g/mL,0.45g/mL,灭菌,冰箱冷藏备用。小鼠淋巴细胞分离液由中国科学院生物工程研究所提供,批号为LTS1092。小鼠T淋巴细胞单克隆抗体CD4、CD8由北京天象-邦定公司提供。1.3瘤株腹水型克洛氏肉瘤(S180)瘤株由沈阳药科大学提供。2实验方法2.1对小鼠S180肉瘤的抑瘤作用取腹腔接种S180瘤株8

3、d的荷瘤小鼠,无菌操作下抽取腹腔瘤液,以灭菌生理盐水1:1稀释,经0.2%胎盼蓝染色细胞计数板计数后,计算活细胞数>95%,调整瘤细胞悬液数约为1×106/mL,再按0.2mL/鼠的剂量在32只小鼠右前肢腋窝皮下接种。接种后24h称重,.freelL/10g·d[2],连续10d,末次给药后24h,眼眶取血,颈椎脱臼处死动物,称体重,剥瘤称重计算抑瘤率,并将各组结果进行统计学处理。疗效评价公式:抑瘤率(%)=(对照组平均瘤重-治疗组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100%2.2对外周血T淋巴细胞亚群的影响实验小鼠处死以前,进行眼眶取血,用事先标记好加

4、有抗凝剂的试管收集标本,然后采用间接荧光染色法检测各实验组动物T淋巴细胞亚群,计算出CD+4T淋巴细胞数量、CD+8T淋巴细胞数量及CD+4/CD+8比值。3实验结果3.1对小鼠S180肉瘤的抑瘤作用见表1表1抵当汤化裁方对荷瘤小鼠的抑瘤作用注:与阴性对照组比较﹡,#P<0.05,##P<0.01。3.2对T淋巴细胞亚群的影响见表2表2抵当汤化裁方对荷瘤小鼠T淋巴细胞亚群的影响注:与正常组比较,△P<0.01;与阴性对照组比较,#P<0.05;与阴性对照比较,##P<0.01。4讨论肿瘤的发生受多种因素的调节,同时与机体的免疫状况密切相关,肿瘤病

5、人的机体免疫不同程度的发生紊乱[3-4],肿瘤免疫与研究表明,保护免疫器官、提高免疫功能是抗肿瘤、抑制肿瘤生长、防止扩散的重要措施[5]。S180是一种具有免疫原性的肿瘤,其在生长过程中能明显抑制机体的免疫功能,而T淋巴细胞是构成机体抗肿瘤免疫功能的重要因素,有明显异质性。本实验通过给S180荷瘤小鼠灌服抵当汤化裁方发现,抵当汤化裁方可以明显抑制肿瘤生长,且随剂量的增加而呈依赖性。能够增加荷瘤小鼠外周血CD+4T淋巴细胞、CD+8T淋巴细胞数量,调节CD+4/CD+8比例,提高荷瘤小鼠T淋巴细胞的增殖能力。抵当汤原方中水蛭、虻虫、桃仁攻下祛瘀,软

6、坚散结,即“坚者消之”,“结者散之”之义[6]。而所加的党参、白术、白芍能扶正祛邪,健脾益气,即“衰者补之”之义。抵当汤化裁方通过提高荷瘤小鼠T淋巴细胞的增殖能力,从而调节了S180荷瘤小鼠的免疫功能,抑制了荷瘤小鼠肿瘤的生长。此外本方中水蛭、虻虫、桃仁等活血消肿祛瘀通络去,改善局部细胞缺氧的情况从而抑制肿瘤新生血管的形成,而且水蛭、虻虫等虫类药释放大量的纤维蛋白酶原,能够抑制血管内皮生长作用,从而抑制肿瘤血管生成。【

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