葡聚糖硫酸酯的超滤分级及其抗凝血活性研究论文

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1、葡聚糖硫酸酯的超滤分级及其抗凝血活性研究论文师少飞，王兆梅，郭祀远，蓝嘉【摘要】目的研究各种葡聚糖硫酸酯(GS)超滤分级的体外和对大鼠的体内抗凝血活性。方法通过超滤分级的方法获得截留分子量不同的GS级分，并测其特性黏度［η］；分别研究不同［η］的GS对大鼠凝血时间（CT）和全血复钙时间（RT）的时效性和量效性。结果各种［η］的GS均能显著延长CT和RT，且呈剂量依赖性；GS给药2h时抗凝血活性达到最大；不同［η］的GS对CT和RT的延长作用不同，［η］为274.8ml/g的GS的抗凝血活性最强。结论不同［η］GS均具有抗凝血活性，［η］为274.

2、8ml/g的GS抗凝血活性最强.freelg的低分子量肝素相当。【关键词】抗凝血；葡聚糖硫酸酯；特性黏度AnticoagulatingEffectofGlucosanSulfatesultipleultra-filtrationofglucosansulfateraaterialandtheirintrinsicviscositieseasured.Coagulationtime(CT)andrecalcificationtime(RT)easuredusingatesttubemethod.ResultsCTandRTincreasedbyth

3、eanticoagulationoffractionedglucosansulfates,andtheyshoaximumafter2hofadministration.TheCTandRTl/gl/geas175IU/mgofloolecularg。杯式超滤器由聚醚砜超滤膜(中科院膜研究所)、压缩氮气瓶及联接管道配件组成。1.2葡聚糖硫酸酯的超滤分级及表征1.2.1超滤分级采用截留分子量分别为4K，10K和50K的聚醚砜膜对GS原料进行二级超滤分级，得到4个级分，分别用F1，F2，F3和F4表示。1.2.2［η］测定以毛细管黏度计，采用逐步稀释

4、法［5］。1.3大鼠凝血时间（CT）和全血复钙时间（RT）的测定1.3.1CT测定大鼠给药一定时间后，以复方噻胺酮(10ml/kg)肌肉注射麻醉，从心脏取血1.0ml于塑料试管中,1min后每隔10s缓慢倾斜试管1次，记录倾斜试管时液面不动（纤维蛋白形成）时间，即为CT。1.3.2RT测定大鼠腹腔动脉采血0.9ml，加入预先盛有0.1ml3.8%枸橼酸钠的试管中，并在每支试管中加入待测样品0.01ml，37℃水浴中孵育1min，每支试管中再加入0.1ml0.01mol/L的CaCl2，混匀后开始计时，记录倾斜试管时液面不动时间，即为RT［6,7］

5、。1.4统计学处理结果以±s表示，组间比较采用t检验，P0.05，认为有显著性差异。2结果2.1GS的超滤分级GS原料经过截留分子量为4000，10000，50000三级超滤分级，得到4个GS级分，分别用F1，F2，F3，F4表示，其特性黏度分别为1.1，46.3，71.2，274.8ml/g。结果见表1。表1GS的超滤分级结果（略）2.2GS抗凝血作用的时-效关系GS给药1h后，凝血指标CT值与对照组（0h）相比均明显增大；以后，随着给药时间延长至1.5h，CT值进一步提高。在给药后2.0h，CT值达到最大。给药后2.5h，CT值开始降低，3.

6、0h时，CT值更低。表明GS经皮下给药，2h后药效达到最大，以下研究中均以给药2h后采血测定。见表2。表2GS作用时间对大鼠CT值的影响(略)2.3GS抗凝血作用的量-效关系各GS级分的浓度均为0.6g/L（相当于0.6mg/kg）时，即可显著延长大鼠的凝血时间CT和RT，经统计分析，各浓度实验组所对应的CT值和RT值与空白对照组之间均存在显著性差异，表明GS具有突出的抗凝血活性。且随着GS级分浓度的提高，其所对应的凝血指标值进一步增大，说明GS的抗凝血活性具有显著的剂量依赖效应，在本实验浓度范围内，增加GS的浓度，可显著提高其抗凝血作用。结果见

7、表3～4。表3GS剂量对大鼠CT值的影响(略)表4GS剂量对RT值的影响(略)2.4［η］对GS抗凝血活性的影响对照组（0h）时，4个［η］样品的CT无显著差异，给药1h，F4与F1开始有明显差异，到2h，4个样品CT值均达到最大，而且它们之间差异显著，F4的CT值最大，说明其抗凝血效果最好。结果见表2。从表3可看出，4个样在给药量0.6g/L时，F4与F1的CT值差异开始显著，随着浓度的增加，这种差异越来越明显，当浓度为0.9g/L时，4个级分之间的CT值差异都开始明显，且随着［η］增大，其凝血效果越明显，说明在相同浓度下，F4的凝血时间最大。

8、从表4可知，在给药0.6g/L时，4个样品之间的RT差异显著。表明F4的在各种实验浓度下RT均高于其它［η］的样品。综合以上分析，在实验