奈替米星的光度分析研究论文

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1、奈替米星的光度分析研究论文【摘要】奈替米星(NTM)与曲利本蓝(TB)在pH2.5～6.0的条件下反应生成具有正吸收和负吸收的蓝色离子缔合物，其最大吸收波长位于688nm，线性范围为0～8.6mg/L；最大褪色波长为592nm，线性范围为0～9.5mg/L；表观摩尔吸光系数(ε)为1.08×104(正吸收)L/(mol·cm)和3.26×104(负吸收)L/(mol·cm)。当用双波长叠加法时，ε值可达4.35×104L/(mol·cm)。本文探讨了适宜的反应条件及主要分析化学性质。该法操作简便，有较高的灵敏度和选择性，用于市售奈替米星药物中奈替米星含量的测定，结果满意

2、。【关键词】奈替米星；曲利本蓝；分光光度法ABSTRACTIntheconditionofpH2.5～6.0,ilmicin(NTM)reactsblueionassociationplexesaximumabsorption,thelinearrangeg/L;Themaximumfading,thelinearrangeg/L;Theirapparentmolarabsorptivities(ε)partol·cm).AB)0.5g/L；十二烷基硫酸钠(SDS)l0g/L；十二烷基磺酸钠(SLS)0.5g/L；TritonX1008g/L。奈替米星标准品为生化试剂

3、，其余试剂均为分析纯，试验用水为二次蒸馏水。1.2试验方法在10ml比色管中，依次准确加入4.00ml1.0×10-4mol/L的曲利本蓝溶液，一定量的1.0×10-4mol/L的奈替米星标准溶液，1.0mlpH2.85的HAcNaAc缓冲溶液，用水稀释至刻度，摇匀，20min后用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在最大吸收波长或最大褪色波长处测其吸光度。2结果与讨论2.1吸收光谱按试验方法配制溶液，在U4100型紫外可见近红外光谱仪上扫描吸收光谱(Fig.1)。试验表明，奈替米星在可见光范围内无吸收；曲利本蓝在可见光区产生强烈吸收，最大吸收波长为588nm；在曲

4、利本蓝溶液中加入奈替米星标准溶液后，TB和NTM反应，由于静电作用形成具有正吸收和负吸收的蓝色离子缔合物，最大显色波长为688nm，红移100nm，最大褪色波长位于592nm，红移4nm；若以负吸收波长作为参比波长，正吸收波长作为测定波长，灵敏度会更高。奈替米星在一定浓度范围内呈线性关系(Fig.1)。可见，显色法、褪色法及双波长叠加法均可用于奈替米星含量的测定。2.2反应条件的选择(1)缓冲体系及pH值的影响考察了HAcNaAc缓冲溶液和BR缓冲溶液对NTMTB离子缔合物的影响。结果表明，使用HAcNaAc缓冲体系效果较好，它不仅灵敏度高，而且适宜的pH范围较宽

5、(pH2.5～6.0)，缔合物稳定。试验用pH2.85的HAcNaAc缓冲溶液，用量以1.0ml为宜。(2)显色剂用量的影响考察了1.0×10-4mol/LTB溶液用量为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5和5.0ml时对体系吸光度的影响(Fig.2)，结果表明，TB溶液用量在3.5～4.5ml范围吸光度较大，试验用4.0mlTB溶液。(3)显色时间和缔合物的稳定性按试验方法配制溶液后，在不同时间下测定NTMTB缔合物的吸光度，结果表明，在室温下5min后显色稳定，稳定时I:1:NTM,againstl)+TB;2:NTM(1.0m

6、l)+TB;3:NTM(1.5ml)+TB;1～3:AgainstreagentblankFig.1TheabsorptionspectraofionassociationplexesoftrypanblueilmicinFig.2Effectoftrypanbluevolumn间至少在6h以上。实验选在10min后进行。(4)表面活性剂的影响考察了多种表面活性剂对缔合反应的影响，结果表明，非离子型表面活性剂TritonX100、乳化剂OP及阳离子表面活性剂CTMAB、阴离子表面活性剂SLS和SDS等对NTMTB缔合物均无增敏作用。2.3离子缔合物的组成考察了摩

7、尔比法和等摩尔连续变化法测定NTMTB离子缔合物的组成，结果均为NTM∶TB=1∶4，故缔合物的组成为NTM(TB)4。2.4标准曲线分别将4.00ml1.0×10-4mol/L的TB溶液加入数支10ml比色管中，再依次加入不同量的1.0×10-4mol/L的NTM标准溶液及1.0mlpH2.85的HAcNaAc缓冲溶液，用水稀释至刻度，摇匀，放置10min后按试验方法测其吸光度，作AC标准曲线。该方法的标准曲线回归方程、相关系数、线性范围及表观摩尔吸光系数等列于Tab.1。2.5共存离子的影响奈替米星含量为4.76μg/ml，相对