棉花根茎叶中黄酮类化合物的超声提取及含量测定

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时间:2018-11-18

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1、棉花根茎叶中黄酮类化合物的超声提取及含量测定作者:马彦梅李炳奇廉宜君,刘红【摘要】  目的寻找在超声条件下从棉花根、茎、叶中提取黄酮的优化条件,并测定与比较植株不同部位黄酮类化合物的含量。方法提取采用正交设计法,以乙醇浓度、提取次数、提取温度及固液比为因素,每个因素3个水平进行正交设计;用紫外分光光度法测定黄酮含量。结果最佳提取条件为:乙醇浓度60%,超声温度25℃,固液比1∶10,提取3次。黄酮含量分别为:叶0.494%,茎0.398%,主根0.268%,侧根0.257%,叶柄0.289%。结论棉花植株中黄酮类化合物的含量由高到低依

2、次为:叶,茎,主根,侧根,叶柄。【关键词】棉花黄酮类化合物超声提取  Abstract:ObjectiveToascertainoptimumultrasonicextractiontechnologyconditionforflavonoidsfromtheroot,stemandleafofcotton,anddetermineandparetheconcentofflavonoidsofdifferentpartsofcotton.MethodsOrthogonaldesignes,extractiontemperature,m

3、aterialandsolventratio)atthreelevelsrespectively,anddeterminethecontentofflavonoidsbyultrovioletspectrophotometry.ResultsTheoptimumextractionconditionsaterialandsolventratio1∶10for25℃ultrasonicextractionfor3times.Thecontentofflavonoid0.398%,taproot0.268%,lateralroot0.25

4、7%,petiole0.289%.ConclusionTheorderofthecontentofflavonoidsofdifferentpartsofcottonisleaf﹥stem﹥taproot﹥lateralroot﹥petiole.  Keyination  在生态系统中,农业环境日益恶化是一个严峻事实,造成这种状况的原因虽是一个涉及面极为广泛的问题,但其重要原因之一是长期、大量的使用化学杀虫剂而产生了“农药公害”。  植物源杀虫剂具有对害虫高效、无残毒,不污染农业生态环境和农产品,对非靶标生物无明显影响等特点。棉花的根

5、、茎、叶中存在的黄酮类化合物,有着重要的抗病虫害作用。在我国的棉花抗虫(病)性基础研究中,棉花黄酮一直是备受注目的次生代谢产物,它们具有对有害生物抗生性、阻食性、抗孢子和酶抑制性的作用[1],是一类具有很大潜力的抗虫(病)物质。  新疆是我国最大的产棉区,年产量一直保持在150万吨左右,占全国棉花总产量的1/3,棉杆、叶资源每年达600~750万吨[2]。为了充分利用新疆这一宝贵资源,笔者对棉花根、茎、叶中的黄酮类化合物进行了提取和含量测定,以便为后续研究打下良好的基础。  1仪器与材料  1.1仪器Spectrumlab54紫外可见

6、分光光度计(上海棱光技术有限公司);HF-2.5B超声循环提取机(北京弘祥降生物技术开发有限公司);电子天平(北京赛多利斯天平有限公司);TDL-5台式离心机(上海安亭仪器厂)。  1.2试剂和材料乙醇、甲醇、氢氧化钠、浓硫酸、苯酚(5%)、盐酸、氢氧化钾(10%)、氢氧化钠(均为分析纯)。棉花根、茎、叶等。(取自石河子大学农学院试验场)。  2方法  2.1黄酮含量测定方法本研究以芦丁为标准品,用紫外分光光度计测定黄酮含量。  标准曲线的绘制:精密称取120℃干燥至恒重的芦丁标准品适量,加水溶解,转移至100ml容量瓶中,加水稀释至

7、刻度,摇匀(每毫升含芦丁0.2mg),精密吸取此溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml,分别置于25ml容量瓶中,各加60%乙醇至10ml,分别加入5%NaNO2溶液0.3ml,放置6min,然后加入10%Al(NO3)3溶液0.3ml,混匀,再放置6min,加入4%NaOH溶液4ml,用水稀释至刻度,混匀,放置15min,在分光光度计上扫描波长从400~600nm之间的吸收度,在510nm波长处有最大吸收值,以吸光度为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标做标准曲线,数据经回归处理,计算得回归方程:y=12.384x-

8、0.0004,r=0.999。  2.2单因素实验  2.2.1乙醇浓度取棉花茎4g,50ml30%乙醇为溶剂,25℃下超声提取两次,30min/次。再在相同条件下分别以40%,50%,60%,70%,80%,90%乙醇

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