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时间:2018-11-15
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1、葡萄籽原花青素对2型糖尿病大鼠肾脏功能蛋白的影响论文【摘要】目的研究葡萄籽原花青素(grapeseedprocyanidin,GSPC)对2型糖尿病(type2diabetesmellitus,T2DM)大鼠肾脏功能蛋白的影响。方法建立T2DM大鼠模型,给予GSPC灌胃治疗12周,测定大鼠空腹血糖(FBG)、血脂(TG)、总胆固醇(TC)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的水平;测定胰岛素敏感指数(ISI)、肾脏肥大指数(K模型组大鼠FBG,TG,TC和K)rats.MethodsAmodelofT2DMaleg·kg-1·d-1)for12eterseas
2、ured:thefastingbloodsugar(FBG),bloodfat(TG),totalcholesterol(TC)level,K大鼠,通过检测肾脏PT钠泵活性及血清中超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)、一氧化氮(nitricoxide,NO)、一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)等的变化,从而研究GSPC对T2DM大鼠肾脏功能蛋白的保护作用与机理。1材料与仪器1.1动物及饲料3月龄雄性大鼠模型和正常对照组的建立参照本实验室以前的方法[4]。4周高能饲料喂养,空腹12h后给予25mg·kg-1的STZ一次性腹腔注射(STZ注
3、射前用pH=4.2的柠檬酸缓冲液配成1%浓度),继续高能饲料喂养4周,然后采尾静脉血测定空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS),并计算胰岛素敏感指数(ISI)[5],最后选取符合T2DM条件的20只大鼠作为T2DM模型,其余淘汰。将实验动物分为3组:正常对照组、模型对照组、治疗组。治疗组用GSPC200mg·kg-1·d-1(使用时用生理盐水配成1%的浓度)平均分两次灌胃治疗,对照组每次等量生理盐水溶液灌胃,在GSPC治疗期间,全部大鼠都用常规饲料喂养,自由饮水。实验动物于GSPC治疗12周末空腹12h,然后从心脏采血制备血清标本待测,断髓处死动物,摘取右侧肾脏,去包膜后用滤纸吸干水分后
4、称重,将右肾重量与体重量之比(Kg-ATPase测定液共同孵育,37℃15min,液闪仪测定孵育液中32Pi的每分钟计数(cpm)值,利用Concet公式计算出总ATPase或Mg-ATPase活性,两者差值即钠泵的活性,酶的活性用单位用pmol·mm-1·h-1表示。2.4统计学处理数据由作者采用SPSS10.0软件对各组数据行双侧t检验和单因素方差分析,计量结果均以±s表示,以P0.05作为统计学检验标准。3结果3.1GSPC对T2DM大鼠一般症状体征的影响与正常对照组大鼠比较,建立的T2DM模型大鼠体重明显增加,并出现腹型肥胖,多饮,多尿,多食症状,毛发凌乱晦暗,精神萎靡,活动减少,随
5、着病程延长,除大鼠体重呈下降趋势外,其它症状更加明显;与模型对照组大鼠比较,GSPC治疗12周后,上述症状体征得到明显好转。3.2GSPC对T2DM大鼠血糖血脂和肾脏肥大指数的影响由表1可见,与正常对照组比较,糖尿病模型对照组大鼠TC,TG,FBG水平显著升高(P0.01),肾脏肥大指数显著增大(P0.05);与模型对照组比较,GSPC治疗12周后,大鼠TC,TG水平显著下降(P0.01),肾脏肥大指数显著降低(P0.05),FBG有下降趋势,但无明显统计学意义。表1实验大鼠血液生化指标和肾脏肥大指数的变化与正常对照组比较,*P0.05,**P0.01;与模型对照组比较,#P0.05,##P
6、0.013.3GSPC对T2DM大鼠体内抗氧化应急能力指标的影响由表2可见,与正常对照组比较,糖尿病模型对照组大鼠SOD,NO,NOS水平显著降低(P0.01);与模型对照组比较,GSPC治疗12周后,大鼠SOD,NO,NOS水平显著升高(P0.01)。表2实验大鼠体内抗氧化应急能力指标的变化与正常对照组比较,*P0.01;与模型对照组比较,#P0.013.4GSPC对T2DM大鼠血清胰岛素水平和胰岛素敏感指数的影响由表3可见,与正常对照组比较,糖尿病模型对照组大鼠FINS水平显著升高,ISI显著降低(P0.01);与糖尿病模型对照组比较,GSPC治疗12周后,大鼠FINS水平显著降低(P0
7、.01),ISI显著升高(P0.05)。表3实验大鼠血清FINS,ISI和PT钠泵活性的影响与正常对照组比较,*P0.01;与模型对照组比较,#P0.05,##P0.013.5GSPC对T2DM大鼠肾脏近端小管钠泵活性的影响如表3,与正常对照组比较,T2DM模型对照组大鼠12周时PT钠泵活性显著降低(P0.01);与糖尿病模型对照组比较,GSPC治疗12周后,PT钠泵活性显著升高(P0.01)。4讨论在糖尿病
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