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时间:2018-11-15
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1、脑心康片对大鼠脑缺血再灌注损伤后凋亡相关基因细胞间黏附分子表达的影响论文苏云明张学会李环李卉孟妍【摘要】目的观察脑心康片对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,进一步探讨其作用机制。方法ethodsThemodelofinpletecerebralischemiaiddlecerebralarteryocclusion(MCAO).TheproteinexpressionofICAM-1munohistochemicalmethodat24h,48hand72haftercerebralischemia.ResultsNaoxinkang-tabl
2、etcouldobviouslyimprovedetectedbysymptomsoftheneurologicaldeficitincerebralischemiarats,inhibittheexpressionofICAM-1.ConclusionNoxinkang-tablethasprotectiveeffectoncerebralischemiareperfusioninjuryintimeanddosedependentmannersbyinhibitingICAM-1expressionandanti-inflammation
3、.Keyia;Reperfusioninjury;CellApoptosis;ICAM-1脑血管疾病是神经系统的常见病、多发病,是目前引起人类死亡的三大疾病之一。缺血性脑卒中是多种原因引起的一种临床病理状态,其脑组织损害是产生临床征象的病理基础。在本病的预防、治疗和康复方面,中医药具有较为显著的疗效和优势。临床应用脑心康片治疗脑缺血,取得满意疗效[1]。本实验通过对大鼠脑神经损伤的行为学改变、凋亡相关基因ICAM-1蛋白表达的观察,探讨脑心康片对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其作用机制。现报道如下。1材料与仪器1.1动物-1)(BA2189
4、),稀释度:1∶100(武汉博士德生物工程有限公司)。HRP标记的链霉卵白素-亲和素SP试剂盒、S/P三步法检测试剂盒(批号50881774)、PV6001二步法检测试剂盒(批号1360)、兔抗山羊IgG/HRP(批号C0206)、山羊抗鼠IgG/HRP(批号N045036)、DAB显色试剂盒(批号60882801),均有北京中杉金桥生物技术有限公司生产。1.3仪器生物组织摊烤片机、生物组织包埋机(湖北孝感);电热鼓风干燥箱(上海福玛);光学显微镜(OlympusJapanBH-2);Q500I-1蛋白表达。2.4统计方法所有数据以±s表示,
5、组间比较用t检验。3结果3.1脑心康片给药前后各组大鼠神经功能缺损评分情况结果见表1。表1各组大鼠神经功能缺损评分的基本情况(略)由表1可见,模型组与假手术组相比,差异有显著性意义(P0.01);给药后脑心康片高、中、低剂量组与银杏叶片组相比,差异有显著性意义(P0.01或P<0.05);给药后脑心康片高、中、低剂量组与尼莫地平组相比,差异均有显著性意义(P0.01或P0.05)。3.2脑心康片对MCAO大鼠脑组织ICAM-1表达的影响结果见表2及图1。表2脑心康片对MCAO大鼠脑组织ICAM-1表达的影响(略)由表2可见,给药各组和模型组与
6、假手术组相比,差异有显著性意义(P0.01)。从药物作用强弱对比看,脑心康片高剂量在3个用药时间段抑制的作用与尼莫地平组相当,两组比较,差异有显著性意义(P<0.05),明显优于银杏叶片组,两组比较,差异也有显著性意义(P<0.05或P<0.01);脑心康片中、低剂量在3个时间点抑制作用与尼莫地平组相当或略弱(P<0.05),但与银杏叶片给药组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。脑心康片同一时间点的高、低剂量组比较差异显著(P<0.01);且脑心康片高、中、低剂量用药72h的作用优于给药24h的作用,差异有显著性意义(P<0.05)。3个
7、时间点,所有药物治疗组与模型组及假手术组比较,均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。脑组织切片中,ICAM-1免疫阳性染色见于梗死灶周围脑组织内微血管和毛细血管的内皮细胞,表现为血管壁内皮细胞棕黄染色。假手术组极少见ICAM-1阳性染色血管;模型对照组及药物治疗组均有不同程度ICAM-1阳性反应血管。模型对照组在24,48,72h内阳性染色血管随时间推移,逐渐减少,但与假手术组比较均有显著性差异(P<0.01),说明在缺血24h后,ICAM-1表达达到高峰后,持续高位表达,脑缺血部位炎症反应较重(见图2~8)。4讨论脑缺血时神经细胞凋
8、亡的发生机制目前仍不十分清楚。但大量的研究表明,缺血脑组织神经细胞凋亡受基因调控,并发现了许多与神经细胞凋亡密切相关的调控基因,主要有Caspase家族、Bcl-2
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