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时间:2018-11-17
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1、镁的检测方法及临床意义论文【摘要】镁是体内含量最多的阳离子之一。原子式为Mg,原子量为24.31。成人体内含镁0.823~1.234mol,其中50%存在于骨骼,45%在细胞内液,细胞外液占5%。肝、肾和肌肉含镁较多,在细胞内液镁的含量仅低于钾而居第2位,其浓度约为细胞外液的10倍。在细胞外液,镁的含量仅次于钠、钾、钙而居第四位。【关键词】细胞内液镁检验在许多生理化学过程中镁都参与反应并占重要地位。比如是多种酶的激活剂.freel有强烈的发射光谱或吸收线,使其容易分离,特别适宜测定生物体液中镁的浓度,是镁测定的参考方法,受到广泛
2、使用。利用某染料的直接分光光度法,准确度及精密度可达到临床要求,且适宜自动分析,在临床实验室广泛使用。1甲基百里香酚蓝比色法1.1原理血清中镁、钙离子在碱性溶液中能与甲基百里香酚蓝染料结合,生成一种蓝色复合物,加入EGTA可掩蔽钙离子的干扰。与同样处理的镁标准液进行比较,求得血清镁含量。1.2试剂1.2.1碱性缓冲液(pH12.6):称取无水亚硫酸钠2.4g,叠氮钠0.1g,甘氨酸0.75g,EGTAethdenegeylcolbis(β-aminoethylether)-N,N,N′tetraaceticacid,乙二醇-X2
3、(2-氨基乙基醚)-四乙酸0.095g于小烧杯中,加1mol/L氢氧化钠23.5ml使其溶解后,转入100ml容量瓶中,加去离子水至刻度。1.2.2显色剂:精确称取甲基百里香酚蓝(AR)0.036g和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.60g于烧杯中,加1mol/L盐酸溶液10ml,使其溶解后转入100ml容量瓶中,加去离子水至刻度,混匀,置棕色瓶中保存。1.2.3显色应用液(pH10.3):临用前将上述l液和2液等量混合即可。1.2.4镁标准液(Mg0.823mmol/L、Ca2.5mmol/L):精称硫酸镁(MgSO4·7H2O)0
4、.2026g,用少量去离子水溶解后转入1L容量瓶中,再精称恒重的碳酸钙(CaCO3,AR)0.25g于小烧杯中,加去离子水40ml及1mol/L盐酸6ml,慢慢加温至60℃使其溶解,冷却后转入上述容量瓶中,然后加去离子水至刻度,盛入塑料瓶中可长期保存。1.3计算血清镁(mmol/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×0.8231.4参考值0.67~1.04mmol/L(1.64~2.52mg/d1)2Calmagite染液比色法2.1原理血清中镁在碱性条件下与Calmagite染料生成紫红色络合物,颜色的深浅与镁的浓度成正比。溶液中
5、的EGTA可消除钙的干扰,使用表面活性剂可使蛋白胶体稳定,不必去除血清蛋白质而直接测定镁。2.2试剂2.2.1Calmagite染料溶液:称取Calmagite1-(羟基-4甲基-2-苯-偶氮)-2萘酚4-磺酸染料(sigma)400mg,溶于1000ml去离子水中。2.2.2碱性溶液:称取氢氧化钠7g,EGTA1.5g,3-环己胺-1,1丙磺酸(cAPS)79g,氯化钠990mg,溶于1000ml去离子水中,再加TritonX-1002ml,三乙醇胺56ml,混匀,贮室温中备用。2.2.3氯化锶溶液:称取氯化锶(AR)1.28
6、g溶于100ml去离予水中。2.2.4显色应用液:临用前将“1”液10份,“2”液10份,“3”液1份加水80份混合,用1mol/L氢氧化钾溶液调pH为11.5±0.02,置冰箱保存,可用2周。2.3操作取经稀盐酸处理和去离子水清洗的干燥试管3支,标明测定、标准和空白管。2.4.计算血清镁(mmol/L):测定管吸光度/标准管吸光度×0.8232.5.参考值0.7~1.10mmol/L。3原子吸收分光光度法3.1原理镁的空心阴极灯发射285.2nm的谱线,通过火焰进入分光系统,照射到光电倍增管上。稀释的血清被吸进空气-乙炔火焰时
7、,镁在高温下离解成镁原子蒸气。部分发射光被蒸气中基态镁原子吸收,光吸收的量与火焰中镁离子的浓度成正比。3.2试剂3.2.1无盐氧化镧稀释液(La3+4.3g/L):取浓盐酸10ml加入800ml去离子水中,再加入准确称取高纯度La2O35g,搅拌,使其溶解后,再以去离子水补足至1L,贮存于室温。3.2.2含盐氧化镧稀释液:在上述无盐氧化镧稀释液中加氯化钠164mL、氯化钾7.5mg/L,分别含Na+2.8mmol/L和K+0.1mmol/L。3.2.3镁标准贮存液(20mmol/L):精确称取硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.4
8、93g溶于去离子水中并稀释至100ml。3.2.4镁标准液(1mmol/L):取镁贮存液5ml,用去离子水稀释至100ml。3.2.5镁标准校正液(0~0.04mmol/L):用含盐氧化镧稀释液将1mmol/L镁标准液稀释成0~0.04mmoL/L的4种浓度,贮
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