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时间:2017-11-29
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1、血脂及血浆脂蛋白测定血脂是血浆中的中性脂肪(TG和TC)和类脂(磷脂、糖脂、固醇、类固醇)的总称。TG参与人体内能量代谢,而胆固醇主要用于合成细胞膜性物质、类固醇激素和胆汁酸血浆脂蛋白的分类1、乳糜微粒2、极低密度脂蛋白3、低密度脂蛋白4、高密度脂蛋白在病理状态下,在VLDL和LDL之间出现中间密度脂蛋白(IDL)。颗粒依次变小血浆脂蛋白的组成与结构载脂蛋白脂蛋白的蛋白部分称为载脂蛋白,具有结合与转运脂质及稳定脂蛋白结构的功能血浆脂蛋白的代谢甘油三酯的代谢途径胆固醇代谢途径胆固醇逆转运途径高脂蛋白血症WHO分型引起继发性高脂血症的病因1、糖
2、尿病常表现为IV型高脂蛋白血症。(胰岛素的缺乏,不仅促使肝脏生成VLDL增加,而且因LPL活性降低,导致VLDL清除减少,主要表现为血清TG、VLDL水平升高,TG严重升高者有发生急性胰腺炎的危险性。)2、甲减常表现为IIa或IIb型高脂蛋白血症患者血TC水平升高可同时血TG水平升高(LPL活力降低,IDL代谢障碍、LDL受体功能下降、血浆LDL清除减慢等)3、肾脏疾病肾病综合征时的高脂蛋白血症由脂蛋白降解障碍和合成过多双重机制引起。高脂蛋白血症的因素4、药物:降压药,利尿剂,β受体阻滞剂可TG和HDL长期应用糖皮质激素治疗可使TG、TC升
3、高5、其他:肝胆系统疾病、胰腺炎、长期过量饮酒低脂蛋白血症表现1、家族性低β-脂蛋白血症(肝脏LDL受体上调,伴胆汁酸过度合成,使血浆中VLDL在转化为LDL前已被肝脏分解代谢。)2、β-脂蛋白缺乏血症(ApoB合成分泌缺陷,使含ApoB的脂蛋白如CM、VLDL、LDL合成代谢障碍,伴随脂肪吸收和代谢紊乱,血浆TC也非常低)血脂检测方法及临床意义总胆固醇(TC)甘油三酯(TG)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)载脂蛋白A1(ApoA1)载脂蛋白B(ApoB)总胆固醇(TC)化学测定法L-B(ALBK)和Zak法
4、ALBK(美国CDC的脂类标准化实验室协同有关学术组织对Abell法作了评价和实验条件最适化)采用正己烷抽提,L-B显色Abell法(血清加入醇溶性氢氧化钾,使胆固醇从脂蛋白中分离出来,同时使胆固醇酯加水分解成游离胆固醇,加石油醚振摇、抽提,使胆固醇移入石油醚层,分离并取一定量的石油醚层,蒸发至干,再进行Liebermann-Burchard显色反应,620nm比色定量。该法可用于基本功训练及组织细胞胆固醇的提取定量。)酶法CEH-COD-PAP法(优点:灵敏度,精确度,线性范围宽。缺点:1.胆固醇酯酶对胆固醇酯水解不完全2.表面活性剂吐温
5、-40干扰酯酶的作用3.受还原性物质影响如尿酸,胆红素,VC)CEH-COD-PAP法原理用胆固醇酯酶水解胆固醇酯生成脂肪酸和胆固醇,胆固醇被胆固醇氧化酶氧化生成△4-胆淄烯酮和过氧化氢,然后在过氧化物酶催化下,H2O2与4-氨基安替比林及酚结合,生成红色醌亚胺。醌亚胺的最大吸收峰在500nm左右,吸光度与标本中的胆固醇含量成正比。反应方程式如下:胆固醇酯+H2O胆固醇+游离脂肪酸胆固醇+O2→△4-胆甾烯酮+H2O22H2O2+4-氨基安替比林+酚→醌亚胺CEHCODPOD血清胆固醇参考范围TC≤5.20mmol/L边缘升高:5.23—5
6、.69mmol/L升高:≥5.72mmol/L临床意义TC除了作为高胆固醇血症的诊断指标之外,不能作为其他任何疾病的诊断指标,对于动脉粥样硬化和冠心病而言,TC是一个明确的危险因子,与冠心病的发病率呈正相关。影响TC水平的因素:1、年龄与性别,(上升)2、长期高胆固醇、高饱和脂肪酸、高热量的饮食3、遗传4、缺少运动,精神紧张等相关疾病高TC血症有原发和继发两类,原发的如家族性高胆固醇血症,家族性apoB缺陷症,多源性高TC,混合性高脂蛋白血症等,继发的见于肾病综合征,甲减,糖尿病,妊娠等。低TC血症原发和继发,原发如家族性无β或低β脂蛋白血
7、症,继发如甲亢,营养不良,慢性消耗性疾病等。血清甘油三酯测定酶法测定磷酸甘油氧化酶法(灵敏度高,试剂稳定,线性范围比较宽)乳酸脱氢酶法(结果准确,灵敏度低,试剂不稳定)甘油氧化酶法(直接测定甘油的方法)磷酸甘油氧化酶法原理用脂蛋白酯酶(LPL)使血清中TG水解成脂肪酸和甘油,甘油激酶(GK)及三磷酸腺苷(ATP)将甘油磷酸化,以磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化3-磷酸甘油(G-3-P)产生H2O2,最后以Trinder反应显色,A500nm的值与TG浓度成正比。TG+H2O→甘油+脂肪酸甘油+ATP→G-3-P+ADPG-3-P+O2→磷酸二羟
8、丙酮+H2O2H202+4-AAP+4-氯酚→苯醌亚胺非那腙+H2O2甘油三酯临床意义原发性高TG血症多有遗传因素,包括家族性高TG血症与家族性型高脂蛋白血症等。继发性高TG血症
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