2 735例女性下生殖道hpv感染检测结果分析论文

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1、2735例女性下生殖道HPV感染检测结果分析论文童郁,邵展,许锴,张德亭【摘要】目的:了解女性下生殖道人乳头瘤病毒(HPV)感染的型别分布及特点。方法:采用核酸分子快速杂交分型技术对2008年1-12月间在温州医学院温州市第三临床学院妇产科就诊的2735例女性进行生殖道21种HPV检测并分型。结果:HPV总感染率为38.7%(1059/2735),21种HPV亚型(除HPV43型外)均有检出,其中单一型感染率为22.8%(623/2735),混合型感染率为15.9%(436/2735);HPV高危型感染率为31.3%(857/2735),HPV低危型感染率为8.9%(244/27

2、35)。在1059例HPVDNA阳性感染者中检出率较高的HPV高危型有HPV16型(占17.7%).freelin速度离心5min,弃上清,保留管底沉淀物,加入50μL裂解液悬浮沉淀,100℃加热10min,以14000r/min速度离心10min,取上清液按DNA提取试剂盒步骤操作。1.2.2PCR扩增:取PCR反应管1支,在管壁上做好标记,分别加入已提取的待测样品DNA1μL,反应总体系25μL,每次实验必须设置一个阴性对照及阳性对照,处理方法同标本。PCR反应条件为20℃10min,95℃9  2735例女性下生殖道HPV感染检测结果分析论文童郁,邵展,许锴,张德亭【摘要】

3、目的:了解女性下生殖道人乳头瘤病毒(HPV)感染的型别分布及特点。方法:采用核酸分子快速杂交分型技术对2008年1-12月间在温州医学院温州市第三临床学院妇产科就诊的2735例女性进行生殖道21种HPV检测并分型。结果:HPV总感染率为38.7%(1059/2735),21种HPV亚型(除HPV43型外)均有检出,其中单一型感染率为22.8%(623/2735),混合型感染率为15.9%(436/2735);HPV高危型感染率为31.3%(857/2735),HPV低危型感染率为8.9%(244/2735)。在1059例HPVDNA阳性感染者中检出率较高的HPV高危型有HPV16

4、型(占17.7%).freelin速度离心5min,弃上清,保留管底沉淀物,加入50μL裂解液悬浮沉淀,100℃加热10min,以14000r/min速度离心10min,取上清液按DNA提取试剂盒步骤操作。1.2.2PCR扩增:取PCR反应管1支,在管壁上做好标记,分别加入已提取的待测样品DNA1μL,反应总体系25μL,每次实验必须设置一个阴性对照及阳性对照,处理方法同标本。PCR反应条件为20℃10min,95℃9min,尔后循环40次(95℃,20s;55℃,30s;72℃,30s);72℃延伸5min。1.2.3杂交及显色:将PCR产物20μL在95℃加热5min,然后冰

5、水浴至少2min;让杂交仪预热45℃,在杂交孔内放好膜芯片,用1mL杂交液预处理分子膜;将产物20μL加入杂交液(45℃)混匀。加在分子膜上温育10min,排泵,杂交液冲洗膜3次,设定温度25℃,用0.5mL的封阻液封闭5min,排泵,加入0.5mL酶标液,温育4min;设置温度36℃,用溶液a洗膜4次,加入0.5mLNBT/BCIP显色液3min,用溶液b洗膜4次,观察结果。当对照膜条PC点出现BIOTIN点和IC点蓝色斑点时提示PCR、杂交、显色等各个环节操作正常,此时结果真实有效。2结果2.1HPV感染的型别分布在2735例样本中检出HPVDNA阳性病例1059例,阳性检出

6、率为38.7%,检出高危基因型(HPV16/18/31/33/35/39/45/51/52/56/58/68型)857例,阳性率为31.3%;检出低危型(HPV6/11/42/43/44型)244例,阳性率为8.9%;检出常见亚性(HPV53/66/cp804)177例,阳性率为6.5%。HPV各亚型检出情况见表1。在1059例HPVDNA阳性感染者中检出率较高的HPV高危型有HPV16型,HPV52型,HPV58型,低危型HPV6型,HPV11型。其中检测过程中发现有多重型感染患者,在检出类型中单一型感染率为22.8%(623/2735),混合型感染率为15.9%(436/27

7、35),最多出现达6种型别混合感染,见表2。2.2HPV感染的年龄分布各年龄段HPV感染检出率见表3。HPV感染率在30~40岁年龄段达高峰,50岁后就明显下降,感染人群高峰年龄出现晚,但下降比较快。用SPPS10.0软件列联表资料分析,x2=18.23,P0.01,各年龄段HPV感染检出率差异有显著性。3讨论世界范围内1/5的肿瘤与感染因子有关,其中子宫颈癌与人乳头状瘤病毒(HPV)的关联最为密切。大量流行病学研究已证实,发生子宫颈癌的必要条件是高危型HPV持续感染。目前,子宫

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