大鼠孕晚期七氟烷吸入麻醉对子代神经行为和学习记忆功能的影响

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1、大鼠孕晚期七氟烷吸入麻醉对子代神经行为和学习记忆功能的影响作者：何莹，张良成，郭永正，林蕾，郑晓燕【摘要】目的观察大鼠孕晚期长时间、不同浓度使用七氟烷吸入麻醉对仔鼠神经行为和学习记忆功能的影响。方法SD孕鼠15只，随机分为高浓度麻醉（H）组、低浓度麻醉（L）组和对照（C）组，其中H、L组分别于孕第18天吸入4%、2%的七氟烷6h。出生后仔鼠进行后续实验：P8～P14行悬崖逃避实验，P21和P60行旷场实验，P21～P26（Ⅰ期）和P60～P65（Ⅱ期）行Morris水迷宫实验。结果在悬崖逃避实验和旷场实验中，各

2、组仔鼠的神经行为改变差别无统计学意义（P>0.05）。水迷宫实验Ⅰ、Ⅱ期，与C组比较，H、L组平均逃逸潜伏期时间均明显延长（P<0.01）、第三象限活动时间和穿越平台次数均明显减少（Ⅰ期：P<0.01；Ⅱ期：P<0.05），而L组在定向航行实验和空间探索实验中差别均无统计学意义（P>0.05）。结论孕晚期高浓度使用七氟烷麻醉6h可导致仔鼠学习记忆功能降低，并且持续到成熟期。【关键词】氟烷；醚类；妊娠，动物；迷宫学习；大鼠，SpragueDa×15cm×15cm，用带有3mm小孔的

3、筛状隔板将箱内空间分割为上（高15cm）、下（高10cm）2部，箱顶近中央分别有一大孔和小孔，大孔嵌装的气管导管标准衔接头，可与麻醉机螺纹管紧密连接；箱的两侧面和背面高于隔板2cm处各有一小孔，每个小孔（包括顶部）分别嵌装一可与多功能气体分析仪自动取样管良好吻合的标准连接头；箱正面有8cm×18cm门洞和12cm×20cm可左右拉动的门板。实验时，在麻醉箱底部放置适量钠石灰用以吸收CO2，调节麻醉机（ZY9500，无锡中原医疗器械有限公司）氧流量和七氟烷（sevoflurane，批号：8515，日本丸石制药株氏

4、会社）蒸发罐，当通过麻醉箱各侧小孔测定箱内七氟烷浓度达到预定目标：H组4%[约1.8个最低肺泡有效浓度（MAC）]、L组2%（约0.9个MAC），将孕鼠放置于麻醉箱上部隔板上，6h后关闭麻醉蒸发罐，待其麻醉自然消退和清醒；对C组孕鼠仅向箱内输送相同浓度的氧气6h，但不开启七氟烷蒸发罐。接受吸入麻醉的大鼠入睡后，用带状婴儿脉搏血氧饱和度探头环绕于孕鼠腹部，持续监测SpO2(S/5，美国DatexOhmeda公司)。吸入麻醉实验完成后送回原动物房继续饲养，待其自然分娩。预实验中，另设置了高浓度组和对照组2组孕鼠，

5、各8只，在上述条件下实验结束时进行左心室动脉采血行血气分析[5]，结果显示2组PaO2和PaCO2差别均无统计学意义（P>0.05）。1.2方法吸入麻醉实验结束时，各大鼠均苏醒良好，继续饲养2～3d，各组孕鼠分别自然分娩：H组51只、L组56只、C组53只，新生鼠出生后天数以分娩当天记为出生后第0天，此后累加。7d内每组幼鼠均有出现死亡，H组8只、L组5只、C组6只；成活分别为43、51、47只。从存活仔鼠中，每组分别随机选定8只雄性鼠进行神经行为和学习记忆能力测定。1.2.1悬崖逃避实验待出生后第8天（

6、P8）开始，将其放置于30cm高的平台上，头和两前肢越过平台边缘，60s内大鼠的头和身体向内侧移动为阳性反应。记录从放置开始到向内移动的时间，若60s内无阳性反应则记为60s；一放置到平台就有阳性反应则记为1s。连续测试7d（P8～P14），直至大鼠均能在1s内呈现阳性反应。1.2.2旷场实验于出生后21d（P21）和60d（P60）行旷场实验，旷场行为观察箱为长、宽、高分别为80cm×80cm×60cm的无顶木箱，箱底以墨线划分为25个等面积的小方格(16cm×16cm)，自中央格放入大鼠，观察120s内穿越

7、的格子数（3只脚进入其他小方格）、后腿（两前腿同时离地面）直立次数、理毛次数。每完成一只大鼠测试后清理木箱，以免前只大鼠的气味遗留影响实验。1.2.3Morris水迷宫实验直径120cm、高50cm的水槽，槽壁为均匀黑色，划分为4个象限，每个象限设置入水点标记，于第三象限内设一直径12cm、高29cm的透明平台，槽内水深30cm，使平台没于水下1cm，水温控制在﹙24±2﹚℃，水池上方安装自动摄像系统。Morris水迷宫实验包括2期，分别于P21（Ⅰ期）和P60（Ⅱ期）进行，内容包括定向航行和空间探索，每期持续

8、6d，前5d为定向航行实验：1天4次，将大鼠分别从4个象限入水点面向池壁放入水中，记录60s内寻找到平台的时间并让大鼠在平台上停留10s，超过60s未能找到平台者，用木棒轻柔的将其引上平台并停留在台上10s，认定其寻找平台时间为60s，取4次测定结果的平均值为当天的逃逸潜伏期；第6天观察空间探索时移走平台，从第三象限入水将大鼠面向槽壁放入水中，记录60s内在原平台处穿台次数、第三象限活