北五味子中多糖含量的测定

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1、北五味子中多糖含量的测定作者:谭晓虹王治宝李如章【摘要】目的:建立测定北五味子中多糖含量的方法。方法:采用比色法测定北五味子中多糖含量。结果:测得北五味子中多糖含量为6.57%,平均回收率为99.78%,RSD=1.54%。结论:该方法简便,精密度及重现性均较好。【关键词】北五味子;多糖;含量测定【ABSTRACT】Objective:ToestablishamethodforthedeterminationofthepolysactharidecontentinSchisandrachinensisTurcz.Methods:Thepolysa

2、ccharidecontentinSchisandrachinensisTurczisdeterminedbyusingthemethodofparingcolors.Results:Thepolysachardescontentinnorthple.theresultisstableandreproducible.Sotheresultissatisfactory.【KEYinationofthecontent北五味子(SchisandrachinensisTurcz)是木兰科植物五味子的干燥成熟果实,是中医常用药材之一,具有敛肺、滋肾、生津、

3、收汗、涩精之功效。现代药理研究证实五味子对中枢神经系统、呼吸系统均有兴奋作用,亦能促进肝糖原异生,加快肝糖原分解,在治疗神经衰弱、肝炎等的药物中应用十分广泛。五味子有南北之分,据《本草纲目》记载“五味子南产者红,北产者黑,入滋补药,必用北者为良”,北五味子的化学成分主要为五味子木脂素、挥发油、五味子醇、多糖等[1]。本文采用苯酚—硫酸法测定北五味子中多糖的含量,得到满意的结果。1仪器与药品北五味子购于张家口市药材公司经鉴定为北五味子,其它试剂均为国产分析纯UV752分光光度计(上海第三仪器厂)GOA型电热真空干燥箱(天津东郊机械加工厂)RE5

4、2A型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)2方法与结果2.1葡萄糖标准溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖25.18mg,用蒸馏水溶解并定容到250ml即为100.72μg/ml的葡萄糖标准溶液。2.2苯酚溶液的配制取苯酚100g,加铝片0.1g和NaHCO30.05g,蒸馏,收集182℃馏份,称取7.5g,加水150ml溶解,置棕色瓶内放冰箱备用。2.3标准曲线绘制精密量取葡萄糖标准溶液0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6ml置具塞试管中,分别加蒸馏水使成1.0ml,再分别加入5%苯酚溶液1.0ml,摇匀,然后加浓H2SO45.0

5、ml,充分摇匀,于室温下放置5min,置水浴中加热15min,取出冷却至室温。另以蒸馏水同上操作为空白对照,在490nm处测定吸光度,绘制标准曲线,建立回归方程:A=0.06781C+0.00620471,r=0.9989。2.4多糖的提取及精制北五味子粉碎后,称取500g,用清水洗净,加水4500ml,微沸煎煮1h,过滤,滤渣加水2000ml,煎煮1h,过滤,合并提取液,加热浓缩至300ml。加入乙醇使乙醇含量为80%放置12h,抽滤,沉淀依次用无水乙醇、丙酮洗涤。得到棕色粗多糖。将粗多糖溶于水,用Seveg法除去蛋白,加入0.1%活性炭脱色,

6、抽滤,滤液加入乙醇使溶液含乙醇达80%,静置过夜,抽滤,残渣用无水乙醇、丙酮反复洗涤,真空干燥,即得精制北五味子多糖。2.5换算因子测定精确称取60℃干燥恒重的五味子多糖20mg,加水溶解后容量瓶中定容在100ml,摇匀,作为多糖储备液。精确量取多糖储备液0.20ml,加水至1.00ml,按测定标准曲线同样的方法测其吸光度值,根据标准曲线计算浓度。按下式计算换算因子:f=l-1),D为多糖的稀释因子,测得f=1.691(n=6)。2.6样品含量的测定精密称取五味子粉末200mg,用80%乙醇浸泡过夜,再于索氏提取器中用80%乙醇回流2h,抽滤,弃

7、去滤液,残渣继续以蒸馏水回流提取2h,抽滤,滤液反复洗至250ml容量瓶中,定容,摇匀成为样品液。测定时,精密吸取样品液1.00ml,按测定标准曲线同样方法测其吸光度值,按下式计算多糖含量(以粗多糖计):多糖含量%=CDf×100/l-1),D为样品溶液的稀释因子,f为换算因子,l(6份)再分别精密加入不同量的标准溶液,依样品测定方法测定吸光度,计算回收率平均值为99.78%,RSD=1.54%。表2回收率试验3讨论3.1实验结果表明,北五味子多糖含量为6.57%,比

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