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1、匹鲁卡品癫痫模型及戊四氮点燃模型新生鼠行为学和组织学的对比研究论文刘洪付李晓刘晓冉王华王利民【摘要】目的比较匹鲁卡品（毛果芸香碱）点燃新生鼠痫性发作模型及戊四氮点燃模型的行为学特征及组织学改变,为实验模型的选择奠定基础。方法选择SD新生大鼠为研究对象,制作两种不同的新生鼠癫痫模型,观察新生鼠的行为学表现、不同时点Nissl染色等组织学改变。结果两种模型的行为学特征有所不同，匹鲁卡品点燃模型中未见神经元丢失及苔藓出芽现象，戊四氮癫痫持续状态模型中无神经元丢失，但明显出现苔藓纤维出芽现象。结论腹腔注射匹鲁卡品小鼠模型是一种理想的颞叶癫痫动物模型，苔藓纤维出芽可作为判断癫痫持续状
2、态模型是否成功的形态学标准。【关键词】癫痫模型；新生鼠；匹鲁卡品；苔藓纤维出芽【Abstract】Objectiveparisonstudyofbehavioralandhistologicalchangesbetodelandpentyleetrazolekindlingmodelintheneonatalrat，tolaythefoundationoftheexperimentmodelselection.MethodsSDneonateratsodelsadetoobservethebehavioralchangesandNisslstainingchangesatd
3、ifferenttimepoints.ResultsTodelshavetheircharacteristicbehavioralchanges.Noneuronlossandmossyfibersproutingodel.Noneuronlossossyfibersproutinginpentyleetrazolestaturalepilepsymodel.ConclusionPilocarpineinducedstatusepilepticusmousemodelisanidealtemporalepilepsymodel,andthemossyfibersprouti
4、ngisatypicalmorphologicalcharacterforevaluatingtheSEmodel.【Keyodels,neonatalrat,pilocarpine，mossyfibersprouting癫痫动物模型在癫痫的病因学、发病机制、药理学等研究中占重要地位。神经元丢失及苔藓纤维出芽是癫痫产生过程中较常见的组织病理学变化。匹鲁卡品（毛果芸香碱）致癫模型及戊四氮点燃模型均是临床常用的新生鼠癫痫动物模型,两种模型各有不同特点,采用不同的模型可能会有不同的试验结果。目前的试验研究大都选择单一致癫模型，缺少对两种模型癫痫发作过程的对比性研究.freela公
5、司产品。1.2癫痫模型的制作匹鲁卡品组：先予东莨菪碱1mg/kg腹腔注射，以拮抗外周胆碱能反应，30min后腹腔注射10%匹鲁卡品350mg/kg，若注射匹鲁卡品后30min无惊厥发作,再按每次10mg/kg追加匹鲁卡品。若惊厥发作持续30min仍未停止,.freelg/kg腹腔注射,及时中止发作［3］。戊四氮组:首次腹腔注射惊厥阈下剂量戊四氮40mg/kg,10min后注射20mg/kg,以后每10分钟注射10mg/kg,直至出现6、7级抽搐发作。急性期诱发发作后,每天早7点到晚8点逐只观察动物有无自发性发作及动物的死亡情况［1］。对照组:给予生理盐水腹腔注射。1.3La
6、do幼鼠癫痫发作分级标准［4］0级:无发作;1级:机械性咀嚼;2级:连续性点头;3级:单侧前肢阵挛;3.5级:前肢交替阵挛;4级:双侧前肢阵挛、后退;5级:双侧前肢阵挛、后退、摔倒;6级:狂奔嘶叫;7级:强直发作。1.4病理学研究将致痫并存活的各组新生大鼠分别于模型成功制作后1d及45d给予水合氯醛腹腔麻醉,灌流固定取脑,在海马部位做冠状连续冰冻切片,切片厚度20μm，每隔1张取片，分别行Nissl染色。首先入二甲苯,然后依次入100%、95%、85％、70%、50％的梯度酒精,蒸馏水浸洗,入1%的甲苯胺蓝染色,梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。1.5苔藓纤维发芽检测
7、取已经切好的冰冻切片于黑暗处Timm染色液中孵育，取出切片后冲洗,梯度酒精脱水,二甲苯透明,玻片覆盖。半定量评分,评分标准按苔藓纤维发芽量表进行［5］。1.6统计学处理实验结果以x±s表示,应用SPSS11.5软件进行统计学处理，P＜0.05为差异有统计学意义。2结果2.1不同模型癫痫行为学的特征匹鲁卡品组，匹鲁卡品的剂量为370～390mg/kg,诱发出现发作的平均时间为(13.2±2.6)min,动物呈现凝视、机械性咀嚼、连续性点头及肌阵挛,无全身强直阵挛发作,发作持续时间在5～20min。随着注射次数的增加,
