乳康舒饮片汤剂与其免煎配方颗粒的指纹图谱比较

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1、乳康舒饮片汤剂与其免煎配方颗粒的指纹图谱比较【摘要】　　目的研究乳康舒传统合煎液与其经过分煎制成的免煎配方颗粒混合物的化学成分的差异。方法采用HPLC色谱指纹图谱法，比较乳康舒免煎配方颗粒和乳康舒汤剂两者指纹图谱的差别，并通过相似度软件分析两者的相似性。结果乳康舒配方颗粒中共出13个色谱峰，确认出其中的12个色谱峰。乳康舒合煎液和混合免煎配方颗粒指纹图谱的相关系数为0.839。结论乳康舒合煎液同其分煎制成的免煎配方颗粒中的主要化学成分组成基本相同，其共有成分比例相近。【关键词】乳康舒配方颗粒指纹图谱高效液相色谱　

2、　Abstract：ObjectiveTostudythedifferenceinmainchemicalpositionbetilarityevaluationilarity.ResultsThereainchemicalsubstancesandthepositionratiooftraditionalherbsdecoctionandpatiblegranulesofRukangshuaresimilar.　　Keypom×250mm，5μm)；流动相：起始甲醇1%冰醋酸（3∶97），15min时，线性变

3、化至甲醇1%冰醋酸（17∶83），17min时，线性变化至甲醇1%冰醋酸（25∶75），95min时，线性变化至甲醇1%冰醋酸（90∶10），97分钟时，线性变化至甲醇1%冰醋酸（3∶97），梯度结束平衡后20min进入下一个样品分析；流速为1.0ml/min；柱温：35℃；进样量20μl。　　2.2供试品溶液的制备乳康舒合煎剂：按乳康舒处方配伍量，精密称取饮片，加入10倍量蒸馏水煎煮2次，过滤，合并滤液，蒸干，残渣加甲醇10ml，超声提取30min，过滤，滤液浓缩并定容至10ml，取上清液，滤过，取续滤

4、液，即得。乳康舒混合配方颗粒：按乳康舒颗粒配伍量，精密称取各配方颗粒，混合均匀，加甲醇10ml，超声提取30min，静置，取上清液，滤过，取续滤液，即得。药材：精密称取饮片，加甲醇10ml，超声提取30min，静置，取上清液，滤过，取续滤液，即得。配方颗粒：精密称取各配方颗粒，加甲醇10ml，超声提取30min，静置，取上清液，滤过，取续滤液，即得。　　2.3最佳检测波长的选择利用二极管阵列检测器的特点，对210～400nm每隔10nm分别观察指纹图谱，结果270nm波长所得的图谱基线较稳，分离较好，紫外响应值合

5、适，且反映的信息较多，故选择270nm为测定波长。　　2.4精密度实验取乳康舒混合配方颗粒供试品溶液，连续进样5次，对主要的13个色谱峰进行了考察，计算峰面积RSD和保留时间RSD，结果各峰的峰面积和保留时间的RSD均小于3％。　　2.5稳定性实验乳康舒混合配方颗粒供试品溶液，分别在0，2，4，8，12h不同时间点进样检测，记录指纹图谱。计算保留时间和峰面积，结果表明,供试品的指纹图谱在12h内基本稳定，各共有色谱峰的保留时间和峰面积的RSD均小于3％。　　3结果　　3.1指纹图谱中各峰的确认以270nm为检测波

6、长，从乳康舒配方颗粒液、药材合煎液的色谱图中共分辨出13个峰，经过同相同波长条件下对单味配方颗粒、单味药材提取液的色谱图比较，发现由于1号峰为各药材中一些极性很大的成分，在反相色谱柱中不保留，因此在各个单味配方颗粒、单味药材提取液中均有1号峰的体现，故无法确认属于哪个单味药材，因此不将其列入相关性分析。其余色谱峰经过确认，确定10～13号峰属于淫羊藿的峰，其中11号峰为淫羊藿苷的峰；2，6号峰属于白芍的峰；3，4，7～9号峰属于丹参的峰，其中8号峰为丹酚酸的峰；5号峰属于王不留行的峰。　　3.2乳康舒合煎液和混合

7、免煎配方颗粒指纹图谱的比较从乳康舒合煎液和混合免煎配方颗粒得的指纹图谱两图直观比较来看（见图1），两者有一定相似性，同时也存在着一定的差异。以乳康舒免煎配方颗粒为基准，发现乳康舒合煎液的色谱中少了6，9号峰，而在5号峰的边上又有一新的峰出现。于是应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版（国家药典委员会）对两者的相关性进行分析,分析结果为两者的相关性为0.839。　　4讨论配方颗粒生产与实验用药材为同一批次药材，以排除由于药材不均一而引起色谱图的差异。从乳康舒合煎液和混合免煎配方颗粒指纹图谱两图比较结果来看，

8、合煎液中消失的6号峰为炒白芍的峰，而9号峰为丹酚酸B的峰，结果说明合煎过程中，由于成分间的相互作用，使白芍中类似丹酚酸B这类不稳定成分分解，或是由于成分产生了共沉淀等作用，使得该类成分减少。由于5号峰的边上又有一新的峰出现，结果表明，乳康舒在合煎的过程中，由于成分间的抑制及助溶作用，使得丹参中某些不稳定的成分分解或转化，同时有新的成分的出现。在实验中同时比较了方中淫羊藿、