醋酸棉酚对白血病hl

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1、醋酸棉酚对白血病HL【关键词】细胞凋亡EffectsofgossypolaceticacidonapoptosisanddifferentiationinleukemiaHL60cells　　【Abstract】AIM:Toinvestigatetheeffectsofgossypolaceticacid(GAA)onapoptosisanddifferentiationinclassichumanactuepromylocyticleukemiacelllineHL60andstudytheposs

2、ibilitytotreatleukemiaeansofMTTassay.Apoptosisissionelectronmicroscopy,cellcycle,andDNAgelelectrophoresis,etc.ThedifferentiationofHL60cellsintomorematuregranulocytes(NBT)reductiontest.RESULTS:Morethan6μmol/LGAAcouldsuppresstheproliferationandinducetheap

3、optosisinHL60cellsinadosedependentmanner.NBTreductiontestdemonstratedthatHL60cellscouldalsobeinducedtodifferentiateintomorematuregranulocytesbylool/L,P<0.05).CONCLUSION:GAAcouldselectivelyinducetheapoptosisofleukemiaHL60cellsinasmallerdosethanthatfor

4、humanperipheralbloodmononuclearcells,aybeanidealdrugforleukemiatherapy.　　【Keyol/L时可显著抑制HL60细胞的增殖，促进其凋亡，并表现出剂量效应；在诱导分化浓度下（1,4μmol/L），GAA可促进HL60细胞向成熟粒细胞分化(P<0.05).结论：GAA对白血病细胞HL60的选择性促凋亡作用表明其可能是一种理想的高效低毒抗白血病药物.　　【关键词】　棉酚；HL60细胞；细胞分裂；细胞凋亡；细胞分化　　0引言　　白血病

5、发病率有显著升高的趋势［1］.近年来，多酚类药物的抗肿瘤作用日益受到重视［2］.作为多酚类药物的一分子，棉酚天然存在于锦葵科某些植物的根、茎、种子中，其化学结构为2,2′联二萘8,8′二羧基醛1,1′,6,6′,7,7′六羟基5,5′二异丙基3,3′二甲基，分子质量为518.54，具有多种生物学活性［3］.然而，以往曾经报道棉酚的抗肿瘤作用却未得到多数学者的认可.近年随着研究的深入，其显著的抗肿瘤作用又重新得到了人们的重视［4］.棉酚对白血病细胞的作用效果如何，有无临床使用价值？我们通过使用其衍生物醋

6、酸棉酚（GAA）对经典的白血病HL60细胞系进行研究，观察其对HL60细胞增殖、分化的影响.　　1材料和方法　　1.1材料人急性白血病HL60细胞系由本室保存.正常人单个核细胞（PBMNCs）　来自第四军医大学西京医院输血科正常献血员供血离心白细胞层.RPMI1640（Gibco公司）；胎牛血清（FBS，杭州四季青生物工程材料研究所）.GAA、四唑氮蓝（MTT）及硝基蓝四氮唑（NBT）购自Sigma公司.电子显微镜（日本JEOL公司）；酶联免疫检测仪（美国BioRad公司）；流式细胞仪（美国Beckm

7、anCoulter公司）.　　1.2方法　　1.2.1试剂准备用二甲基亚砜（DMSO）溶解GAA，浓度为12.5mmol/L，过滤除菌，分装，-20℃保存备用.RPMI1640按说明配制.FBS于56℃30min灭活，分装，-20℃冻存备用.MTT用0.01mmol/LPBS配制成浓度5g/L溶液，NBT用9g/L生理盐水配成为2g/L溶液，分别过滤除菌，避光4℃保存备用.　　1.2.2细胞培养HL60细胞以1×108/L密度接种于含100mL/LFBS的RPMI1640培养基，置37℃,50mL/L

8、CO2，饱和湿度的孵箱培养，每3～4d传代1次.将正常献血员分离的白细胞层用比重为1.077的淋巴细胞分离液分离，收集PBMNCs，经RPMI1640培养液洗涤，调整到所需细胞浓度培养［5］.　　1.2.3不同浓度GAA抑制HL60细胞增殖的作用GAA浓度从100μmol/L开始.以含同样梯度浓度DMSO的PRMI1640培养基为平行孔.将HL60细胞以4×104/孔接种于96孔培养板中，每孔体积100μL.培养24h后按倍比稀释浓度梯度加入GAA，继续