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时间:2018-11-15
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1、千金藤属植物地不容和云南地不容中多糖和葡聚糖的含量测定论文利奕成,杨珂,黄立,樊化,张美英,王一飞【摘要】目的千金藤属植物具有良好药用价值,许多研究表明其含有丰富的生物碱成分,但对该属植物其他成分的研究很少。对千金藤属植物非生物碱成分的组成和活性的研究.freelinationofPolysaccharidesandGlucansinStephaniaepigeaeH.So.LoandStephaniayunnanensisH.S.Lo.Abstract:ObjectiveStephaniaisvaluableinofficinalusin
2、g.ItanyresearchesthatStephaniacontentsisplentyofalkaloid.Otherpositionshavescarcelybeenstudied.Thestudyonnon-alkaloidpositionsiceffects.MethodsExtractedpolysaccharidesfromMenispermaceaeStephaniaepigeaeH.S.LoandStephaniayunnanensisH.S.Lo.Determinedthecontentsoftotalpolysacc
3、haridesandglucans.ResultsTheresultsofexperimentsindicatedthatthereents.Stephaniaisakindofofficinalherb.Thestudyonalkaloidissufficient,butitisvoidontheresearchofnon-alkaloidpositions.ThisstudyishelpfultodeveloptheofficinalusingoftheStephania.Keyenine),前者有镇静作用,后者有肌松作用[5]。我们采
4、集地不容和云南地不容的块根,用苯酚硫酸法对其总多糖含量进行测定,同时采用铜试剂沉淀法对其具葡聚糖结构的多糖进行了含量测定。为该两种植物多糖的分离纯化及多糖成分的结构、活性研究提供一定依据。1材料与设备地不容和云南地不容药材购自云南永仁药材有限公司,经本实验室王治平鉴定为防己科千金藤属植物地不容StephaniaepigeaeH.So.Lo和云南地不容StephaniayunnanensisH.S.Lo的新鲜块根,切片干燥后备用;重蒸苯酚(北京鼎国生物技术发展中心),标准葡萄糖,其余试剂均为分析纯,实验用水为单蒸水。电子分析天平(瑞士Sart
5、oriusBP221S),核酸蛋白仪(美国BeckmanDU600),台式冷冻离心机(德国universal32R)。2方法与结果2.1标准溶液与标准曲线制备2.1.1标准葡萄糖溶液的配制精密称取干燥至恒重的葡萄糖0.4988g,置50ml量瓶中,加水溶解,定容,作为葡萄糖标准储备液(9.976g/L)。取储备液1ml,置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,配成浓度为99.76mg/L的标准葡萄糖溶液备用。2.1.25%苯酚试剂的配制称取重蒸酚5.0g,置100ml棕色容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,放冰箱备用。2.1.3标准曲线制备精
6、密量取99.76mg/L的标准葡萄糖溶液0,0.10,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00ml分别置于具塞试管中,准确补水至2.0ml,再分别加入5%苯酚溶液1.0ml,在旋转混合器上混匀,小心加入浓硫酸10.0ml,于旋转混合器上混匀,置沸水浴中煮沸2min,冷却后在485nm波长处测定其最大光吸收值,同时以水做空白,以吸光度为纵坐标,糖浓度为横坐标,得标准曲线,经计算回归方程为A=7.6094C-0.0224,r=0.9980(n=7),葡萄糖浓度在4.988~49.88mg/L范围内与吸光度呈良好的线性关系。2.2苯酚硫酸
7、法测定总多糖含量2.2.1样品溶液制备精密称取已经干燥好的药材粉末1g,置圆底烧瓶中,加50ml水,加热回流1h,稍冷即过滤,滤液置50ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀。精密量取上述溶液5ml,置于80ml离心管中,加无水乙醇20ml,混匀5min后,以3000r/min离心5min,弃去上清液。残渣用水溶解并定容至10ml,混匀,即得样品测定母液。取母液1ml,置25ml量瓶中,加水稀释至刻度,即得样品测定液。2.2.2样品含量测定精密吸取样品测定液2.0ml加入具塞试管,照“2.1.3”项下自“加入5%苯酚溶液1.0ml”起,依法测定吸
8、光度,随行空白,计算。结果见表1。2.2.3回收率精密称取药材粉末0.5g,共3份,分别精密加入标准葡萄糖溶液2ml(63.05g/L),按上述方法测定,计算回收率。地不容总多糖
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