放免法在检测肿瘤标志物中的应用分析

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1、放免法在检测肿瘤标志物中的应用分析韦南仕(广丙省河池市人民医院核医学科547000)【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)6-0156-02【摘要】目的探讨放免法在临床检测肿瘤标志物中的应用价值。方法通过酶免法与放免法比较测定48例患者甲胎蛋白(AFP)结果分析进行总结放免法的应用价值。结果48例血清测定结果中，酶免法与放免法无显著性差异性。但放免法检测价格比较昂贵，收费也高不适合一般医院的普及。结论放免法因需要特定的环境及试剂和仪器价值昂贵，仪器要求精度高等特定要求

2、，在临床检测肿瘤标志物技术中RIA在很大程度上己经被ELISA或电化学发光免疫法(ECLIA)所取代。【关键词】放免法肿瘤标志物应用价值放射免疫分析(Radioimmunoassay,RIA),乂称为放射免疫分析法、或放射免疫测定法，简称放免法，是一种在无须采用生物测定方法的情况下用于检测抗原(例如，血清之中激素的水平)的实验室测定方法。这一方法是由罗莎琳?萨斯曼?耶洛和SolomonAaronBerson于二I•世纪50年代创建的［1］。近年来随着检验方法的飞速更新，EUSA或电化学发光免疫法(ECLIA)

3、更新出现，乂因放免法报告时间长，结果不稳定，且存在同位素污染问题，在国外已趋于淘汰。木文分别采用放免法及酶免法这2种方法对48例患者血清AFP报告如下。1资料与方法1.1一般资料病例选自我院消化科2008年7月至2010年12月肝部肿瘤及血管瘤48例患者空腹血清进行比较测定分析。其中男31例，女17例，年龄45〜72岁，平均年龄62.3±4.6岁。1.2标木检测AFP的标木均采自48例住院患者清晨S腹血清。在B超监视下再经皮行肝穿刺取材做病理分析,结合AFP检测及病理结果、临床体征、CT扫描等辅

4、助检查最后确诊29例肝Ca,17例肝血管瘤，2例原因不明的＜2cm的肿物。1.3试剂与方法放射免疫法使用上海的SN-682型计数仪，放免试剂采用山东潍坊3V公司AFP放免检测配套试剂；酶联免疫法选用郑州安图生物技术公司AFP酶联免疫试剂，酶标仪选用雷杜C-2000型全自动酶标仪。2结果两种方法对照表如下ELISA组与RIA组X2=21.15(P<0.05)酶联免疫组(ELISA)测试48例中在正常医学参考值(<30ng/ml)的有3例(6.25%),大于临床医学参考值(〉400)即判定为原发性肝癌，阳性率为9

5、3.75%；放射免疫组(RIA)同样测试48例患者血清后，有47例患者〉40ng/ml临界阳性值，阳性率为97.91%。正常参考值内只有1例，经和其它相关检查结合诊断为肝血管瘤。两组方法相对照无显著差异性。3讨论酶联免疫法简称EUSA，是酶免疫测定技术中应用最广的技术。自从Engvall和Perlman(1971)首次报道建立酶联免疫吸附试验(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssays,ELISA)以来，由于ELISA具有快速、敏感、简便、易于标准化等优点，使其得到迅速的发展和广泛应用。

6、随着方法的不断改进、材料的不断更新，尤其是采用基因工程方法制备包被抗原，采用针对某一抗原表位的单克隆抗体进行阻断EUSA试验，都大大提高了ELISA的特异性，加之电脑化程度极高的EUSA检测仪的使用，使ELISA更为简便实用和标准化，从而使其成为最广泛应用的检测方法之一。目前EUSA方法己被广泛应用于多种细菌和病毒等疾病的诊断。其基本原理是酶分子与抗体或抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后，底物

7、可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型，出现颜色反应。因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定，这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来，使EUSA方法成为-•种既特异又敏感的检测方法。本文就利用这一原理选用酶联免疫法测试48例患者血清中的AFP值。RIA的基本原理则是放射性同位素标记的抗原（简称“标记抗原”）和非标记抗原（标准抗原或待测抗原）冋吋与数量奋限的特异性抗体

8、之间发生竞争性结合（抗原一抗体反应）。由于标记抗原与待测抗原的免疫活性完全相同，对特异性抗体具有同样的亲和力，当标记抗原和抗体为数量恒定时，待测抗原和标记抗原的总量大于抗体上的有效结合点吋，标记抗原-抗体复合物的形成将随着待测抗原量的增加而减少，而非结合的或游离的标记抗原则随着待测抗原数量的增加而增加（也就是所谓的竞争结合反应），因此测定标记抗原-抗体或标记抗原即可推出待测抗原的数量［2】。临床检测