醒脑静注射液对内毒素休克家兔血浆细胞因子含量的影响

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1、醒脑静注射液对内毒素休克家兔血浆细胞因子含量的影响【摘要】目的：探讨醒脑静注射液治疗内毒素休克的可能机制。方法：日本大耳白兔18只，随机分为正常对照组、LPS组、LPS+XNJ组，每组各6只。采用耳缘静脉注射LPS复制兔内毒素休克模型，分别进行治疗，于治疗后0、1、2、3h观察各组平均动脉压(MAP)、心率(HR)、存活率，并取血用ELISA双抗体夹心法检测血浆TNF-α及IL-10的含量。结果：LPS组平均动脉压在0h后迅速下降，心率明显加快，2h后又迅速减慢;PLS+XNJ组平均动脉压在0h后平缓下降，心率先加快后平缓减慢。LPS组存活率为0，PLS+XNJ组存活

2、率为100%。TNF-α的变化：LPS组TNF-α0h开始增高，3h达到顶峰;LPS+XNJ组TNF-α在0h达到顶峰，1h明显下降，3h降至最低。IL-10的变化：LPS组IL-10在3h达到顶峰，PLS+XNJ组在2h达到顶峰，3h开始下降。结论：醒脑静注射液能治疗内毒素休克，其机制可能与调节促炎因子和抗炎因子的平衡有关。【关键词】醒脑静注射液;内毒素;休克;TNF?α;IL?10内毒素又称脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)，是革兰氏阴性菌细胞壁外膜上的一种含有多糖和类脂的特殊物质。内毒素休克(Endotox

3、inShock)，是由革兰氏阴性菌内毒素引起的以发热、低血压及多器官功能衰竭为主要特征的综合征，死亡率高，是临床常见的危急重症之一，目前尚无令人满意的治疗药物。有研究证实[1-4]，醒脑静注射液能通过抑制肿瘤坏死因子?α(TNF?α)的表达，有效地抑制炎性级联反应，减轻内皮细胞损伤，清除氧自由基。本实验拟通过观察内毒素休克模型家兔血清中促炎因子TNF?α及抗炎因子白细胞介素?10(IL?10)含量的变化，探讨醒脑静注射液抗内毒素休克的作用机制。　　1材料与方法　　1.1动物健康日本大耳白兔18只(合格证号：20054020)，体重2-2.5kg

4、，雄性，清洁级动物，由泸州医学院实验动物科提供。　　1.2试剂醒脑静注射液购自河南天地药业股份有限公司;内毒素(LPS)购自美国Sigma公司;兔TNF-α、IL-10试剂盒，均购自上海西唐生物科技有限公司。　　1.3仪器BL-420生物机能实验系统。　　1.4动物实验日本大耳白兔18只，随机分为正常组6只，LPS组6只，LPS+XNJ组6只。耳缘静脉注射1%戊巴比妥钠全麻，分离右颈总动脉，插管，BL-420生理仪观察并记录平均动脉压、心率变化。分离右侧股动脉插管放血。待10-20min平均动脉压稳定后记录平均动脉压、心率并定为记录0点。LPS组和LPS+XNJ组沿耳

5、缘静脉推注LPS2.4mgkg-1，正常组推注等量生理盐水。待血压下降至正常的2/3后，治疗组沿耳缘静脉推注醒脑静注射液0.5mlkg-1，正常组和模型组推注等量生理盐水。以上各组分别于推注后0、1、2、3h取血2ml，同时回输等量生理盐水。所取血以3000rmin-1离心10min，取血浆测TNF?α及IL?10的含量。　　1?5观察并计算动物的存活率　　1?6细胞因子(TNF?α以及IL?10)测定按试剂盒说明操作，设空白管、标准管和测定管，各管一式两份。450nm读取吸光值，绘制标准曲线，在标准曲线上读取各待测标本含量。　　1.7统计学处理采用SPS

6、S16.0forn;标准差(x±s)表示，用t检验，p<0.05为差异具有显著性。　　2结果　　2.1平均动脉压及心率的变化LPS组与PLS+XNJ组在静脉注入内毒素后60min动脉血压即下降至正常的2/3，PLS组在0h开始平均动脉压进行性下降;PLS+XNJ组在0h开始平均动脉压平缓下降，具体数值如表1示。LPS组0h心率明显加快，在1h达到顶峰，2h迅速下降，3h降至最低，直至死亡;LPS+XNJ组0h心率明显加快，1h达到顶峰，2h开始减慢，减慢幅度较LPS组小。　　2.2存活率正常组动物全部存活，存活率为100%。注射LPS后3h,LPS组动物全部死

7、亡，存活率为0。注射LPS后3h,LPS+XNJ组动物全部存活，存活率为100%。　　2.3血浆TNF?α检测正常组兔血浆TNF?α浓度在4个时间点无变化(p>0.05)。LPS组血浆TNF?α浓度在4个时间点表现趋势为逐渐增高，与0时间点比较差异均有显著性(p<0.01)。LPS+XNJ组血浆TNF?α浓度在0时间点为峰值，在1h、2h、3h逐渐下降，与0时间点比较差异均有显著性(p<0.05，p<0.01