猪脂肪沉积重要基因筛查及新基因pfam134b之功能鉴定

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1、猪脂肪沉积重要基因筛查及新基因pFAM134B之功能鉴定第一章文献综述第一节肉质现状概述以及脂肪对肉和肉制品品质的影响1.1肉质现状概述随着社会科技与经济的飞速发展，由于养殖者和企业家们对经济利益的过度追求，致使猪肉品质问题日益凸显。伴随着人们生活水平的改善和消费者对优质食品需求的曰益增长，生产优质猪肉已迫在眉睫。广义的肉质包括肉的感官品质、营养价值、深加工品质和卫生质量等，其中，感官品质是猪肉对人的视觉、奠觉、味觉和触觉等感觉器官的刺激，即给人的综合感受，最受消费者关注，常用肌肉pH、肉色、大理石纹评分、肌内脂肪含量、滴水损失、嫩度、多汁性、风味评分等指标进行评定。猪肉品质

2、问题引起消费者和学术界的关切是由于欧美等养猪发达国家从第二次世界大战后，猪的育种方向从脂肪型转向瘦肉型，对肌肉组织进行了过度的选择，导致猪肌肉组织中脂肪含量大大下降，瘦肉率大幅度增加，这不仅造成了有机体各种组织的发育失衡，也导致肉品质与产肉量遗传负相关的反应（陈润生等，2007)。猪肉肌内脂肪含量的大幅度下降和猪肉品质的恶化，其根本原因是由于肉类的生产、加工和消费这三者之间的需求存在矛盾。目前，世界上许多国家的消费者都认为脂肪摄入过多对人体健康有害，所以，动物脂肪并不受大家欢迎（Hugoetal.，2007;134B的筛选、全长克隆................401引言.

3、..............402材料与方法...............413结果与分析...............434讨论...............49第四章pFAM134B基因的组织表达...............521引言...............522材料与方法...............533结果与分析...............57第五章pFAM134B对肌内脂肪沉积...............64第一节猪肌内前体脂肪细胞的分离...............641.1引言...............641.2材料与方法...........

4、....641.3结果与分析...............661.4结论...............68第二节pFAM134B干扰表达载体...............692.1引言...............692.2材料与方法...............702.3结果与分析...............762.4结论...............79结论1、利用基因芯片技术、生物信息学分析技术研究30和90曰龄金华猪与长白猪背最长肌和皮下脂肪的基因表达差异。基因表达谱差异研究结果显示，与长白猪相比，30曰龄金华猪背最长肌中显著高表达基因有177个，显著低表达的基因有

5、199个；90日龄显著高表达基因有276个，显著低表达的基因有155个。30曰龄金华猪皮下脂肪显著高表达基因有188个，显著低表达的基因有147个；90曰龄显著高表达基因有235个，显著低表达的基因有223个。进一步通过生物信息学分析可知，金华猪背最长肌、皮下脂肪中显著高表达的差异基因主要为脂肪代谢相关基因和转录因子，表明金华猪脂肪沉积能力明显强于长白猪。2、通过基因芯片技术以及生物信息学分析，蹄选出EST序列编号为BF702245的基因，通过RACE技术，克隆得到该基因全长cDNA序列，基因全长cDNA序列有2889bp，其中包括179bp5'非编码区、978bp编

6、码区和1732bp的3非编码区(3'-UTR)，编码区翻译325个氛基酸；BLAST结果表明，氣基酸序列与人、鼠FAM134B基因同源性皆为84%。3、组织特异性研究结果表明，pFAM134BmRNA水平在金华猪和长白猪中都是肝脏中表达量最高，皮下脂肪次之，其次为背最长肌和大脑。品种差异研究结果表明，在皮下脂肪和货最长肌中，长白猪PFAM134B基因表达量在60日龄前高于金华猪，在90曰龄后显著低于金华猪，此结果与肌内脂肪含量以及体脂率的变化规律基本一致，这表明，PFAM134B的表达可能与猪脂肪沉积密切相关。4、通过猪肌内前体脂肪细胞以及皮下前体脂肪细胞的培养，有效

7、结合RNAi技术和基因超表达技术等研究猪新基因PFAM134B调控脂肪沉积的分子机制。结果表明，PFAM134B基因可通过正调控脂肪细胞分化关键基因和脂肪合成关鍵基因的表达来实现肌内脂肪沉积；在皮下前体脂肪细胞中，PFAM134B基因的表达趋势与细胞分化基因PPARy呈相反趋势，PFAM134B基因可通过正调控脂肪合成关键基因来实现皮下脂肪沉积，皮下脂肪的沉积主要来自于脂肪的合成代谢。PFAM134B基因在两种脂肪细胞脂肪沉积的调控机制中作用不同。