赤芍中芍药苷提取溶剂的选择

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1、赤芍中芍药苷提取溶剂的选择【关键词】赤芍；,,芍药苷；,,高效液相色谱　　摘要：目的探讨赤芍药苷提取的最佳溶剂。方法分别用甲醇、75%乙醇、重蒸馏水提取赤药中芍药苷，用YethodsPaeoniflorinRadixpaeoniaeRubraethanol,75%ethanolandredistilledm×4.6mm)usingmethanol:0.05mol/LKH2PO4(32:68)asamobilephaseanddeterminedat230nm.ResultsThelinearcurveethanol,75%etha

2、nolandredistilledethanolishighlytoxic,redistilledm×4.6mm，10μm）；流动相为甲醇-磷酸二氢钾（32：68），流速1ml/min；检测波长230nm；柱温25℃；进样量10μl。理论干塔板数6400。　　2.2对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品10.00mg(120℃干燥恒重)置10ml容量瓶中，加流动相溶解稀释至刻度摇匀，作为芍药苷对照品溶液备用。　　2.3供试品溶液的制备精密称取0.50g赤芍粉末，分别精密加甲醇、75%乙醇、重蒸馏水各50ml，称定重量，冷浸4h，超声

3、30min放冷，再称定重量，用溶剂补足重量，摇匀，过滤，即得。　　2.4线性关系考察精密吸取上述芍药苷对照品溶液0.10,0.20,0.50,1.00,2.00ml置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。分别注入含0.01，0.02，0.05，0.10,0.20μg/μl的对照品溶液10μl进行测定。结果见表1，图1。以峰面积（A）对浓度（C）作回归计算，回归方程为A=3.43×104C-31.8，r=0.9998。　　2.5精密度实验精密吸取上述对照品溶液，重复进样5次，芍药苷对照品峰面积的RSD值为0.93%（n=5），表

4、明本法精密度良好。　　2.6重复性考察取同一批药材样品，按样品制备方法平行制备5份，依法测定，3种溶剂的芍药苷含量RSD值分别为1.00%、0.97%、1.30%，表明重现性良好。　　2.7回收率实验采用加样回收率法，精密称取已知含量的赤芍粉末，分别定量加入芍药苷对照品，按照供试品溶液的制备方法操作，依上次色谱条件下进行测定甲醇、乙醇、水作溶剂时芍药苷平均回收率分别为99.77%，99.87%，99.16%，RSD分别为3.05%，2.47%，1.67%。结果见表2。表2芍药苷含量测定的加样回收率（略）　　2.9样品测定精密吸取上

5、述供试品溶液，稀释至合适浓度进样10μl，依上述色谱条件下进行测定，代入回归方程计算所得含量。结果见表3，图2~4。表3赤芍样品中芍药苷测定结果(略)　　3讨论　　3.1我们采用HPLC法，分别用75%乙醇、重蒸馏水提取，与《中国药典》2000年版赤芍项下芍药苷含量测定的甲醇提取法进行对照，结果表明，以甲醇、75%乙醇或重蒸馏水作溶剂提取赤芍中芍药苷的含量无显著性差异（P＞0.05）。　　3.2用重蒸馏水作溶剂采用HPLC法直接测定赤芍提取液中芍药苷含量，具有操作简单、柱效高、分离度好、谱图清晰、无干扰、结果准确等优点，因而可作为

6、赤芍内质量控制的方法。　　3.3在3种溶剂中，相对《中国药典》2000年版中选用甲醇做溶剂，使用75%乙醇、重蒸馏水具有更好的安全性，可以避免甲醇较强的毒性对检测操作人员的伤害，还可以降低对环境的污染；并且重蒸馏水廉价，可以降低检测成本。所以我们认为使用重蒸馏水优于甲醇和乙醇。　　3.4该方法还可用于复方中芍药苷含量的提取和测定，同时，本研究也为进一步探讨中药药理学和药代动力学提供了实验基础，具有重要意义。