益气活血解毒法对溃疡性结肠炎模型大鼠血浆-及结肠组织p-选择

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1、益气活血解毒法对溃疡性结肠炎模型大鼠血浆?及结肠组织P?选择安贺军　王新月　于玫　沈静?许丽艳　林芳冰【摘要】【目的】　观察益气活血解毒法对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠血浆及结肠组织P?选择素表达的影响。【方法】选用SD大鼠，随机分为4组，即正常组、模型组、中药组(灌胃20?g·kg??-1?·d??-1?剂量的溃结复发方)、西药组(灌胃0?266??g·kg??-1?·d??-1??剂量的畅美混悬液);分别于给药后10、30d和停药后10d取材，采用酶联免疫吸附法检测各组血浆P?选择素含量，免疫组

2、化法检测结肠组织P?选择素的表达。【结果】模型组各时间段血浆P?选择素含量显著升高(均?P<0?05或P?<0?01)，中药组各时间段血浆P?选择素含量显著低于模型组(均?P<0?05或P?<0?01)，西药组治疗10?d及治疗30?d时血浆P?选择素含量显著低于模型组(?P<0?05或P?<0?01);模型组各时间段结肠组织P?选择素表达显著高于正常组(均?P?<0?01)，中药组治疗30?d及停药后10?d结肠组织P?选择素表达显著降低(均?P?<

3、0?01)，且停药后10?d作用优于西药组(?P?<0?05);西药组治疗10?d及治疗30?d结肠组织P?选择素表达显著降低(均?P?<0?01)，且治疗10?d时作用优于中药组(?P?<0?01)。【结论】益气活血解毒法抗UC复发的作用可能与其能有效降低模型大鼠的血浆及结肠组织P?选择素水平，阻抑血小板活化有关。　?【关键词】益气活血解毒法;　结肠炎/中药疗法;　P?选择素/血液;　结肠/病理学;　疾病模型，动物;　大鼠?溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis，UC)

4、是一种以慢性炎症和溃疡形成为主要病理特征的消化道疾病。由于其患病率逐年增加、高复发率、与结肠直肠癌发生关系密切而成为目前研究热点。本研究观察了益气活血解毒法组成的溃结复发方对三硝基苯磺酸(TNBS)诱发的UC模型大鼠血浆及结肠组织P?选择素表达的影响，探讨其抗溃疡性结肠炎复发的作用机制。现将结果报道如下。?　　1　材料与方法?　　1?1　实验动物　清洁级健康雄性SD大鼠，体质量160～200?g，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK(京)2006?0006。?　　1

5、?2　主要试剂与仪器　2、4、6三硝基苯磺酸(TNBS)为Sigma公司产品，批号：074K007;水合氯醛购自恒业中远化工有限公司;酶联免疫吸附(ELISA)法试剂盒由美国RB公司进口分装，购自北京百事创新科技有限公司;免疫组化法检测试剂盒购自北京百事创新科技有限公司;LDZ5?2型离心机由北京医用离心机厂生产;LabsystemsDragonK?3全自动多功能酶标仪;Shandon全自动石蜡包埋机;Shandon全自动石蜡切片机;OlympusVanox显微镜;Nikon显微照相系统;Image

6、?proPlus4?1图像分析系统。?　　1?3　药物　溃结复发方主要药物组成有炒五灵脂?10?g?、生蒲黄10?g、当归10?g、赤白芍各10?g、焦槟榔10?g、煨木香10?g、黄连10?g、黄柏10?g、生黄芪30?g、连翘20?g、炒白术10?g，均购自北京中医药大学东直门医院，由北京中医药大学东直门医院制剂室煎制，灌胃剂量为体质量60?kg成人药量的8倍;奥沙拉秦钠胶囊剂(畅美)由天津力生制药有限公司生产，灌胃剂量为体质量60?kg成人药量的8倍。?　　1?4　动物模型复制??[1-2]?

7、　将大鼠正常饲养1周后，禁食24?h(不禁水)，称体质量，100?mg/L水合氯醛(3?8?mL/kg)腹腔麻醉，将一直径2?mm、长约12?cm的橡胶管由大鼠肛门轻缓插入，约深8～?10?cm?，然后以0?85?mLTNBS/乙醇液(120?mg/kgTNBS+体积分数50?%乙醇0?25?mL)，约5?s灌注完毕;将造模鼠倒置8?min后(尽量减少造模试剂流出)放回笼内。?　　1?5　动物分组及给药　将120只大鼠随机分为4组，其中模型组、西药组、中药组每组各30只，均予造模;正常组30只，不予

8、造模，但与其他3组同步禁食、麻醉，同步饲养观察。于造模后第2天起正常组、模型组以蒸馏水灌胃，每次?1?mL/只?;西药组以畅美混悬液按0?266?g·kg??-1?·d??-1?剂量灌胃给药;中药组以溃结复发方按20?g·kg??-1?·d??-1?剂量灌胃给药，均每天1次，共40?d。?　　1?6　取材　分别于给药后10、30?d和停药后?10?d?，各组随机取10只大鼠，以100?mg/L水合氯醛(3?8?mL/kg)腹腔麻醉，腹主动脉取血，?20?g/L?乙二胺