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时间:2018-11-13
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1、苦瓜水提取物对雄性小鼠精子影响胡怡秀,刘秀英,马征,胡春生,张莹莹,尹进【关键词】苦瓜水雄性小鼠精子 苦瓜作为一种药食兼用的草质藤木植物的果实,民间食用已有数百年历史,其药用价值越来越被人们所关注。随着研究的深入,人们发现苦瓜有较多的保健作用〔1-3〕和广阔的临床应用前景。对苦瓜的毒性研究发现,苦瓜对雄性动物具有较强的抗生育活性〔3〕。国内外学者采用不同方法对苦瓜食用部分进行了分离提取及鉴定,从苦瓜中曾分离出苷类、蛋白质、多肽、氨基酸、糖类、生物碱类、有机酸、脂类、甾类、萜类、微量元素等多种化学成份〔4〕
2、。由于提取方法不同,导致苦瓜提取物成分各异,不同提取物的生物学作用亦不同。因此,本实验观察了苦瓜提取物对雄性小鼠精子的影响,旨在为更好地开发利用苦瓜系列产品提供科学依据。现报告如下。 1材料与方法 11材料 111苦瓜水提取物 由湖南师范大学化学测试分析中心提供。 112实验动物及饲养 清洁级昆明种小鼠,体重25~35?g(南华大学实验动物学部);实验动物生产许可证号为SCXX(湘)2004-0009,实验动物使用许可证号为SYXK(湘)2003-0002。实验期间动物房环境温度为21~
3、24℃,湿度为56%~58%。 12方法〔5〕 将25只小鼠随机分为5组,每组5只。试验组设10?000,5?000,2?500?mg/(kg·bg(kg·bl/(kg·bin内完成每只鼠1?000个左右精子活动力的观察,取悬液滴片,显微镜下将精子活动状态分为4级:Ⅰ:运动活泼,直线运动;Ⅱ:运动欠活泼,直线游动;Ⅲ:原地旋转,动作迟缓;Ⅳ:毫无活力,并按下式计算精子活动率:精子活动率(%)=Ⅰ+Ⅱ+ⅢⅠ+Ⅱ+Ⅲ+Ⅳ×100 123精子存活率采用伊红试验〔7〕。 取精子悬液和05%伊红水溶液各
4、1滴混合,在1?min内高倍镜检查。活的精子不着色,死的精子染成淡红色或淡黄色,计算存活率。 124精子形态学观察〔5〕 将精子悬液用4层擦镜纸过滤,吸滤液涂片,干燥后甲醇固定5?min,2%伊红染色1?h,用水轻冲、干燥。每只动物计数1?000个结构完整的精子,计算畸变精子发生率。 13统计分析 数据进行χ2检验。 2结果 21苦瓜水提物对小鼠精子计数的影响 2?500,5?000,10?000?mg/(kg·bl,对照组为(7840±4586)×109/ml。单因素方差分析显示,
5、4组精子计数总体比较差异无统计学意义(P>005)。 22苦瓜水提物对小鼠精子存活率的影响 2?500,5?000,10?000?mg/(kg·bg/(kg·bg/(kg·bMI等〔9〕的报道相似,精子存活率下降,理论上讲可导致生育力下降;也有不同,即存活精子活动度增强,精子计数未见明显下降,畸形数未见明显增加。这可能与苦瓜提取方式、受试对象物种不同有关。由于苦瓜水提取物成分目前还不是十分清楚,导致精子存活率下降、存活精子活动度增加的作用机制,有待于进一步研究。【
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