黄芩水提取物对牙周炎小鼠免疫力的影响

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1、黄芩水提取物对牙周炎小鼠免疫力的影响[]目的：探讨黄芩水提取物对小鼠牙周炎血清IgG的影响。方法：48只KM小鼠按随机数字表法分为正常对照组、实验性牙周炎组和黄芩组。实验性牙周炎组用丝线结扎加10%葡萄糖喂养法建立牙周炎模型，从第5周开始蒸馏水灌胃；黄芩处理组同上法建立牙周炎模型，并从第5周开始用黄芩水提取物灌胃；正常对照组牙周不做特殊处理，第5周开始用蒸馏水灌胃。各组分别于建模后第4、6、8、10周末处死动物各4只。采用摘眼球法取血液，ELISA法检测血清IgG的水平。结果：实验性牙周炎组、黄芩处理组在处理后第4、6、8、10周血清

2、IgG水平均明显高于正常对照组（均P＜0.01），实验性牙周炎组在处理后第10周血清IgG水平明显低于处理后第4周（P＜0.01），黄芩处理组在处理后第6、8、10周血清IgG水平均明显高于实验性牙周炎组（均P<0.01）。结论：黄芩能够提高牙周炎小鼠的血清IgG水平，提高其免疫力。　　[关键词]黄芩；牙周炎；血清；IgG；小鼠　　牙周炎是一种由细菌引起的免疫炎症性疾病，而中药治疗牙周炎也越来越受到重视。黄芩是我国传统的中药，有文献[1]报道，黄芩具有显著的抗炎作用，可抑制破骨细胞的活化和促进各种功能因子的产生。黄芩黄素通过选择性地抑

3、制IL-1β的表达而有效地抑制TNF-α的功能。为此，本研究采用KM小鼠建立实验性牙周炎模型，并采用黄芩水提取物进行治疗，检测其血清IgG的水平，探讨其治疗的机制。　　1材料与方法　　1.1实验动物及分组　　清洁级12周龄的KM小鼠48只，雄性，体质量37～42g，由中山大学医学院实验动物中心提供。将48只KM小鼠按随机数字表法分成3组：黄芩处理组、实验性牙周炎组和正常对照组，每组16只。　　1.2动物模型的建立与给药方法　　动物模型的建立：丝线结扎牙颈部：建模时采用10%水合氯醛（5mL.kg-1）对小鼠进行麻醉，取仰位，固定四肢及

4、头部，1％碘附消毒口腔。参照文献[4]的方法用尖探针分离双侧上颌第一磨牙牙龈组织，用5/0丝线嵌入第一、二磨牙邻间牙颈部，于第一磨牙近中牙龈乳头处结扎固定，在前庭沟区打结。造模后喂10%葡萄糖注射液多少10mL，连续4周。黄芩处理组参照上述方法建立牙周炎模型，采用黄芩水提取物以蒸馏水配制成混合液0.2mL]0.2mL.kg-1.d-1灌胃，连续灌胃至第10周。实验性牙周炎组参照上述造模的方法建立实验性牙周炎模型，采用等量蒸馏水灌胃，连续灌胃至第10周。正常对照组牙周不做特殊处理，从第5周开始采用等量蒸馏水灌胃，连续灌胃至第10周。正常

5、对照组、黄芩处理组、实验性牙周炎组分别于建模后第4、6、8、10周末处死动物各4只，取各组小鼠静脉血用于检测血清IgG水平。　　1.3血清IgG的检测　　标本采集：摘眼球法取各组小鼠静脉血1mL，4000r.min-1离心5min，收集上层血清，置-20℃冰箱保存，待测。ELISA法检测各组小鼠血清IgG水平.　　1.4统计学方法　　采用SPSS13.0统计软件对数据进行分析。计量资料以表示，各组方差齐性时，多个样本均数间的两两比较采用LSD法检验；各组方差不齐时，采用Tamhane’sT2法。以P＜0.05为差异有统计学意义。　　2

6、结果：　　3组小鼠治疗后4周、6周、8周、10周的血清IgG水平值：正常对照组分别为：0.339±0.012、0.358±0.006、0.361±0.004、0.372±0.009；试验性牙周炎组分别为：0.715±0.039、0.688±0.012、0.657±0.013、0.648±0.005；黄芩处理组分别为：0.713±0.054、0.987±0.024、1.185±0.018、1.211±0.026，实验性牙周炎组、黄芩处理组在处理后第4、6、8、10周血清IgG水平均明显高于正常对照组（P＜0.01），实验性牙周炎组在处理

7、后第10周血清IgG水平明显低于在处理后第4周（P＜0.01），黄芩处理组在处理后第6、8、10周血清IgG水平均明显高于实验性牙周炎组（均P<0.01）。　　3讨论　　牙周炎的致病菌以厌氧菌为主。由于牙周致病菌引起一系列免疫反应，加剧了牙周的炎症，造成了牙周组织的破坏。另外，在细菌抗原的作用下，浆细胞合成特异性抗体，抗体以IgG为主，少量为IgA和IgM，IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是再次免疫应答的主要抗体，是反映机体免疫水平的重要指标之一[2]。　　近年来随着对黄芩的研究增多，其抗炎和免疫调节的作用逐渐被发掘出来。黄芩通过

8、多种途径调节体内的免疫反应。Kim等[1]观察到黄芩苷能抑制iNOS，COX-2酶的活性，从而抑制细胞分泌IL-1β、TNF-α、IFN-γ和PGE2等因子，起到抗炎的作用。李林等[3]用流式细胞术（FCM）结合荧光抗体