p16蛋白在骨肉瘤中表达及临床意义

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1、P16蛋白在骨肉瘤中表达及临床意义【】目的探讨p16蛋白在骨肉瘤中的表达及临床意义。方法应用SP免疫组化法检测P16蛋白在40例骨肉瘤及10例正常骨中的表达，分析P16蛋白表达和骨肉瘤病理分级、临床分期及不同临床病理因素间的关系。结果p16在骨肉瘤中平均表达为60%，其表达与骨肉瘤的组织学分级、临床分期显著相关（P3年者为高生存组，14例(35%)。随访全部病例。对照研究组选用10例正常骨组织。　　1.2方法　　免疫组织化学法将10％福尔马林固定、石蜡包埋的骨肉瘤组织制成4～5μm切片，常规脱蜡，浸入0.01mol/L、pH为6.0的枸橼酸盐缓冲液内，微波炉抗原修复

2、10分钟，温度为92～98℃。用SP法进行免疫组织化学染色。P16试剂盒系北京中杉生物试剂公司提供的Zymed公司产品。　　1.3结果判定　　P16蛋白免疫组织化学染色阳性反应为棕黄色和(或)棕褐色颗粒，P16蛋白定位于细胞核或(和)细胞浆上，自每张切片选10个高倍视野(×400)观察阳性细胞与细胞总数的比例关系，无表达为阴性(-)；表达≤50%为阳性(+)；>51%为强阳性(++)。　　1.4统计学处理P16蛋白表达与骨肉瘤临床病理的关系，应用Pearsonx2检验进行统计学分析，以中位数将P16染色结果分为高表达与低表达两组，统计两组骨肉瘤存活期，并行Long-

3、rank检验。　　2结果　　2.1P16蛋白免疫组化染色结果　　P16阳性产物呈棕褐色细颗粒状，主要位于胞核，部分可见于胞浆内。阳性细胞呈弥漫或灶性分布。40例骨肉瘤免疫组化染色结果阴性16例(40.00%)，阳性24例(60.00%)，见表1。正常骨、骨肉瘤边缘反应性新生骨未见着色。统计学分析，Ⅰ级与Ⅱ级、Ⅰb与Ⅱa间差异具有显著性（P0.05）。　　表2P16蛋白表达与骨肉瘤主要临床病理资料关系　　　　2.3P16蛋白表达与骨肉瘤病人预后的关系　　本组肿瘤P16蛋白LI中位数为50.4%，以此将骨肉瘤分为高表达组和低表达组，long-rank检验。Long-ra

4、nk检验结果:X2=6.97，两者相差显著(P0.05）。表明p16蛋白可作为骨肉瘤分化性标记物，并可能成为判断骨肉瘤复发的有用指标。随访结果显示P16蛋白低表达组骨肉瘤患者的生存期较高表达组显著缩短，表明P16蛋白可能作为判断骨肉瘤预后的一个指标[7]，当然这还需要大量的骨肉瘤随访结果证实。　　综上所述，p16作为细胞周期的负性调控因子，其蛋白减少或缺失是骨肉瘤的发生、发展及不良预后的重要指标，对临床具有重要的指导意义。