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时间:2018-11-13
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1、P16蛋白在骨肉瘤中表达及临床意义【】目的探讨p16蛋白在骨肉瘤中的表达及临床意义。方法应用SP免疫组化法检测P16蛋白在40例骨肉瘤及10例正常骨中的表达,分析P16蛋白表达和骨肉瘤病理分级、临床分期及不同临床病理因素间的关系。结果p16在骨肉瘤中平均表达为60%,其表达与骨肉瘤的组织学分级、临床分期显著相关(P3年者为高生存组,14例(35%)。随访全部病例。对照研究组选用10例正常骨组织。 1.2方法 免疫组织化学法将10%福尔马林固定、石蜡包埋的骨肉瘤组织制成4~5μm切片,常规脱蜡,浸入0.01mol/L、pH为6.0的枸橼酸盐缓冲液内,微波炉抗原修复
2、10分钟,温度为92~98℃。用SP法进行免疫组织化学染色。P16试剂盒系北京中杉生物试剂公司提供的Zymed公司产品。 1.3结果判定 P16蛋白免疫组织化学染色阳性反应为棕黄色和(或)棕褐色颗粒,P16蛋白定位于细胞核或(和)细胞浆上,自每张切片选10个高倍视野(×400)观察阳性细胞与细胞总数的比例关系,无表达为阴性(-);表达≤50%为阳性(+);>51%为强阳性(++)。 1.4统计学处理P16蛋白表达与骨肉瘤临床病理的关系,应用Pearsonx2检验进行统计学分析,以中位数将P16染色结果分为高表达与低表达两组,统计两组骨肉瘤存活期,并行Long-
3、rank检验。 2结果 2.1P16蛋白免疫组化染色结果 P16阳性产物呈棕褐色细颗粒状,主要位于胞核,部分可见于胞浆内。阳性细胞呈弥漫或灶性分布。40例骨肉瘤免疫组化染色结果阴性16例(40.00%),阳性24例(60.00%),见表1。正常骨、骨肉瘤边缘反应性新生骨未见着色。统计学分析,Ⅰ级与Ⅱ级、Ⅰb与Ⅱa间差异具有显著性(P0.05)。 表2P16蛋白表达与骨肉瘤主要临床病理资料关系 2.3P16蛋白表达与骨肉瘤病人预后的关系 本组肿瘤P16蛋白LI中位数为50.4%,以此将骨肉瘤分为高表达组和低表达组,long-rank检验。Long-ra
4、nk检验结果:X2=6.97,两者相差显著(P0.05)。表明p16蛋白可作为骨肉瘤分化性标记物,并可能成为判断骨肉瘤复发的有用指标。随访结果显示P16蛋白低表达组骨肉瘤患者的生存期较高表达组显著缩短,表明P16蛋白可能作为判断骨肉瘤预后的一个指标[7],当然这还需要大量的骨肉瘤随访结果证实。 综上所述,p16作为细胞周期的负性调控因子,其蛋白减少或缺失是骨肉瘤的发生、发展及不良预后的重要指标,对临床具有重要的指导意义。
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