电磁场诱导大鼠心肌组织sis和gh基因的特异性表达

《电磁场诱导大鼠心肌组织sis和gh基因的特异性表达》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、电磁场诱导大鼠心肌组织sis和GH基因的特异性表达　　0引言　　外界电磁场（EMF）作用的关键性靶体之一可能是细胞通讯的化学转导和传送系统，引起生物大分子构象的变化，最终导致基因表达调控的改变［1］;因此从基因水平研究EMF生物学效应，对于阐明EMF作用机制和其应用有一定的理论意义和实用价值.　　1材料和方法　　1.1材料SD雄性大鼠12只，购于本校实验动物中心，属二级动物，体质量（200±10）g，饲养1an）;PCR仪（PE公司）.　　1.2方法电磁波照射:参数:场强40kV・m-1，脉冲50次;SD大鼠放于聚乙烯鼠盒内，置于辐射场中

2、，体位为自由体位;0次组为假照射（正常组）.心肌总RNA提取采用TRIzolRNA提取试剂盒进行.SD大鼠随机分组为两组即正常组（n=6），EMF组（n=6）;EMF照后12h，断头处死，迅速称取心尖部心室肌50mg/只，将两组心肌分别于（TRIzol液按10μL・mg-1）的匀浆器中，冰浴匀浆提取RNA，检测其浓度和纯度.标记探针用PCR法，即样品RNA反转录合成cDNA，以cDNA为模板，内加biotin-dNTP生物素，PCR25个循环后，4℃10000g离心10min，弃上清，真空干燥后，去离子水溶解，-70℃保存待用.将已知42

3、个基因在杂交膜按一定顺序点样组成DNA阵列（芯片）（6排×7列）用生物素标记的探针与已知DNA阵列杂交膜杂交，洗膜，加入化学发光剂，曝光显影，观察结果.　　2结果　　正常组在已知的42个基因阵列中未发现高表达的基因（图1）.EMF照后12h与正常组相比，在已知的42个基因阵列中发现有两个特异性表达基因即sis癌基因和GH基因，其中sis癌基因高表达，两个可疑表达基因即BMP3和IL-3基因（图1）.　　图1略　　3讨论　　电磁波可作为信息分子激活了一个控制代谢、信使和细胞生长所需的酶系统的级联反应，影响了细胞增殖与分化的生长因子及原癌基因的调节.在极低

4、频段的电磁波有关资料显示在基因表达方面的研究，集中于c-myc和c-fos等基因的转录;如Binninger等［2］采用差异显示法研究了受电磁波辐照的酵母菌，有5个特异性应答基因.本结果表明，EMF照后可诱导出心肌组织sis癌基因和GH基因的特异性表达，其中sis癌基因高表达.sis癌基因是生长因子型癌基因.　　c-sis原癌基因的表达受某种或某些特定因素的调控，一旦这种表达失调，引起该基因的不适宜表达，则可能导致间充质瘤，或间充质起源细胞的恶性转化，此外，外援DNA的插入、基因编码取核苷酸的点突变以及某些化合物均可激活c-sis原癌基因，引起细胞转化

5、［4］.本研究还显示，正常组大鼠心脏c-sis基因未见明显表达与Clayb［5］报道相符，EMF所诱导的c-sis基因表达，其表达产物PDGF所带来的生物功能，有待今后的实验观察.我们推测EMF诱导心肌c-sis基因表达可能机制为:①EMF作用细胞膜激活蛋白激酶后，启动一系列的磷酸化过程，导致癌基因的表达;②EMF作用后可能引起体内血管活性物质的增加如血管紧张素，去甲肾上腺素等通过信号转导而启动癌基因的表达.本实验条件下，EMF作用后可诱导出大鼠心脏GH基因的表达，GH基因的表达产物为生长激素，生长激素不仅在正常生理功能中发挥作用，也可能参与了肿瘤的能

6、量和物质代谢［6］.但EMF诱导心肌GH基因表达机制是否与诱导sis基因相同，或另有途径，目前尚不清楚.　　我们认为EMF对生物体的作用是广泛的，也是复杂的;本研究仅局限于42个已知基因的表达研究，显然是不足的，此方面亟待进一步实验探讨.