体外循环围手术期血浆中性粒细胞防御素和弹性蛋白酶的动态观察

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1、体外循环围手术期血浆中性粒细胞防御素和弹性蛋白酶的动态观察王永杰1王冬2（1屮国人民解放军第97医院检验科江苏徐州221004）（2屮国人民解放军杭州疗养院海勤疗区浙江杭州310026）【屮图分类号】R654.2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）51-0079-02【摘要】本文通过定量观察心内直视手术患者围手术期血浆屮性粒细胞肽（HNP）和屮性粒细胞弹性蛋白酶（NE）的动态变化，探讨它们在体外循环（CPB）诱发全身炎症反应综合症（SIRS）早期诊断中的作用。得出结论：血浆H

2、NP1-3和NE对CPB诱发SIRS反应敏感、迅速，血浆浓度的动态变化可能提示SIRS的严重程度和发展趋势。【关键词】体外循环屮性粒细胞肽弹性蛋白酶体外循环（CPB）诱发全身炎症反应综合症（SIRS）,致肺和其它器官损伤、功能障碍，是威胁病人生命的严重并发症之一，但其发病机理尚未完全明了。本文通过ELISA法定量观测CPB围手术期患者血浆屮HNP1-3和NE含量的动态变化，同时测定血浆肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和C-反应蛋白（C-RP）,探讨它们可能在SIRS早期诊断中的作用。

3、1材料和方法1.1临床资料病例来自2003年7月〜2004年10月本院择期CPB心脏直视手术患者21例，其屮男13例，女8例；年龄最小7岁，最大42岁，平均18.9岁。病种分布，室间隔缺损8例，房间隔缺损9例，风湿性联合瓣膜病2例，法氏四联症1例，室内隔膜部瘤破裂1例。术前血常规均正常。1.2麻醉与CPB大剂量芬太尼静脉麻醉，呼吸机控制呼吸，Sams9000体外循环机心肺转流，西京-95型鼓泡型氧合器体外氧合，维持PaO2300〜500mmHg,PaCO235〜45mmHg，升主动脉阻断时间15〜

4、118min,平均65min,CPB吋间30〜155min，平均86min。肝素用量:体内3mg/kg，血液稀释度18-21%,鱼精蛋白按肝素的1:1中和。1.3测定方法1.3.1标本采集分别在CPB前、中(升主动脉阻断后15min,AA阻断后15min)、CPB后(升主动脉阻断开放后)0.5h、4h、24h、48h吋间点采集患者静脉血标本2ml肝素抗凝，约230g离心15分钟，取无细胞血浆置塑料离心管-30冰冻保存。1.3.2试剂和仪器血浆HNP1-3定量测定使用本室研制的单克隆抗体EUSA试剂

5、盒，HNP的纯化和单克隆抗体制备见报道［1〜2］。血浆NEELISA定量检测试剂盒由BenderMedSystems公司提供，全自动酶免分析仪为CODA公司产品。CK、CK-MB和C-RP测定采用罗氏试剂和日立7600全自动生化分析仪。1.3.3HNP测定血浆中HNP测定采用ELISA方法。1.3.4NE测定NE测定按Systems公司提供的ELISA试剂盒说明书要求对上述标本中NE进行定量测定。1.3.5统计分析:结果用均数±标准差(-X±S)表示，差异的显著性用方差

6、分析，显著(P<0.05)；非常显著(P<0.01)o2结果2.121例心脏病患者CPB围手术期血浆HNP1-3、NE、CK、CK-MB和C-RP测定结果。数据显示，在升主动脉阻断15min吋血浆HNP1-3和NE浓度与CPB前无显著变化(P>0.05),CPB后0.5h比CPB前有非常显著升高(P<0.001)，术后4h达到峰值，术后24h开始下降；血浆CK和CK-MB和C-RP含量在术后4h开始升高，24达到峰值，48h后开始下降。2.2血浆HNP1-3和NE之间浓度变化呈显著正相关(r

7、=0.874P<0.001)。血浆HNP1-3浓度与CK和CK-MB之间呈显著正相关(r=0.848和0.869P<0.001)。术后0.5h血浆HNP1-3浓度与术后24h血浆C-RP浓度的升高幅度呈显著正相关(r=0.660P<0.01)o血浆NE浓度与CK和CK-MB之间呈显著正相关(「=0.561和0.586P<0.01)。术后0.5h血浆NE浓度与术后24h血浆C-RP浓度的升高幅度也呈显著正相关(r=0.502P<0.05)。3讨论实验结果显示，CPB可使血浆NE显著升高。本组21例患

8、者CPB术后0.5h血浆NE浓度比术前增加了6倍。这些由PMN分泌的弹性蛋白酶在微血管内皮细胞损伤导致肺水肿中起重要作用。HNp具有广谱杀菌、细胞毒和趋化活性，在低浓度时能吸引PMN等吞噬细胞到炎症部位，在高浓度时具细胞毒活性，参与炎症和组织损伤过程。正常情况下，HNP1-3在血浆中的浓度很低，当感染、炎症或受到LPS、IL-8、TNF-α等致炎因子激活吋PMN脱颗粒，血浆中HNP1-3浓度显著升高，是细菌感染的早期诊断指标。本研究结果显示：在各种中性粒细胞为主的肺部炎