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1、生化试剂的基础知识——详解一、生化试剂的分类（―〉按照化学性质分类I.酶类：色括ALT,AST,ALP,ACP,r-GT,a-HBDH,LDH,CK,CK-MB,a-AMY,MSO,ADA,ChE等。2.底物/代谢产物类：包括TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA,UREA,Cr,Glu,TP,Alb,T-Bil,TBA,NH4+,C02等。3.无机离子类：括Ca,P,Mg,CI等。4.特种蛋白类：包括apoAI,apoB,Lp（a）,C3,C4,PFB（B因子），IgG，IgA,IgM等。（二＞按照临床应用分类1.无机离子：包括Ca,P，Mg，Cl等。2.肝功能：
2、包括ALT,AST，r-GT,ALP,MSO,T-Bil,D-Bil,TBA,TP,Alb等。3.肾功能：UA，UREA，Cr等。4•心肌酶谱：CK，CK-MB,LDH，a-HBDH,AST,MSO。5.糖尿病：GUJ等。6.前列腺疾病：ACP，p-ACP等。7.胰腺炎：a-AMY„8.血脂：TC，TG,HDL-C，LDL-C，apoAl，apoB，Lp（a）。9•痛风：UA010.有机磷中毒：ChE。II•免疫性疾病：C3,C4,PFB（B因子），IgG,IgA,IgM,Kappa链,Lambda链。二、反应速度特性按照反应速度，可以分为终点法试剂和动力学试剂。而动
3、力学试剂乂可再分为零级动力学法和一级动力学法。（一）终点法试剂终点法，桁经过一段时间（-•般为几分钟）的反应，反应进行到完全，使全部底物（被测物）转变成产物，称终点法，更确切地说应称平衡法，这是虽理想的分析类型。如阁（1）。图整个反应达到T衡，山于K叫反应的肀衡常数很大，可认为所打的被测定物己转变为产物，反应液的吸光度不PI增加（或降低）.吸光度的増加（或降低）稈度与被测定物的浓度成正比。终点法对反应条件（如酶萤、pH、温度）小的改变不敏感，只耍这种改变不影响在一定时间内反应达到平衡即可，是最理想的反应模型。屈F终点法的试剂主要有：TG,TC，HDL-C，LDL-C，
4、UA，Glu，TP，Alb,T-Bil,D-Bil，Cr（氧化酶法），NH4+,CO2,Ca，P,Mg,Cl,apoA1,apoB，Lp⑻，C3，C4：PFB（B因子〉，IgG，IgA,IgM等。（二〉动力学法试剂1.零级动力学法零级动力学法，指反应过程中反应速度维持不变，达到敁大，与底物浓度无关，因此，在整个反应过程中，反应物可以匀速地生成某个产物，导.至被测定溶液在某•一波长下吸光度均匀地减小成增加，减小或增加的速度（AA/min）与被测物的活性或浓度成正比,主要用于酶活性的测定。如图（2）。实*际上,山于底物浓度不可能足够人,随着反应的进行,底物消耗到一定程度后
5、，反应速度不捋维持不变，同样从启动反应到达到最大速度谣耍一定时间。因此，零级动力学法是针对特定时间而言的，各试剂尚对这段时间冇严格规定。屈于零级动力学法的试剂主耍有：ALT,AST,ALP,ACP.r-GT,a-HBDH,LDH，CK，CK-MB,a-AM丫，MSO,ADA,ChE，TBA等。2.-•级动力宁法在一定的反应时问内，反应速度与底物浓度的一次方成K比，由于底物在不断的消耗，因此整个反应的速度茌不断的减少，表现为吸光度的增加（成降低）速度越米越小，这类反应达到平衡的时问很长，理论上可以在任意时问段进行监测，但III于血消成份贷杂，反应刚启动时反应较复杂，杂反
6、应较多，经过一段延迟时间欢能进入稳定反应期，必需在特定时间段lAl进行监测，芥试剂商对这段时间有严格规定。如图（3）。图（3h在一固定时间间隔屮，底物浓度的变化景正比于底物的初浓度，这是一级反应的同性。该段时间内吸光度的增加或降低与被测物的浓度成iE比。妞于一级动力学法的试剂主要有：Cr（苦味酸法），UREA（紫外监测法）三、显色原理记色系统主要存以下儿种：•NAD-NADH和NADP-NADPH系统•p-NP和p-NA系统•H2O2偶联的指示系统•抗原抗体反应指示系统•其它显色反应（-）NAD-NADH和NADP-NADPH系统NADH和NADPH340nm打特征性
7、吸收峰，而NAD和NADP在340nm尤特征性吸收晬，利用K:偶联的脱铽醜（I:具阅）反应，根据340nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。作为该指示系统黹用的工具酶宵LDH、MDH、GLDH和G6PDH目前利用此指示系统进行测定的临床项目有：ALT、AST.CK,LDH、CK-MB、a-HBDH、Glu、UREA,NH4+、C02等。（二）p-NP和p-NA系统p-NP和p-NA在405nm冇特征性吸收峰，根椐405nm吸光度的赍化，可以测定物质的浓度或活性。目前利用此指示系统进行测定的临床项目有ALP、ACP、r-GT、AMY等，（三）H2
