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时间:2018-11-12
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1、脑梗死患者血清NO及tNOSiNOS的测定 [关键词]脑梗死;一氧化氮(NO);一氧化氮合成酶(NOS) Determinationofserumnitricoxide(NO)andnitricoxidesynthesis(tNOS,iNOS)inthepatientsnitricoxide(NO)andnitricoxidesynthesis(NOS)levelsofnormalsubjectsandpatientsNOinedbynitratereductase.Andolecularoxygenresponseto
2、generateNO,NOandpro-nuclearsubstancestoconductacoloredpound,thenetricmethoddeterminationofserumNOS.In42patientsNO,tNOSandiNOScontentsinedandanalysisofchangesintheseindicators.Results:paredNOdecreasedsignificantlyininfarctiongroup(P0.05).Conclusion:SerumNO,tNOSandiNOS
3、haveinvolvedinthepathophysiologyofcerebralinfarction,thedeterminationcouldhelpthediagnosisofcerebralinfarctionandrehabilitation. [Keyl,于24h内通过抗凝、3000r/min离心机离心15min后提取血清,将每例患者血清均分装于4个EP离心管中,封存于-80℃冰箱中成批备用。 1.2方法 1.2.1仪器和试剂采用上海7200型可见光分光光度计。NO和NOS试剂测定盒购于南京建成生物工程研究所
4、。 1.2.2检测方法严格按照试剂盒说明书中的操作程序进行,为了避免反复冻融影响标本质量,笔者将NO、tNOS及iNOS所有指标统一测定,并且采用编号双盲的方法检测所有标本。按照试剂盒标注方法配制各种试剂,配置及测定步骤严格按照操作规程完成,应用分光光度仪550nm,0.5cm光径,采用分光光度仪比色法检测各管吸光度值。 1.2.3计算方法根据各测试管所测吸光度值,按说明书给出的计算公式计算NO、tNOS及iNOS的含量,结果分别以μmol/L、U/ml和U/ml表示。 1.3统计学处理 数据以均数±标准差(x±s)表示
5、,配对比较采用t、t′检验和方差分析。 2结果 脑梗死患者血清NO、NOS含量变化,见表1。与健康对照组比较,脑梗死组NO含量明显降低(P0.05)。 表1脑梗死患者血清NO、NOS含量变化(x±s) Tab.1ChangeofNO,NOSoftheseruminthepatients withcerebralinfarction(x±s) 与健康对照组比较,★P<0.05,*P>0.05但有降低趋势,△P>0.05但有上升趋势 3讨论 自从NO被认识以来,其在脑血管病发病中所起的作用一直是研究的重点。近来研
6、究的结果有分歧,研究较为一致的观点认为NO是由NOS催化L-精氨酸生成的一种含氮化合物,可以使血管平滑肌松弛,且能抑制血小板聚集。大量研究表明,内皮细胞可以在生理条件下不断合成基础量的NO,并不断释放以抑制血管对收缩因子的反应,抑制血小板聚积和黏附,从而维持血管的舒张状态,保持生理水平所需的脑血流量[3],但产生过多或过少的NO都将导致脑组织的病理性损伤[4]。 NOS是合成NO的关键因素,在脑缺血中发挥神经元保护和神经毒性的双重作用[5]。它有三种亚型,神经元型(nNOS)、内皮型(eNOS)、诱导型(iNOS),均已在中枢
7、神经系统中得到实验证实,神经元型(nNOS)和内皮细胞型(eNOS)在生理状态下即有表达,统称为原生型酶(cNOS)。有多种细胞可产生NOS。在脑缺血时eNOS活性升高,从而引起NO生成增多,致缺血区脑血管扩张,改善缺血区血供,对缺血脑组织起到保护作用。相反nNOS、iNOS在脑缺血后起损害作用,nNOS在脑缺血较早阶段起损害作用,iNOS的损害作用发生在脑缺血稍后阶段[6]。 本实验显示NOS含量变化不显著,但是tNOS有降低趋势、iNOS有上升趋势。有报道提示,广泛分布于脑组织中的NOS受到NO的负反馈调节[10]。当NO
8、含量降低时反馈性导致NOS的降低减缓或使其有所升高,但也有研究发现,在脑缺血亚急性期出现的炎性浸润等改变可以激活iNOS,而产生大量的NO,并且可促使非毒性刺激因素(感染、血压波动、脱水等)进一步加重脑组织损伤[11],而通过应用iNOS抑制剂可阻断NO介导的毒
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