宫内缺氧对新生大鼠神经元的影响及当归的保护作用

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1、宫内缺氧对新生大鼠神经元的影响及当归的保护作用作者：岳鹤声陈旭东刘红敏华新宇余鸿【摘要】目的探讨宫内缺氧对新生大鼠海马神经元的影响及当归注射液的保护作用。方法孕期14d的SD大鼠21只，随机分为对照组、缺氧组和当归治疗组。缺氧组孕鼠自孕第14天开始经尾静脉注射生理盐水8ml/kg，1次/d，连续7d，后用低张性缺氧模型致胚鼠宫内缺氧2h，连续3d(孕期第14，15，16天);当归治疗组用250g/L的当归注射液代替生理盐水，其余处理同缺氧组;对照组不缺氧，其余同缺氧组。孕鼠分娩后立即取新生鼠脑组织，常规石蜡切片，经神经元特异性烯醇化酶(Neuron

2、specificenolase，NSE)免疫组织化学染色后行图像分析。结果缺氧组新生鼠海马NSE免疫组化阳性细胞的积分光密度(IntegratedOpticalDensity，IOD)值较对照组减少〔IOD缺氧组：(4.9±1.1);IOD对照组：(6.2±1.6),P<0.05〕;当归组新生鼠海马NSE免疫组化阳性细胞的IOD值较缺氧组增加〔IOD治疗组：(6.9±2.6),P<0.05〕。结论一定程度的缺氧可刺激海马CA3区神经元变性;当归注射液对宫内缺氧新生大鼠海马CA3区神经元可能具有保护作用。【关键词】当归;缺氧;神经元;免疫

3、组化　　Abstract：ObjectiveTostudytheeffectofintrauterinhypoxiaonneuronofhippocampusfromnealeSDrats(n=21)lyintothreegroups:controlgroup(CG)、hypoxiagroup(HG)andAngelicagroup(AG).SincethefourteenthdaysaftertheyalSalinethroughcaudalvEIns(l/(kg.d)beforeintrauterinhypotonichypoxia(alsal

4、ineeastheHG.NoadministrationofhypoxiaedintheCG.Takeouttheirbraintissuesimmediatelyofnepusofnemunohistochemistryandtheresultsageprocessingsystem.ResultsIODofNSEpositivecellsinHGarehigherthanthatofHG〔IODAG：(6.9±2.6),P<0.05〕.ConclusionHypoxiacanstimulatenepusintodegeneration,A

5、ngelicainjectioncanplayaprotectiveroletoneuronofCA3ofhippocampusfromnemunohistochemistry　　宫内缺氧是胚胎发育中的常见症，是造成脑瘫，智力发育迟缓及智力低下的重要原因，神经系统是胚胎发育中出现最早的系统之一，且神经元又对缺氧最敏感，因此研究宫内缺氧对神经元的影响具有重要意义。目前国内外缺氧对神经元影响的研究多是在体外状态下进行的[1]，在体的研究大多集中在对生后7～14d的新生鼠夹闭颈总动脉，给予低氧干预，本实验试图通过建立宫内缺氧模型，观察在体状态下缺氧对新生

6、大鼠神经元的影响，并观察中药当归对缺氧状态的调节，为临床长期观察缺氧对新生鼠的影响和治疗宫内缺氧提供实验和理论依据。　　1材料与仪器　　1.1材料小鼠抗NSE(CHEMICON公司);多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine)、SABC试剂盒、DAB显色试剂盒(棕黄色)购自武汉博士德生物工程公司。250g/L的当归注射液购自武汉大学附属第二医院药剂科(批号060926)。　　1.2仪器OLYMPUSBx-70荧光显微镜成像系统(日本OLYMPUS公司);德国莱卡切片机;三气培养箱(美国REVCO公司)。　　2方法　　2.1动物配种与分组健康成年雌性S

7、D大鼠21只(泸州医学院动物中心提供)，体重220～250g，分别与一只雄鼠合笼饲养配种，于第2日早晨发现雌鼠阴栓记为妊娠0d，记下日期，取出雄鼠，单独饲养雌鼠至孕期14d。将孕鼠随机分为：对照组5只、缺氧组8只和治疗组8只。　　2.2宫内缺氧新生鼠模型建立缺氧组孕鼠自孕第14天开始在设置好的三气培养箱(氧体积分数130ml/L，温度：25℃，相对湿度，75%～80%，CO2浓度体积分数：0.3～0.4ml/L)内缺氧2h/d，缺氧前1h经尾静脉注射2ml生理盐水，连续缺氧3d(孕14，15，16d)，当培养箱控制面板上的数值达到与设置值一致时开始

8、记录缺氧时间;当归治疗组用250g/L的当归注射液代替生理盐水，其余处理同缺氧组;对照组不缺氧，其余同缺氧组，孕鼠自然分娩