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时间:2018-11-11
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1、超声波提取马鞭草中黄酮类化合物的工艺研究卞杰松,邓斌,王存嫦,章爱华,刘志伟【摘要】 目的为充分利用马鞭草植物资源,避免资源的浪费,探讨马鞭草黄酮类化合物的提取及鉴别方法。方法采用超声波乙醇浸提法从马鞭草中提取黄酮类化合物,对所提取的黄酮类化合物进行验证,并用紫外分光光度法测定其含量。结果测得马鞭草样品中黄酮类化合物的总含量为8.36mg/g,回收率为99.56%,其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程,无任何污染,是提取马鞭草中黄酮类化合物的有效途径。【关键词】超声波提取马鞭草黄酮类化合物 Abstract:Ob
2、jectiveTostudythemethodsofextractionandidentificationofflavonoidsfromverbenaofficinalisL.MethodsTheflavonoidsVerbenaofficinalisL.etryineandidentifytheflavonoidsfromVerbenaofficinalisL.Hunan.ResultsBythismethodthecontentsoftheflavonoidsfromVerbenaofficinalisL.g/gand
3、theraterecoveryethodisapurephysicalprocess,andhasnotanypollution.ItisanidealVerbenaofficinalisL. Keyent;VerbenaofficinalisL.;Flavonoids 马鞭草VerbenaofficinalisL.又叫铁马鞭、自马鞭、疟马鞭,皆以穗类鞭鞘而得名。为马鞭草科(Verbenaceae)多年生草本植物马鞭草的全草或根。常生于河岸、草地、荒地、路边、田边及草坡等处,全国各地均有分布〔1〕。体内富含糖、淀粉、蛋白
4、质、氨基酸、维生素、矿物质、黄酮、类胡萝卜素等许多活性成分〔2〕。药用部分为其全草或带根全草,作为一种传统的中草药,具有清热解毒、截疟杀虫、治痢、利水消肿、通经散瘀等功效,被广泛用于治疗伤风感冒、水肿、痢疾、黄疸等病症〔3〕。现代研究还发现马鞭草具有抗癌〔4〕、抗早孕〔5〕以及免疫调节作用〔6〕。 有文献报道马鞭草中黄酮类化合物的提取方法采用乙醇提取〔2〕,但是,这种方法的提取效率仍然较低。近年来,超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道〔7~9〕,表明其具有能耗低、效率高、不破
5、坏有效成分的特点。很多研究表明,利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等,可加速植物材料中的有效成分进入溶剂,从而增加有效成分的提取率,缩短提取时间,并且还可避免高温对提取成分的影响〔10〕。超声技术应用于提取马鞭草中黄酮类化合物的研究尚未见报道,本文报道用超声波提取马鞭草黄酮类化合物及鉴别。 1材料 1.1仪器 UV-752紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司);AL104电子天平(Mettler-Toledo仪器公司);KQ-500DE型医用超声波清洗机(昆山超声仪器有限公司);F120
6、型粉碎机(北京中仪金叶科技有限公司);pH213型酸度计(上海雷磁仪器有限公司);SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(郑州市亚荣仪器有限公司)。 1.2试剂 95%乙醇、氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝、三氯化铝、镁粉、正丁醇、氨水、盐酸、冰醋酸、乙酸镁、醋酸乙酯(均为AR);芦丁标样(含量≥98%)由广东药学院药物化学研究室提供;马鞭草样品采于湖南省吉首大学校园内,并经湖南省药材公司李树胜执业药师鉴定为VerbenaofficinalisL.全草。 2方法 2.1黄酮类化合物成分提取 取新鲜马鞭草,洗净,晾干,粉碎。精
7、密称取马鞭草粉末10.0g,加100ml95%乙醇,超声波提取2h,抽滤。滤渣再加100ml95%乙醇,超声波提取2h,抽滤,合并两次滤液,减压回收乙醇至滤液仅剩5~8ml为止,放置100ml容量瓶中,用70%乙醇稀释至刻度,得待测样品溶液。 2.2测定方法依据 以芦丁为对照品测定马鞭草中黄酮类化合物的含量,加入铝离子试剂,同时控制适宜pH值,使黄酮化合物与铝盐形成络合物,在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。 3结果 3.1定量实验-黄酮类化合物的含量测定 3.1.1波长的选择 取样品溶液适量,在0.5ml5%
8、亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下,经硝酸铝显色后,以试剂为空白参比液在400~700nm波长范围测定螯合物的吸光度,螯合物于502nm波长处有最大吸收,故测定时选用此波长。 3.1.2标准曲线的绘制 分别精密吸取芦丁对照液(0.10mg/ml)0.00,0.50,1.00,2.00,3.
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