macc1在卵巢癌中表达及其基因沉默对卵巢癌ovcar-3细胞影响实验地研究

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时间:2018-11-10

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1、原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者:El期:知l饵,月呵Et/’学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本

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3、中卵巢癌的发病率虽然仅占女性恶性肿瘤的4%,但却是死亡率最高的妇科恶性肿瘤。卵巢癌具有起病隐匿、原发灶隐蔽、首次诊断多为晚期、易播散转移、术后易复发和易产生化疗耐药等特点,随着医学水平的进步、临床肿瘤细胞减灭术和联合化疗水平的提高,卵巢癌的五年生存率虽然得到了明显改善,但卵巢癌患者的总体预后仍不满意。多年来全世界投入大量人力、物力进行卵巢癌发病机制的有关研究,试图阐明卵巢癌发生发展的分子机制,尽管在卵巢癌的早期诊断、基因治疗和化疗耐药机制研究等方面取得了令人可喜的成绩和令人巨大的进展,但目前卵巢癌发生发展的分子生物学

4、机制仍不清楚。经过多年的研究后,目前科学界趋向于认为肿瘤是一种由基因组多发性改变而引起的疾病,肿瘤发生的基础是癌基因功能区突变而激活和/或抑癌基因功能区突变而失活。持续的生长信号刺激、逃避生长抑制、抵抗程序性细胞死亡、无限的复制潜能、诱导血管发生、侵袭和转移的激活、细胞能量代谢的重组和逃避免疫损伤是导致不同类型的肿瘤细胞恶性生长所必需的8种获得性细胞生理学改变。在肿瘤发展过程中大多甚至全部肿瘤都存在类似的细胞生理学特点的改变,因此与这些获得性细胞行为关系密切的癌基因和抑癌基因都成为肿瘤摘要分子机制研究和癌症治疗研究的

5、热点。结肠癌转移相关基因1(metastasis.associatedincoloncancer-1,MACCl)是Stein等在2009年应用全基因组表达分析技术在结肠癌原发灶和转移灶中发现的一个以前未被描述过的基因,MACCl可在体外实验中促进结肠癌细胞的增殖、侵袭和肝细胞生长因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)诱导的癌细胞播散,且可促进动物实验中结肠癌细胞移植瘤的生长,是可用于结肠癌转移和预后判断的独立标志物。目前的研究发现,MACCl与胃癌、肺癌和肝癌等恶性肿瘤的转移和预后密切相关。M

6、ACCl是HGF/C.met信号通路中MET基因的关键调节因子,HGF又称离散因子(scatterfactor,SF),能促进多种肿瘤细胞的生长、粘附、移动及侵袭,且可刺激血管内皮细胞生长,在卵巢癌等一系列恶性肿瘤细胞的生长、侵袭及转移过程中发挥重要作用。目前,国内外尚无MACCl与卵巢癌相关关系的研究报道,MACCl是否参与卵巢癌的发生发展、其对卵巢癌的临床意义何在、其与卵巢癌细胞的生物学行为关系如何、其异常表达导致卵巢癌细胞侵袭和转移的分子机制如何等问题尚不清楚。目的通过检测不同性质卵巢组织中MACCl的表达,初

7、步分析MACCl异常表达与卵巢癌临床病理参数的关系,评价卵巢癌组织中MACCl异常表达的临床意义。进而采用RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术研究卵巢癌细胞中MACCl基因沉默后对卵巢癌细胞生长、凋亡、迁移和侵袭的影响,探讨其异常表达与卵巢癌细胞生物学行为的关系。最后,分析MACCl可能参与的信号传导系统,初步探讨MACCl参与卵巢癌侵袭和转移的可能分子机制。本研究分为以下四个部分:II摘要第一部分MACCl、HGF和C.met在卵巢上皮性癌组织中的表达及其意义方法1.采用RT-PCR技术检测2

8、0例正常卵巢组织、19例良性卵巢上皮性肿瘤和52例上皮性卵巢癌组织中MACClmRNA的表达情况。2.采用免疫组化和westernblot技术检测20例正常卵巢组织、19例良性卵巢上皮性肿瘤和52例上皮性卵巢癌组织中MACCl、HGF和C.met蛋白的表达情况。3.分析MACCl、HGF和C.met的异常表达与卵巢癌临床病理参数的关系。.4.探

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