椒目油对大鼠气道重建的防治作用

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1、椒目油对大鼠气道重建的防治作用【摘要】目的：研究椒目油对哮喘大鼠模型Ⅲ型胶原、增殖细胞核抗原（PA）的表达水平及气道重建的影响，为椒目的临床应用提供理论依据.方法：将雄性SD大鼠30只随机分为3组：哮喘组、治疗组、对照组，每组动物10只，用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏和雾化吸入激发建立哮喘大鼠模型，采用计算机图像分析免疫组化气道璧中Ⅲ型胶原的表达，并测量各组支气管壁的厚度.结果：免疫组化结果显示,Ⅲ型胶原阳性表达的平均吸光度:哮喘组大鼠(19.24±0.24)明显高于对照组(2.75±0.22，P<0.0

2、1);治疗组(10.16±0.37)明显低于哮喘组(P<0.01).PA的表达哮喘组明显高于对照组(P<0.05);治疗组低于哮喘组(P<0.05).哮喘组支气管壁厚度(10.24±2.05)明显高于对照组(5.81±0.73，P<0.01);治疗组(8.45±1.67)明显低于哮喘组(P<0.01).结论：椒目油不但能有效治疗哮喘，而且还能有效防止气道重建，其作用机制可能是抑制了Ⅲ型胶原和PA的生成.【关键词】椒目油；哮喘；气道重建；增殖细胞核抗原；胶原Ⅲ型　　中药椒目治疗支气管哮

3、喘历史悠久，具有很好的疗效，目前国内许多单位相继开展了椒目治疗哮喘研究，取得一定成果［1］.从国内大量的　　2.2大鼠支气管平滑肌厚度的变化　　哮喘组(图1A)大鼠哮喘组大鼠气道壁厚度较对照组明显增加(P<0.05)，治疗组(图1B)大鼠气道壁厚度较哮喘组明显降低(P<0.05)，但与对照组（图1C）相比仍较高(P<0.05，表1).表1Ⅲ型胶原在支气管肺组织的阳性表达及支气管平滑肌厚度的变化(略）　　2.3Ⅲ型胶原的表达　　各组动物气道及其周围肺组织均可见呈深棕色圆形颗粒的Ⅲ型胶原阳性反应细胞

4、,主要分布在气道壁黏膜下层.　　灰度分析结果显示哮喘组表达明显高于对照组，治疗组低于哮喘组略高于对照组(P<0.01，表1).　　2.4PA表达的变化　　各组动物气道及其周围肺组织均可见染色呈棕黑色圆形颗粒的PA蛋白阳性反应细胞.分布于上皮下基底膜、平滑肌细胞及外周成纤维细胞.哮喘组阳性细胞颗粒数目及灰度明显高于对照组(P<0.01)；治疗组明显低于哮喘组(P<0.01)，略高于对照组(P<0.01).　　3讨论　　气道重建又称气道重塑或重构［3］，它是哮喘病理特征之一，哮喘气道重建是一个

5、集合性术语，特指哮喘患者气道壁结构的改变不同于正常气道组织学改变，在哮喘患者气道中除有炎症性细胞浸润外主要表现为上皮脱落，气道平滑肌层的增生、肥大以及基底膜增厚和玻璃样变.气道重建是顽固性哮喘反复发病的基础，因此防止哮喘气道重建是目前国内外研究的一大热点.而目前评价任何一个治疗哮喘药物，除了它的平喘、止咳之外，还要评价它能否有防止哮喘气道重建的作用.　　　　哮喘气道重建的机制非常复杂，涉及到多种细胞、细胞因子及炎症介质等.在哮喘反复发作过程中，气道反复损伤和修复，由于各种致上皮损伤因素持续存在，引起损伤修复不平衡

6、，导致气道重建.其主要特征是平滑肌细胞增殖及细胞外基质沉积［4］.细胞外基质沉积主要由胶原及少量纤连蛋白等构成［5］.细胞外基质中胶原的沉积主要为Ⅲ型、Ⅴ胶原的显著增生，其部位主要位于黏膜下层，基底层和肺间质中增加不明显，Ⅲ型胶原的增生成为细胞外基质沉积的主要病理基础［6］.气道重建是气道受到慢性炎症反复刺激的结果，可溶性生长因子、炎性因子等在其中发挥着重要作用，它们具有诱导成纤维细胞、气道平滑肌的有丝分裂作用，或促进结缔组织的合成.转化生长因子的表达与成纤维细胞数相关，并能增加气道平滑肌细胞DNA合成以促进细胞

7、分裂增殖.　　　　PA是一种分子质量为36ku的蛋白质，在细胞核内合成，并存在于细胞核内，为DNA聚合酶δ的辅助蛋白.PA表达仅见于增殖细胞且细胞周期密切相关，其表达量与DNA的合成一致，因此PA表达情况可作为评估组织中细胞增殖状态的一个可靠指标.　　我们的结果发现，哮喘组支气管上皮细胞肿胀、脱落，管壁增厚，管腔变窄，管壁内及管周有大量炎性细胞浸润，以EOS和淋巴细胞为主；治疗组支气管上皮细胞的炎症反应较哮喘组为轻，支气管壁及管腔内的炎症细胞也大为减少；对照组则无上述改变.免疫组化结果显示Ⅲ型胶原,PA的表达哮喘

8、组明显高于对照组(P<0.01);治疗组低于哮喘组略高于对照组(P<0.01).说明早期服用椒目油不仅可以有效地治疗哮喘，而且可以有效地预防气道重建.　　中国特有的中西医结合疗法针对哮喘“急则治标(西医解痉，中医降气)，缓则治本(补肾固本)”的方法，使哮喘患者获得较长时间的缓解期［7］.有许多关于椒目治疗哮喘的报道［8-9］大多数是从临床效果来说明，而缺乏药理