pparγ2基因pro12ala多态性与肥胖的相

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1、PPARγ2基因Pro12Ala多态性与肥胖的相【摘要】目的探讨PPARγ2基因Pro12ALa多态性与肥胖相关性。方法将研究对象按体质量指数（BMI）分为肥胖组（n=62）和非肥胖组（n=121）。再将所有对象分为糖尿病组（DM组,n=79）、对照组（NC组,n=104）；DM组和NC组再分别根据BMI分为肥胖组与非肥胖组。应用聚合酶链反应限制性内切酶片段长度多态性方法检测PPARγ2基因Pro12Ala多态性。比较肥胖与非肥胖组、DM组中的肥胖与非肥胖人群、NC组中的肥胖与非肥胖人群基因型频率及等位基因频率。结果肥胖组和非肥胖组基因型频率和等位基因频率无显著性差异（P>0.

2、05）。进一步分组，DM组中肥胖组和非肥胖组基因型频率、等位基因频率之间无显著性差异（P>0.05），NC组中肥胖组和非肥胖组基因型频率无显著性差异（P>0.05），而等位基因频率有显著性差异（P<0.05）。结论PPARγ2基因Pro12Ala多态性与无T2DM家族史的正常人群肥胖有关，与糖尿病组中肥胖人群无关。【关键词】过氧化物酶体增殖物激活受糖尿病型肥胖症多态性限制性片断长度聚合酶链反应肥胖和糖尿病有密切关系。调查发现，70%～80%的2型糖尿病(T2DM)患者同时是肥胖者，它们可能有共同的遗传因素。过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisomeprolife

3、ratoractivatedreceptor,PPAR)γ是由配体激活的核转录因子，属Ⅱ型核受体超家族成员，PPARγ2与脂肪细胞分化、肥胖、胰岛素抵抗关系密切而成为近年来研究的热点。PPARγ2基因外显子B的第12密码子的脯氨酸替换为丙氨酸，即Pro12Ala是PPARγ2最常见的多态位点。目前有关PPARγ2基因Pro12Ala多态性肥胖相关性国内外研究不一致[13]。笔者应用聚合酶链反应限制性内切酶片段长度多态性（PCRRFLP）方法，对西安地区肥胖与非肥胖组、糖尿病组中的肥胖与非肥胖人群、对照组中的肥胖与非肥胖人群PPARγ2基因Pro12Ala多态性研究，探讨PPA

4、Rγ2基因Pro12Ala多态性与肥胖的相关性。1对象与方法1.1对象于2001年我院门诊、住院病人及健康查体者。首先将研究对象按体质量指数（BMI）分2组：（1）肥胖组（BMI≥25kg/m2，n=62）。男性41例，女性21例，年龄（52.84±8.23）岁（43～74岁）。（2）非肥胖组（BMI<25kg/m2，n=121）。男性70例，女性51例，年龄（53.47±7.54）岁（45～73岁）。再将研究对象按文献[4]标准分为2组：（1）糖尿病组（DM组，n=79），均为T2DM患者，且其家族中有血缘关系的T2DM患者≥2人，男性44例，女性3例，年龄（54.41±7.3

5、0）岁（46～74岁）；（2）对照组（NC组，n=104），均与T2DM无血缘关系，经口服糖耐量（OGTT）试验排除T2DM且符合糖耐量正常的诊断标准，男性67例，女性37例，年龄（53.90±8.41）岁（43～72岁）。然后再按BMI将DM组分为肥胖组（n=29）与非肥胖组（n=50）；将NC组分为肥胖组（n=33）与非肥胖组（n=71）。研究对象由医护人员在标准条件下按统一规范测量身高、体质量，并计算BMI。1.2方法1.2.1主要试剂全基因组DNA小量制备试剂盒（天为时代有限公司）；PCR引物和内切酶HpaⅡ（北京赛百盛基因技术有限公司）。1.2.2基因组DNA的提取每位对象空

6、腹12～14h后抽取静脉血1mL，EDTA抗凝，按全基因组DNA小量制备试剂盒提取DNA，-20℃保存。1.2.3PPAR基因PCR扩增引物序列[5]：上游：5′GCCAATTCAAGCCCAGTC3′下游：5′GATATGTTTGCAGACAGTGTATCAGTGAAGGAATCGCTTTCCG3′PCR反应体系总体积13μL。包括Mix6μL，上游引物2μL，下游引物2μL，蒸馏水2μL，模板DNA1μL。反应条件：94℃5min→94℃45s→56℃45s→72℃30s，共30个循环，最后72℃延伸7min。1.2.4PPARγ2Pro/Ala基因型鉴定PCR产物用Hpa

7、Ⅱ酶切。酶切体系为：总体积20μL，包括10μLPCR产物、0.5μLHpaⅡ（5单位内切酶）、7.5μLDD组中肥胖组和非肥胖组基因型频率、等位基因频率比较无统计学意义（P>0.05）。NC组中肥胖组和非肥胖组基因型频率比较无统计学意义（P>0.05），但等位基因频率比较有统计学意义（P<0.05，见表2）。表1肥胖组与非肥胖组PPARγ2基因Pro12Ala多态性比较表2对照组及糖尿病组PPARγ2基因Pro12Ala多态