促红细胞生成素对缺氧缺血新生大鼠脑

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1、促红细胞生成素对缺氧缺血新生大鼠脑【摘要】目的探讨重组人红细胞生成素(rhEPO)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)、脑水肿及NO、MDA含量的影响。方法选用7日龄DA含量。结果假手术组脑的含水量及NO和MDA含量均明显低于HIBD组，差异有显著性(P<0.05)；rhEPO治疗组测定值明显低于生理盐水对照组(P<0.05)，而与硫酸镁治疗组相比差异无显著性(P＞0.05)。结论促红细胞生成素(rhEPO)和硫酸镁一样对脑缺氧缺血具有保护作用，可以减轻脑水肿，抑制自由基的生成。【关键词】鼠；缺氧缺血性脑损伤；促红细胞生成素；脑水肿；一氧化氮；丙二醛【Abstra

2、ct】ObjectiveToobservetheeffectsofrebinanthumanerythropoietin(rhEPO)onthecerebraledemaandthecontentsofNO，MDAofthehypoxic-ischemicratbrain.Methods80infantgSO4treatedgroup.Eachratinthelast3grouplytakenoutfromeachgrouptoobservethepathologicsection，andtomeasurethecontentsof-operatedcontrolgroupa，

3、andinhibittheproductionfreeradical.【Keyicbraindamage；erythropoietin；cerebraledema；NO；MDA围生期窒息所致的缺氧缺血性脑损伤(HIBD)是引起新生儿死亡或其神经系统发育障碍的主要原因。因此，积极探索安全、合理、有效的治疗方案是当今研究的热点。笔者应用促红细胞生成素治疗HIBD动物模型，观察大鼠脑组织中一氧化氮（NO）和丙二醛(MDA)水平及其对脑水肿的影响，旨在对促红细胞生成素的作用机制作进一步探讨，并为临床治疗HIBD提供理论依据。1材料与方法1.1实验动物及分组选用健康7日龄DA检测试剂盒均

4、由南京建成生物工程研究所提供。1.3方法1.3.1模型制备乙醚麻醉后取颈正中切口，分离并用丝线结扎右侧颈总动脉后缝合皮肤，术后恢复2h，然后置于37℃水浴且通入8％氧气和92％氮气的混合气体的密闭缺氧箱中缺氧2h，即制成缺氧缺血性脑病模型［1］。其模型检验依据脑组织的病理改变。1.3.2各组处理方法假手术组只分离右侧颈总动脉，不结扎、不缺氧，亦不给予药物干预；生理盐水对照组制成模型前30min腹腔注射生理盐水0.5ml/10g；rhEPO治疗组在制成模型前30min腹腔注射rhEPO3000u/kg；硫酸镁治疗组则给予硫酸镁100mg/kg腹腔注射。上述动物均回笼饲养，48h后

5、断头处死，取右侧大脑半球。1.3.3标本的获取和结果的检测（1）电子天平精确称量右侧大脑半球重量（湿重），将脑置于180℃恒温烤箱中烘干48h至恒重称重（干重），计算脑的含水量％＝（湿重－干重）／湿重×100％；（2）取右侧大脑半球皮质100mg，按1g∶10ml加入冰盐水作为匀浆介质，用研钵在冰水浴中研磨10min，以3000r/min的速度离心15min，取上清液，即制成10％脑组织匀浆。NO含量用硝酸还原酶法测定，MDA含量用改良的硫代巴比妥酸法测定。匀浆蛋白含量用双缩脲法测定。严格按照使用说明操作；（3）取右侧大脑半球，10％多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，切取中级至视交叉

6、处组织脑组织切片(6μm)，H-E染色，观察病理学改变。1.4统计学分析采用方差分析，所得数据以均数±标准差（x±s）表示，以P＜0.05为有统计学意义。2结果2.1病理改变(1)假手术组：外观显示大鼠脑膜血管无扩张，脑组织无水肿。光镜下显示脑各部位结构及层次清楚，细胞形态结构清晰完整。(2)生理盐水对照组：肉眼见大鼠脑膜血管中度扩张，组织极度水肿。镜下显示脑各部位结构及层次紊乱，细胞水肿明显，毛细血管周围间隙增宽，神经纤维疏松。部分神经细胞固缩、细胞质深染，提示神经元变性；部分细胞嗜酸变性提示细胞坏死。（3）两干预组：外观显示大鼠脑膜血管轻度扩张，脑组织轻度水肿。光镜下显示脑

7、各部位结构及层次较生理盐水对照组清楚，细胞轻度水肿。神经元变性及脱失较生理盐水对照组减轻。2.2各组脑组织含水量与假手术组比较，生理盐水对照组脑含水量明显增加（P<0.05），EPO治疗组与生理盐水对照组比较，脑含水量明显减少（P<0.05），EPO治疗组和硫酸镁治疗组二者差异无显著性（P＞0.05）。表1各组脑组织的含水量（x±s）2.3各组脑组织的MDA和NO含量与假手术组比较，生理盐水对照组脑皮质MDA、NO含量明显增加（P<0.05），EPO治疗组与生理盐水对照组比