化疗药物对trail在急性白血病原代细胞表达的影响

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1、化疗药物对TRAIL在急性白血病原代细胞表达的影响作者：刘延方，陈胜梅，孙慧，董见喜，张秋堂【摘要】为了探讨TRAIL在急性白血病原代细胞表达及化疗药物对TRAIL在急性白血病细胞表达的影响，采集16例初诊的急性白血病患者化疗前、化疗1天后、3天后和5天后的外周血，分离单个核细胞并用流式细胞术检测TRAIL的表达；同时采集12例初诊的急性白血病患者化疗前骨髓，分离单个核细胞进行培养，分别加VP-16和/或干扰素，培养一定时间后检测TRAIL的表达水平。结果表明：与化疗前相比，初治急性白血病患者外周血单个核细胞TRAIL的

2、表达水平在化疗1天后即明显提高（P<0.05）；在体外培养实验中，VP-16上调TRAIL在急性白血病骨髓单个核细胞的表达(P<0.05)，VP-16联合干扰素与单独应用VP-16相比，TRAIL的表达水平无差异（P>0.05）。结论：化疗药物治疗白血病的机制之一可能是通过诱导TRAIL的表达而促进白血病细胞的凋亡。【关键词】急性白血病　　InfluenceofChemotherapyonExpressionofTRAILinPrimaryAcuteLeukemicCells　　AbstractInor

3、dertoexploretheexpressionofTRAILinprimaryacuteleukemiccellsandtheeffectofchemotherapyeuticdrugonTRAILexpressioninacuteleukemiccells，theexpressionofTRAILetryonday0，day1，day3andday5in16patientsiarecEivedchemotherapy.Meanarroononuclearcellsofacuteleukemiapatientsetr

4、yat24，48and72hoursaftertreatment.Theresultsshoononuclearcellsday1afterchemotherapy(P<0.05).Ininvitroculturetest，VP-16upregulatedtheexpressionofTRAILonacuteleukemiabonemarroononuclearcells(P<0.05).paredotherapyinvivoandaftertreatmentayplayanimportantroleinch

5、emotherapyofleukemia.　　Keyia;chemotherapydrug细胞凋亡是程序性细胞死亡过程，在机体的发生发展及自身稳定中起着关键作用，对肿瘤细胞的生长具有抑制和免疫监视作用。肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TNF-relatedapoptosis-inducingligand，TRAIL）是TNF超家族的新成员，它与其特异性死亡受体结合，激活多种凋亡信号传导途径，诱导细胞凋亡［1］。赵湜等［2］检测了TRAIL及其受体在急性髓系白血病细胞中的表达，发现患者组TRAIL、DR4和DR5表达高。然

6、而，关于化疗药物对TRAIL在急性白血病细胞表达的影响未见报道。本研究应用流式细胞术检测了化疗药物在体内外对急性白血病细胞表达TRAIL的影响，并通过分析平均荧光强度（meanfluorecenceintensity，MFI）从分子水平上了解细胞表达TRAIL的变化，旨在探讨TRAIL表达在急性白血病化疗中的意义。材料和方法　　研究对象及标本处理　　经细胞形态学、组织化学和细胞免疫学确诊的初诊急性白血病患者16例，急性非淋巴细胞白血病以标准DA或AA方案治疗，急性淋巴细胞白血病以VDCP方案治疗。于化疗前及化疗1、3和5

7、天后取外周血，肝素抗凝，以淋巴细胞分离液（Ficoll，密度1.077）按常规方法分离单个核细胞，并调整细胞浓度为1×107/L；选择其中12例，化疗前取其骨髓10ml分离单个核细胞后于加有VP-16、干扰素的培养液中培养，取培养前、培养24、48及72小时的细胞，用PBS调整细胞浓度为1×107/L。　　主要试剂　　同型对照IgG、PE-TRAIL鼠抗人单克隆抗体(100μg)和Percp-cy5.5-CD45鼠抗人单克隆抗体，均购自美国BectonDickinson公司，用前PBS稀释20倍。含20%胎牛血清的TC-

8、199培养液购自杭州四季青生物工程材料有限公司。　　细胞培养　　将分离的急性白血病骨髓单个核细胞在加有VP-16、干扰素的培养液中培养（细胞浓度为1×105/L），分4组：第1组为空白对照组，第2组加VP-16（终浓度为50μg/ml），第3组加干扰素（终浓度为2000U/ml），第4组加VP-16和干扰素（药物终浓