关木通及其炮制品中马兜铃酸a的含量变化

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1、关木通及其炮制品中马兜铃酸A的含量变化【摘要】目的考察关木通药材及其炮制品中马兜铃酸A的含量变化。方法采用高效液相色谱法（HPLC）检测。色谱条件：色谱柱为Lichrospher-C18柱（4.6mm×200mm，5μm），流动相为甲醇-0.1%冰醋酸溶液(70∶30)，流速1.0ml/min,检测波长310nm，柱温为30℃。结果炒焦、滑石粉炒、麸炒3种炮制品中的马兜铃酸A含量均较生品有所降低,并且滑石粉炒后的炮制品降低率最高。结论这3种炮制方法能够降低关木通中马兜铃酸A的含量，达到了降低毒性的目的。【关键词】关木通炮制品马兜铃酸A关木通为

2、马兜铃科植物东北马兜铃AristolochiamanshuriensisKom.的干燥藤茎，主要含马兜铃酸类化合物。近年来，关于马兜铃酸引起肾损害的报道较多，称之为马兜铃酸肾病［1］。虽然含马兜铃酸的中药肾毒性是确定无疑的，但同时该类中药使用历史悠久，疗效确切，临床使用广泛，如果因噎废食，采取一刀切的办法，全部取消含马兜铃酸中药在临床上的使用，既不可能，也不现实。中药的应用是以传统炮制和复方配伍为特色的。关于关木通的复方配伍降低毒性的研究目前有很多，但是用传统炮制方法是否能降低其毒性尚未见系统研究报道。为降低毒性，本实验以炒焦、滑石粉炒和麦麸

3、炒这3种方法对关木通进行处理［2］，并采用HPLC法测定了关木通药材及其炮制品中马兜铃酸A的含量，定量分析关木通炮制前后其马兜铃酸A的含量变化，从一个侧面探讨中药炮制理论的依据。　　1仪器与试药　　日本岛津LC-10ADVP高效液相色谱仪，岛津SPD-10AVP紫外检测器，Hm×200mm，5μm）,流动相为甲醇-0.1%冰醋酸溶液(70∶30)；流速1.0ml/min；检测波长310nm；柱温为30℃；进样20μl。色谱图见图1～2。　　图1马兜铃酸A对照品的HPLC图（略）　　图2关木通药材的HPLC图（略）　　2.2溶液的制备　　2.2

4、.1供试品及炮制品的制备取关木通原药材，除去杂质，过40目筛。　　炒焦：称取关木通饮片100.0g，置炒制容器内，用中火加热，炒至表面焦黄或焦褐色，断面深黄色，有香气逸出，取出，晾凉，装至密封袋封口。　　滑石粉炒：称取关木通饮片50.0g，滑石粉20.0g。先将滑石粉至热锅内，用中火加热炒至灵活状态时，投入关木通饮片，不断翻炒，炒至饮片表面颜色加深时，取出，筛去滑石粉，晾凉，装至密封袋封口。　　麸炒：称取关木通饮片100.0g，麦麸10.0g。先将锅烧热，撒入麦麸，用中火加热，待冒烟时投入关木通饮片，不断翻炒，炒至深黄色时，取出，筛去麦麸，晾

5、凉，装至密封袋封口。　　2.2.2对照品溶液的制备精密称取在五氧化二磷干燥器中真空干燥至恒重的马兜铃酸A对照品适量，加甲醇溶解，制成每毫升含1.025mg的溶液，作为母液。精密吸取1.025mg/ml的母液4ml，加甲醇定容至50ml的量瓶，得0.082mg/ml的对照品溶液，备用。　　2.2.3供试品溶液的制备精密称取关木通样品粉末2g，置圆底烧瓶中，加入甲醇30ml/20ml，水浴加热回流提取2次，第1次2h，第2次1h，滤过,合并滤液，回收甲醇后，定容至25ml量瓶中；取1ml并定容至10ml量瓶中，即作为药材供试品溶液。按该法制得“2

6、.2.1”项下3种炮制品的供试品溶液。每种供试品均按此法做3份。　　2.3线性关系考察精密吸取浓度为0.082mg/ml的对照品溶液1，2，3，4，5，6ml，甲醇稀定容释至10ml。在上述色谱条件下进样20μl进行测定。以浓度C（μg/ml）为横坐标，以马兜铃酸A平均峰面积Y为纵坐标进行线性回归，得回归方程，C=4×10-5Y-0.4665，r=0.9998，线性范围是8.2～49.2μg，结果表明马兜铃酸A在8.2～49.2μg范围内线性关系良好。　　2.4精密度实验精密吸取浓度为24.6μg/ml的对照品溶液20μl，连续进样5次，测得

7、马兜铃酸A峰面积值的RSD为1.11%,结果表明精密度良好。　　2.5稳定性实验精密吸取同一份药材供试液20μl，分别于0，3，6，9，12，15h进样，记录峰面积,其RSD为1.15%，结果表明在15h内基本稳定。　　　　2.6重复性实验精密称取同一批关木通药材2g,共5份，用与“2.2.3”项下相同的方法制得供试液，测得的马兜铃酸A的含量RSD=2.80%，结果表明重复性良好。　　2.7加样回收率实验精密称取已知含量的关木通药材1g，共6份，分别置圆底烧瓶中，各精密加入一定量的马兜铃酸A对照，用与“2.2.3”项下相同的方法制得供试液。结

8、果见表1。　　表1马兜铃酸A加样回收率实验结果（略）　　2.8药材及炮制品的测定精密吸取各供试液20μl，注入液相色谱仪，各进3针，样品色谱图见附图用外标一点法计算