活血健脑胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞的保护作用

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1、活血健脑胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞的保护作用【摘要】【目的】研究活血健脑胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞的保护作用。【方法】选用SD大鼠，随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组（剂量为10.8mg·kg-1·d-1）、活血健脑胶囊组（剂量为1.8g·kg-1·d-1），后3组再分为缺血2h及再灌注6、12、24h组；采用线栓法复制大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，免疫组织化学法检测神经细胞细胞色素C（CytC），原位杂交法检测Caspase3mRNA、Caspase9mRNA的表达。【结果】活血健脑胶囊组脑缺血/再灌注6h细胞色素C阳性弱表达,与模型组比较有显著性差异(

2、P＜0.01)，脑缺血/再灌注12h、24h细胞色素C的阳性表达与模型组及假手术组比较无显著性差异(P＞0.05)。模型组脑缺血再灌注24h海马Caspase3mRNA、Caspase9mRNA的表达达高峰(P＜0.01)；活血健脑胶囊组脑缺血/再灌注24hCaspase3mRNA、Caspase9mRNA表达均减弱,与模型组比较有显著性差异(P＜0.01)。【结论】活血健脑胶囊对局灶性脑缺血再灌注后神经细胞的保护作用可能与其能影响神经细胞CytC的释放，降低脑缺血/再灌注后脑组织Caspase3、Caspase9的活性，从而阻断细胞凋亡的发生有关。【关键词】活血健脑胶囊

3、/药理学；脑缺血/中药疗法；脑组织/病理学；细胞凋亡；疾病模型，动物；大鼠1材料与方法1.1动物与药物SD大鼠78只，体质量300～350g，鼠龄5～6月龄，雌雄各半，由河南省实验动物中心提供（合格证号：0001475）。活血健脑胶囊由上海复星临西制药有限公司提供（批号：200400306）；尼达尔片（尼莫地平），20mg/片，由天津市中央药业有限公司生产（批号：020602）；9g/L的氯化钠注射液由北京双鹤药业有限公司提供(批号:030312312)。1.2试剂与仪器PM10AD光学显微镜（OlympusopticalCo.Ltd，JAPAN）；HITACHI7500型透射电子

4、显微镜（JAPAN）；LEiCARM2145型自动切片机（德国）；phorbolestersil(atfinalconcentrationof0.20μmol/L)+ionomycin(atfinalconcentrationof1mg/L)foranother48hours.AftermarkedbymonoclonalantibodyofCD3andCD71,theexpressionofCD3+CD71+lymphocytesetry.ResultsSINOinhibitedthelymphocytesproliferationinaconcentrationdependan

5、tmanner,andparticularlyhadaninhibitiononJurkatscellsatG0/G1phase;MTXhadaninhibitiononSphase.ThestimulationofConAandphorbolestersil+ionomycinobviouslyincreasedtheexpressionofCD3+CD71+lymphocytes(P＜0.01);SINOattheconcentrationsof1and0.5mmol/LinhibitedtheexpressionofCD3+CD71+lymphocytesafterConAst

6、imulation,andSINOattheconcentrationof1mmol/LinhibitedtheexpressionofCD3+CD71+lymphocytesafterstimulationofphorbolestersil+ionomycin(P＜0.05).ConclusionSINOcaninhibittheactivationandproliferationofTlymphocytes,andblockthecellsatG0/G1phase.Itsmechanismmayberelatedphocytesandacology;ARTHRITIS,RHEUM

7、ATOID/TCDtherapy;TLYMPHOCYTES;CELLCULTUREHPIAS1000高清晰度彩色病理图文分析系统（同济医科大学千屏影像工程公司）；CytC、Caspase3mRNA、Caspase9mRNA原位杂交试剂盒，由武汉博士德生物工程有限公司提供。1.3分组与给药将78只大鼠按随机法分为假手术组6只，模型组、尼莫地平组、活血健脑胶囊组各24只，后3组再分为缺血2h及再灌注后6、12、24h组，每组6只。于造模前3d，尼莫地平组