还原型谷胱甘肽对胰腺炎相关性腹腔积液诱导的大鼠肝损伤的疗效及其机制

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1、还原型谷胱甘肽对胰腺炎相关性腹腔积液诱导的大鼠肝损伤的疗效及其机制作者：姜宝飞,刘斌,张建淮,于仁,葛恒发【摘要】目的建立大鼠经腹腔内注射胰腺炎相关性腹腔积液(PAAF)诱导的急性肝损伤模型并研究还原型谷胱甘肽(GSH)对该损伤的疗效及机制。方法先制备急性出血坏死性胰腺炎模型(AHNP)并收集PAAF。A组（对照组）腹腔内注射生理盐水，B组（模型组）腹腔内注射PAAF，C组(GSH治疗组)在向腹腔内注射PAAF前1h于尾静脉注射GSH。腹腔注射后6h、12h分批处死大鼠，每时间点8只。测定大鼠ALT、AST、血清淀粉酶（AmYL）浓度，TBA法检测肝组织丙二醛（MDA）含量，ELIS

2、A法检测血清肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素（IL-6），苏木精-伊红染色后光镜观察胰腺及肝损伤情况。结果B组血清ALT、AST、AmYL较同时间段A组升高（P<0.05），血清TNF-α、IL-6浓度及肝组织MDA含量明显升高(P<0.05)，B组肝细胞水肿、炎性细胞浸润；C组与同时间段B组相比上述各指标均有降低(P<0.05)，肝病理损害较轻。结论GSH通过抗氧自由基、炎症递质的作用减轻PAAF诱导的肝损伤。【关键词】胰腺炎相关性腹腔积液；还原型谷胱甘肽；肝损伤Abstract:ObjectiveToinvestigatethetherapeuticeff

3、ectofreducedglutathione(GSH)onacuteliverinjuryinducedbyperitonealinjectionofPAAFbyestablishingtheanimalinjurymodelinratsandtoexplorethepossiblemechanismsunderlyingtheinjuryandprotection.Methods40ratsodels.Another48ratsizedinto3groups(n=16):groupAservedasthenormalcontrol,lnormalsaline(NS)injecte

4、dintotheperitonealcavityoftherats;groupBasthemodelcontrollPAAFinjectedintraperitoneally;groupCasthetreatmentgroup,g/kgadministratedintothecaudalvEin1hbeforePAAFinjection.At6hand12hafterintraperitonealinjection,theratseasured.Histopathologicalexaminationoftheliverandpancreassamplesinedatoxylinan

5、deosinstain.ThelevelsofIL-6andTNF-αinserumeperiod(P<0.05),andMDAinlivertissueingroupBainlivercellsingroupB,matorycells.Theparametersmentionedaboveultaneouslyloinistration.ConclusionsTheanimalmodelsofacuteliverinjuryinducedbyPAAFmatorymediators.Keyorrhagenecrosispancreatitis,AHNP)时可产生大量胰腺炎相关性

6、腹腔积液(pancreatitisassociatedasciticfluid,PAAF)，其含有多种毒性物质和有害物质，由于肝是胰腺血液回流的第一站，同时又是多种细胞因子的灭活场所［1］，肝是重症急性胰腺炎（SAP）时主要受损脏器之一。目前研究主要集中于胰腺病变所引起的肝损害，而对胰腺炎相关性腹腔积液(PAAF)是否可导致肝损害研究甚少。为此，本实验用谷胱甘肽（GSH）治疗PAAF诱导的肝损害大鼠，通过观察肝功能指标及血清TNF-α、IL-6以及肝组织丙二醛（MDA）含量，从而探讨其可能的机制。1材料和方法1.1动物和试剂清洁级健康成年SD大鼠，雌雄不拘，体重250～300g，由徐

7、州医学院实验动物中心提供。牛磺胆酸钠购自美国Sigma公司,注射用GSH由重庆药友制药有限责任公司提供。ALT、AST、血清淀粉酶（AmYL）浓度应用全自动生化分析仪测定，TNF-α、IL-6、MDA试剂盒购自上海领潮生物科技有限公司。1.2大鼠急性胰腺炎相关性腹腔积液的制备参照1.3PAAF的收集处理及大鼠肝损伤诱导模型的建立ANP大鼠模型建立后7h，无菌状态下收集PAAF，4℃、2500r/min离心15min，取上清液。每只AHNP大鼠产生5～10m