大鼠实验性胃溃疡自愈期间肠嗜铬样细胞的变化

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1、大鼠实验性胃溃疡自愈期间肠嗜铬样细胞的变化何美蓉，张绍荣，宋于刚，陈学清【关键词】胃溃疡Changeinenterochromaffinlikecellsduringhealingofexperimentalgastriculcerinrats　　【Abstract】AIM:Toinvestigatethemorphologicandfunctionalchangesinenterochromaffinlike(ECL)cellsduringthehealingofexperimentalgastriculcerinrats.METHODS:Aceticacidinduce

2、dulcersepointsduringulcerhealing,ECLcells,histidinedecarboxylase(HDC)mRNAexpressionandhistaminecontentmunohistochemicalstaining,reversetranscriptionpolymerasechainreactionandradioimmunoassay,respectively.RESULTS:paredeangrayvalueofHDCpositivecellsingastricmucosaofulcerratsdecreasedimmediat

3、elyonday1,mostmarkedlyonday6.Theybegantoincreaseonday9andreturnedtotheinitiallevelsonday12.TheHDCmRNAexpressioningastricmucosaofulcerratsdecreasedonday1,mostmarkedlyonday6,subsequentlyrosegraduallyandalmostnormalizedonday9.Thehistaminecontentingastricmucosaofulcerratsalsodecreased,loaybepa

4、rticipateintheregulationofulcerhealingbyinesynthesis.　　【Keyaffinlikecell;histidinedecarboxylase;histamine　　【摘要】目的：探讨肠嗜铬样细胞与大鼠实验性胃溃疡自愈的关系.方法：通过制备大鼠乙酸性胃体溃疡模型，采用免疫组化、逆转录聚合酶链反应（RTPCR）和放射免疫测定的方法，观察溃疡自愈过程中大鼠胃黏膜内ECL细胞形态、组氨酸脱羧酶（HDC）mRNA和组胺含量的变化.结果：胃溃疡大鼠胃黏膜内HDC阳性细胞率和胞质平均灰度值在制模术后第1日即开始降低，术后第6日达到最低，随

5、后开始回升，术后第12日基本正常.胃黏膜内HDCmRNA表达在制模术后第1日开始降低，第3日最明显，第6日开始恢复，第9日后接近正常.制模术后胃黏膜内组胺含量也出现下调，以术后第6日为最低.结论：ECL细胞可通过减弱其合成组胺的功能，参与胃溃疡自愈的调节过程.　　【关键词】胃溃疡；肠嗜铬样细胞；组氨酸脱羧酶；组胺　　0引言　　肠嗜铬样（enterochromaffinlike，ECL）细胞是组胺的主要来源细胞，而组胺是胃酸分泌的重要调节因子，采用H2受体拮抗剂阻断组胺H2受体几乎能完全抑制胃酸分泌〔1-3〕.大鼠实验性胃溃疡自愈过程中，胃酸分泌自动下调，从而减弱对新生肉芽组

6、织的消化作用，以促进溃疡的修复.ECL细胞在溃疡自愈过程中的变化规律目前尚不清楚.我们对大鼠实验性胃溃疡自愈过程中，胃黏膜内组氨酸脱羧酶（histidinedecarboxylase,HDC）蛋白和mRNA表达及组胺含量变化进行了动态观察如下.　　1材料和方法　　1.1材料　　雄性8L/kgip麻醉.上腹部备皮，消毒，取剑突下1.5cm纵切口暴露胃，纯乙酸25μL滴于直径5mm的滤纸上，作用于腺胃前壁浆膜面90s，用生理盐水20mL将乙酸冲洗干净，腹壁逐层间断缝合，术后单笼饲养，给予标准饮食和自来水〔4〕.假手术组以生理盐水代替乙酸进行以上的所有造模过程.假手术组处死于制模

7、术后3d，胃溃疡组处死于术后1，3，6，9和12d，每次6只.沿胃大弯剪开大鼠胃壁，PBS液冲洗干净后平铺，将溃疡边缘勾画在玻璃纸上，以便用每小方格1mm×1mm的坐标纸估算溃疡面积.剪取溃疡旁约3mm×5mm的组织条，置于40g/L多聚甲醛溶液中，拟做石蜡块，行HE和免疫组化染色.剪取溃疡旁约60mg的胃黏膜，冻存于-80℃冰箱，一半用于RTPCR检测，另一半用于放射免疫测定.　　1.2方法　　1.2.1ECL细胞的免疫组化染色常规石蜡切片分别行HE和免疫组化染色.采用免疫组化SABC法对ECL细胞进行染色（SP