寿聪胶囊对老年痴呆模型大鼠学习记忆及海马区chat的影响

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1、寿聪胶囊对老年痴呆模型大鼠学习记忆及海马区ChAT的影响：牛彩琴徐厚谦张团笑【摘要】目的观察寿聪胶囊对老年痴呆（AD）模型大鼠的学习记忆、海马区乙酰胆碱转移酶（ChAT）阳性细胞的表达及病理形态学影响，探讨寿聪胶囊的防治机制。方法选用l（2mg·kg-1·d-1）2in，每只大鼠训练5次，然后通电，大鼠逃到安全台上开始记时，至大鼠从安全台上跳下停止记时，此段时间为潜伏期，大鼠5min内从安全台上跳下受到电击的次数为错误次数。训练后第二天进行防治前的跳台测试，在实验最后一次给药2h后进行第二次跳台测试，记录各组大鼠的跳台潜伏时间和受到电击的错误次数。　　1.6.2ChAT免疫反应阳性细胞的

2、检测　　最后一次行为学测试后，当天禁食，第二天进行标本采集。依次将各组大鼠迅速处死，在冰台上取出脑组织，沿矢状缝切开，甲醛固定，石蜡包埋。在兰州大学病理实验中心，将每个标本的一半脑组织取海马做ChAT的免疫组化法检测，免疫组化的封片在照相显微镜下观察各组海马的ChAT免疫反应阳性细胞变化。　　1.6.3脑组织病理形态学的观察　　每个标本的另一半脑组织作HE染色，镜下观察各组大鼠的病理形态学的变化。　　1.7统计学处理　　所有数据用x±s表示，使用SPSS11.0软件进行统计学处理，组间用LSD法或t检验。　　2.2寿聪胶囊对AD大鼠脑组织ChAT活性的影响　　与对照组（32.02±11.

3、39）相比，模型组（10.52±3.76）海马处ChAT的免疫反应阳性细胞明显减少（P＜0.01）；少数细胞的胞浆呈微弱黄色颗粒（弱阳性），大多数细胞浆呈蓝色（阴性）。与模型组相比，寿聪胶囊低（23.45±8.61）、高剂量组（25.62±10.43）海马的ChAT的阳性细胞数目显著增多（P＜0.01），大多数细胞胞浆呈棕色或黄色颗粒（阳性），少数细胞呈棕黄颗粒（强阳性），极少数细胞呈蓝色（阴性）；且寿聪胶囊高剂量组优于脑复康组（21.24±8.53，P＜0.05）（见图1）。　　2.3寿聪胶囊对AD大鼠脑组织病理形态学的影响　　与对照组相比，模型组的脑组织明显萎缩，脑回加深变宽；镜下海

4、马的神经元数目明显减少，形成稀疏区，细胞大小不等，排列散乱，细胞水肿、变性、坏死或呈空泡；胶质细胞大量增生，出现噬细胞现象、胶质结节等，伴大量的软化灶出现。与模型组相比，寿聪胶囊组的脑组织外观基本正常，脑回略增宽；镜下大脑皮层及海马的神经细胞病理改变明显减轻，细胞形态大多正常，细胞分布较均匀，偶见水肿、空泡样变细胞；胶质细胞增生明显减少，偶见噬细胞现象，软化灶大多溶解吸收，且寿聪胶囊高剂量组优于脑复康组（见图1）。表1寿聪胶囊对AD大鼠跳台试验的影响(略)　　3讨论中医认为，AD发病病机为肾虚精亏、痰瘀互阻。病位在脑，与心肝肾密切相关〔7〕。肾为先天之本，藏精养神；脑为元神之府，灵机记性

5、皆在脑中。当肾精亏虚，脑窍失养，心不藏神，肝失疏泄，故出现学习记忆及精神等方面的障碍。痰瘀阻窍是构成智能障碍及AD的基本病理表现。在AD的发生发展中，肾虚为本，痰瘀互阻为标，标本相互影响，共同致病。寿聪胶囊根据中药理论，并结合临床经验，采用补虚填精，解郁散结为治疗大法拟定的中药复方制剂，全方辩证和辨病相结合，标本兼顾，符合中医AD病机特点的遣方用药。本实验采用颈背部注射D半乳糖治亚急性衰老合并腹腔注射东莨菪碱损伤M型胆碱能受体，制备复合AD模型，该模型较单因素更贴近复杂的病理变化过程。通过跳台测试、脑组织病理形态学及海马中ChAT阳性表达的观测：模型组大鼠的学习记忆能力明显下降；脑组织

6、病理损害明显，细胞肿胀变性增多，胶质细胞大量增生，大量的软化灶生成；ChAT免疫反应阳性细胞明显减少，大多数呈阴性，极少数细胞呈弱阳性。表明本实验造模成功。运用寿聪胶囊防治后，学习记忆能力显著提高；脑组织病理损害明显减轻，正常神经元数目明显增多，软化灶大多的溶解吸收；ChAT阳性细胞数目显著增多，染色大多呈强阳性表达。其机制可能是寿聪胶囊抑制了D半乳糖所诱发自由基的过氧化损伤，通过上调ChAT的表达，拮抗了东莨菪碱所致的胆碱能神经系统的功能障碍，减轻脑组织的病理损害，增强了Ach与胆碱能M受体的亲和力，提高了突触传递的效率，从而减轻了AD大鼠学习记忆能力的下降。本研究结果还表明，寿聪胶

7、囊高剂量组的ChAT阳性表达和脑组织的保护作用优于脑复康。可能与寿聪胶囊的中医药整体调节、病证结合、多靶点作用的优势有关，量效关系有待于进一步的研究。【参考文献】　1杨济民.老年性痴呆的中医论治〔J〕.中医药研究,2001;17(2):589.　　2张晋,刘荣,董健,等.名老中医治疗老年性痴呆经验评述〔J〕.中医药信息,2001;18(3):12.　　3徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学〔M〕.北京:人民卫生出版社,1994: