活血化痰法对实验性大鼠非酒精性脂肪肝的干预作用研究

《活血化痰法对实验性大鼠非酒精性脂肪肝的干预作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、722光栅分光光度计：上海医用分析仪器厂；LXJ．04型离心沉淀机：上海医用分析仪器厂生产：电热健溢水浴箱髯S一216—79：沈阳理纯仪器厂生产；DY89-1电动玻璃匀浆机：宁波新芝科器研究所。2实验方法2．薹动物分组取80只大鼠以普通饲料适应性喂养l罔蕨，按体重随机分为6组，即正常组lO只、模型组lO只、十味湃脂康离热量组重0只、十昧肝脂廉中剂量组lO只、十味脬脂康低剂量组10只、东宝肝泰组lO只。6组大鼠饲养环境、条件一致。2．2药液制备取十味肝脂康胶囊内容物，用l％CMC-Na配制成含生药量为1．029／ml的药液，使用时按所需浓度稀释：东宝鼹泰片用王％e麓e—Na配制至成浓度为0

2、．059／ml的药液，放置4℃冰箱中冷藏备用。2。3动物模型的制备与给药方法依文献复制大鼠脂肪肝模型n1，除正常缀给以普通饲料外，其余各组均馁珏离黯镯料。给药缰问时按王。Oml／lOOg体重的体积灌照相应剂量的药物，每目一次，连续8周。按照成人】il蘩大鼠等效剂量关系换算，十味jl手脂康胶囊离剂量组1．029(生药量)／lOOg体重／d，中剂量组0．519(生药量)／lOOg体重／d，低剂量组0．2559(生药量>／lOOg体重／d，分别相当予旗床入嚣服量的王O、S、2．5倍。东宝肝泰对照维0．059／lOOg体重／d，相当予临床人日服量的10倍。正常组、模型组灌服等体积生理盐水。实验动

3、物自由进水和进食，每周称重一次，并相应调整给药量。并麓察各组大鼠的活动、进食及皮鼍情况。实验完毕后取材进行相关的检测。2，4取材与处理末次给药后，禁食12h，予次霹清晨摘眼球取血，分离斑清，测盘清TG、氍、HDL-C、ALT、AST、FFA、LP、空腹血糖(FPG)、空黢胰岛素(FINS)；处死动物迅速摘取群脏，焉滤纸啜予后称重，并取肝左叶组织0．1cmX0．1cm×0．2cm经4％戊二醛豳定，备作超薄切片、透射电镜观察肝组织超微结构变化；另取肝左叶小块组织以10％甲醛溶液固定，酒精逐级脱水，．石蜡包埋，切片，常规苏木精一伊红(潍)染色后，在光学显微镜下观察病理形态变化；再取肝左叶组织O

4、．39，置于预冷的异嚣酵中，冰浴匀浆为10％的匀浆液，4。e离心(3500rpm／min，10min)，提取上清液，测定肝组织中的TG、TC、HDL-C和FFA含量。2．5龟镜标本的制豫取肝左叶约O．IcmX0．1cm×0．2cm的缀织块，浸入到4篱戊=醛(PH7．2)孛，圈定48夺时，送河携医科大学电镜教研室制成超薄切片(厚度60nm)。嚣立珏一7500g型透射电子显微镜照相，观察肝细胞、线粒体等的超微结构和脂肪滴的形态。2．6指标的测定2．6．1一般情况观察实验前称重一次，实验期间观察大鼠的饮食、行为、状态、毛发及死亡情况，实验结束后处死动物时称体重、肝脏湿重。计算肝指数，即为肝脏湿

5、重(g)与体重(g)的百分比。2．6．2生化学指标2．6．2．1用日立一7020型全自动生化分析仪测血清中TG、TC、HDL．C和FPG，单位以mmol／L表示；ALT、AST单位以u／L表示；2．6．2．2用酶法测定肝脏TG、TC和HDL．C，单位以mmol／L表示；FF^单位以pmol／L表示。2．6．2．3空腹"定量：采用放射免疫方法，单位

6、

7、；乏ng／ml表示；空腹胰岛素定量：采用放射免疫方法。胰岛素抵抗指数用HOMA-MODLE【21的IRI公式：IRI雀(FPG·FINS)／22．5。以上指标测定均按试剂盒说明进行。2．6．3形态学指标在光镜和电镜下观察肝脏大体组织形态和超微

8、结构变化。3统计学处理方法3．1病理学半定量等级资料采用gidit分析。．3．2各组数据计量资料采用均数±标准差(i±s)表示，应用SPSSll。0forwindows统计分析软件进行数据分析，组间比较采用t检验。9钍幽．盘日_7Kl对脂肪肝模型大鼠一般情况的影响正常组大鼠皮毛光泽，体态活波，反应敏捷，食量正常。实验过程中菠常对照组大鼠因误伤死亡2只。实验早期，模型组大鼠体重与正常组相比增长迅速，食欲良好且性情较为温顺，不喜动；后期，模型维大鼠出现皮毛凌乱，精神不振，活动减少，食量及体重减少等情况。各治疗组大鼠一般情况较模型组为轻，十味肝脂康胶囊中剂量组明显，实验结束时基本趋于正常状况。

9、2对脂肪肝模型大鼠的体重和肝指数的影响，表1膳脏骶大簸体重、翳据数的变垂l：《夏±s>注：与正常缀栩圪厶△pO．05)。与模型组相比，各给药组均能使脂肪肝大鼠体重得到不同程度的降低(p<0．05)。与正常对照组大鼠比较，模型